אנגיוגנזה כירורגי אלוגרפט הטיביאלי חזירי: עצם חדשים בעלי חיים גדולים Vascularized דגם אלוגרפט ללא הפרדות צבע

כיום כל סוג של vascularized אלוגרפט ללא הפרדות צבע תלוי וארוך-טווח-החיסוני, קשה לתמוך עבור אינדיקציות לא החיים-קריטיות. אנו מציגים חזירי הטיביאלי VCA מודל חדש שניתן ללמוד עצם VCA ואף מדגימים את השימוש אנגיוגנזה כירורגית כדי לשמור על עצם הקיום ללא הצורך של החיסון לטווח ארוך-אפנון.

המטרה הכוללת של פרויקט זה היא להקים מודל חדש של בעלי חיים גדולים לחקר אובדן עצם סגמנטלי ושחזור באמצעות השתלת שוק מרוכבת בכלי דם. מדי שנה, כ-3,000 ניתוחים חוסכי גפיים מבוצעים בארצות הברית כדי לשחזר פגמים סגמנטליים בעצמות הנובעים מניאופלזמה, זיהום, אנומליה מולדת או טראומה. אפשרויות השחזור הנוכחיות קשורות לניידות משמעותית ולשיעורי סיבוכים גבוהים.

השימוש בהשתלת עצם עשוי לאפשר החלפת עצם שנכרתה בעצם חיה בגודל ובצורה. השתלת עצם מבוצעת רק לעתים רחוקות באופן קליני, בין היתר בשל הצורך בדיכוי חיסוני ארוך טווח כדי למנוע דחייה ולגרום למוות של רקמות. מודלים של בעלי חיים קטנים מדגימים אלטרנטיבה לדיכוי חיסוני של תרופות או השראת סבילות.

כמו כל השתלת איברים או גפיים, זרימת הדם נשמרת על ידי תיקון מיקרו-כירורגי של כלי הזנה. בניתוח מבוצע שלב ייחודי נוסף, הנחת אספקת כלי דם שמקורה בנמען בתוך התעלה המדולרית של המקטע המושתל. אספקת הדם הניאו-אנגיוגנית המתקבלת מתפתחת במהירות, יחד עם הפסקת הטיפול המדכא את מערכת החיסון לאחר שבועיים.

לפני השימוש הקליני, זה נבון להמשיך ולחקור השתלת עצם במודל של בעלי חיים גדולים כמתואר בסרטון זה. בגישה של שני צוותים, זוג של שני חזירי יוקטן קטנים שאינם תואמים ל-SLA מופעלים בו זמנית, כל חזיר משמש כמקבל ותורם. ראשית, קטע עצם טיביאלי שבו נקצר פדיקל כלי דם מהשוקה הימנית של כל חזיר.

בתהליך זה נוצר פגם בשוק בכל חזיר. באופן של השתלה צולבת, מקטעי עצם השוקה מוחלפים בין שני החזירים הקטנים של יוקטן כדי לשחזר כל פגם בעצם השוקה. לאחר מיקום מקטע עצם השוקה האלוגני והפגם בעצם השוק שנוצר, צרור ורידי עורקי שמקורו בנמען מהגפה האחורית התחתונה מושתל במקטע עצם השוקה האלוגני כדי לקדם זרימת דם ניאו-אנגיוגנית שמקורה בנמען בתוך מקטע העצם.

כדי להשיג את כלי הדם של ההשתלה, מבוצעת אנסטומוזה מיקרו-כירורגית של הפדיקל התזונתי של מקטע עצם השוק האלוגני לענף שריר של הגפה האחורית התחתונה של המקבל. קיבוע העצם מושג באמצעות לוחית דחיסה נעילה. בשבועיים שלאחר מכן, ניתן דיכוי חיסוני לטווח קצר כדי לשמור על סבלנות של פדיקל התזונה האלוגני עד ליצירת זרימת דם חדשה שמקורה בנמען החל מהצרור הוורידי העורקי המושתל.

חזירי מיני יוקטן מהירים יום לפני ההליך ושוקלים אותם למתן תרופות בקרה. לאחר טשטוש, יש להניח קטטר היקפי לעירוי תרופות ונוזלים תוך ורידי בווריד האוזן ולתת משככי כאבים ואנטיביוטיקה מונעת. לאחר מכן, הניחו את החזיר המיני במצב שכיבה על כרית התחממות.

לגלח את הגפה האחורית הימנית ולשטוף את הרגל שלוש פעמים. הכן ועטוף בצורה סטרילית. השתמש בווילון חתך אנטי מיקרוביאלי כדי לאטום את כל הפצעים.

עקוב אחר לחץ הדם, הדופק, טמפרטורת הגוף וקצב הנשימה. צייר קו חתך עם טוש ובצע חתך רוחבי קדמי המתחיל מעל מפרק הברך לאורך הרכס הקדמי של השוקה למפרק הטיביוטלרי. לנתח את העור ואת הרקמה התת עורית ולהפריד את השוקה משרירי התא הקדמי.

לאחר מכן, שחרר חלק מהשריר הקדמי של השוקה ממקורו. הסר חלק מרכס השוקה באמצעות מסור מתנדנד כדי לשפר את שדה הראייה. זהה את עורק השוק והווריד הגולגולתי שישמשו מאוחר יותר כצרור ורידי עורקי לקידום ניאואנגיוגנזה.

לאחר מכן, פתח את הממברנה הבין-עצמותית וזהה את הענף היורד של עורק השוק הגולגולתי הנקרא עורק טיביאלי זנב המוליד את הפדיקל התזונתי של הדיאפיזה הטיביאלית. כעת נתחו בזהירות רבה את עורק השוק הגולגולתי והזנב וזהו את הפדיקל התזונתי של הדיאפיזה הטיביאלית. לאחר מכן, הדביקו את הפדיקל בעזרת מהדק מיקרו.

אין לנתק את עוקץ כלי הדם. זהה ענף שריר בתא השריר הקדמי שישמש מאוחר יותר לאנסטומוזה של השתלת כלי הדם בעצם. לאחר מכן, התחל את הקציר של מקטע עצם השוקה כולל פדיקול כלי הדם.

השתמש בג'יג חיתוך כדי להבטיח כריתת עצם בגודל מראש וניתנת לשחזור. תקן את ג'יג החיתוך על המשטח המדיאלי של השוקה. בהנחיית הג'יג, בצע חיתוכי עצם מקבילים במרחק של 3.5 סנטימטרים בדיוק כדי להשיג גם השתלה וגם פגם של 3.5 סנטימטרים.

ואז הסר את ג'יג החיתוך. על ידי סיבוב מקטע עצם השוקה, דמיין את הפדיקל התזונתי של מקטע עצם השוקה. נתק את הפדיקל המזין ושחרר את חתיכת השוקה בזהירות והשאיר שרוול שריר דק על פני השטח שלו והשלים את הרמת מקטע עצם השוקה כולל פדיקל כלי הדם שלו.

לאחר הסרתו, מקטע עצם השוקה מוכן כעת להעברה מיקרו-וסקולרית. לאחר מכן, קשרו את צרור הוורידים העורקי הטיביאלי הגולגולתי באופן דיסטלי לטרנספוזיציה לקטע עצם השוקה האלוגנית. כעת החליפו באופן השתלה צולבת את מקטעי עצם השוק שנקטפו בין שני החזירים הקטנים העיקריים שאינם תואמים.

כדי לאפשר מעבר של צרור הוורידים העורקי הטיביאלי הגולגולתי, הסר קטע בצורת V מהצד של אוסטאוסינתזה טיביאלית פרוקסימלית וקדח חור בצד האוסטאוסינתזה הדיסטלי. לאחר מכן, הכניסו את צרור ה-AV של בעל החיים המקבל לתוך ההשתלה לפיתוח לאחר מכן של מחזור אנגיוגני חדש. אנסטומוז את הפדיקל התזונתי של השתלת העצם לענף השריר המוכן של התא הקדמי הטיביאלי באופן מקצה לקצה.

השג אוסטאוסינתזה באמצעות לוחית נעילה 3.5 בעלת תשעה חורים. בצע סגירת עור פאסיאלית ושכבתית. לבסוף יש למרוח חבישת דחיסה אוטמת על הפצע.

למתן וניטור תרופות מדכאות חיסון לאחר הניתוח, הכנס קטטר ורידי לווריד הצוואר החיצוני. דרך חתך רוחבי קדמי אורכי בצוואר, חשוף את הווריד. על ידי מנהור, הכנס קטטר היקמן מאחור.

הנח את הקטטר לתוך וריד הצוואר ואבטח אותו בתפרים שאינם נספגים. בנוסף, הצמד את הקטטר לעור וסגור את שכבות הצוואר. הניחו לחזיר להתאושש במשך 60 דקות ולאחר מכן עקבו מקרוב עד להחלמה מלאה.

לאחר מכן החזירו את החזיר הקטן לדיר שלו והניחו לו לשתות מים ולאכול מזון אד ליבידום. לשיכוך כאבים לאחר הניתוח, השתמש בקרפרופן. בנוסף, יש לתת אנטיביוטיקה מונעת מדי יום במשך שבועיים.

כדי לשמור על זרימת הדם של השתלת כלי הדם של העצם דרך הפדיקל המזין במהלך אנגיוגנזה של צרור AV, יש לתת טיפול משולש המורכב מטקרולימוס, מיקופנולט מופטיל ופרדניזולון למשך 14 יום. התאם את המינונים היומיים של תרופות מדכאות חיסון בהתאם לרמות שוקת הדם המכוונות. הפחיתו את המינון הראשוני של פרדניזולון בהדרגה עד לקבלת מינון התחזוקה.

הטכניקה המתוארת בוצעה בהצלחה בארבעה מיני חזירי יוקטן לא תואמים ל-SLA. כל החזירים הקטנים שרדו עד סוף המעקב והלכו בלי לצלוע. ניתוח דגימות דם הראה כי הושגו רמות שוקת טיפולית לטקרולימוס ומיקופנולט מופטיל.

זה הבטיח דיכוי חיסוני הולם למניעת נזק לכלי המזון ופקקת עקב דחייה במהלך השבועיים הראשונים לאחר הניתוח. לאחר מכן, הוקמה אספקת דם חדשה שמקורה בנמען בתוך השתלת העצם האלוגנית, מה שמייתר את הצורך במחזור הדם האלוגני. נעשה שימוש במערכת ניקוד של 25 נקודות כדי לכמת את שילוב VCA.

הערכה רדיולוגית קבועה הדגימה ריפוי מתקדם של PCA העצם במהלך תקופת המחקר. הקיבוע הפנימי נשמר ללא אובדן הפחתה או התרופפות. פיתחנו מודל אמין וניתן לשחזור של בעלי חיים גדולים עבור VCA בעצמות, הניתן לבדיקת אנגיוגנזה כירורגית בשילוב עם דיכוי חיסוני לטווח קצר.

מודל זה ישמש בסיס למחקרים עתידיים החוקרים את יחסי הגומלין בין אנגיוגנזה, הישרדות השתלה ותגובה חיסונית. יתר על כן, ניתן להשתמש בו כדי לתאר את התהליך המורכב של דחיית VCA בעצם ואסטרטגיות מודולריות חיסוניות חדשניות אחרות.