Name: מודל ההתנגשות של שמחפש גמול בחולדות זכר (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-02-20T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 11 s
Description: חקור מודל התנגשות להערכת ליקוי בבקרת ההתנהגות בחולדות זכר לאחר חשיפה לסמים ממכרים. שיטה זו מאפשרת מדידה מהירה של יכולת הבלימה ללא שלב למידה.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

נייר זה נתמך על ידי רשויות אישורים מפתח המעבדה לבריאות הנפש, המכון לפסיכולוגיה (KLMH2016K01), הערכה ומחקר טכנולוגיית התערבות לאוכלוסיית חולים הלחץ Post-traumatic (JCYJ20170413170301569)

מחקר זה מאושר על ידי הבינלאומי סקירה לוח (IRB) של המכון לפסיכולוגיה, האקדמיה הסינית למדעים, ואת כל הניסויים נערכים על פי המדריך נבחרת מוסדות של בריאות (ארה ב) (טיפול, שימוש של חיות מעבדה 2011).
1. החומרים וההתקנה עבור דגם עימות
<ol><li>בית ארבע חולדות לכל כלוב (50 ס מ זמן x 22.5 ס מ רחב x 30 ס מ) בחדרי המושבה עם טמפרטורה מבוקרת (22-25 ° C) של מחזור/כהה הפוכה 12 h/12 שעות (אורות בשעה 21:00) למשך 10 ימים לפחות. הערה: חולדות ספראג-Dawley זכר ונקבה במשקל 330 – 400 ו- 230-250 g עם תחילת הניסויים, בהתאמה שימשו.</li>
	<li>לבצע את כל הבדיקות תחת תאורה עמומה במהלך שלב כהה.</li>
	<li>להשתמש את הקרטונים אטום (37 ס מ זמן x 26 ס"מ רחב x 18 ס מ) עם אורן עץ גילוח תשתית להובלת חולדות מן הכלובים הביתה בדיקות חדרים.</li>
	<li>להתמודד עם חולדות 3 דקות כל אחד ליום במשך 5 ימים לפני תחילת הניסויים.</li>
	<li>היכונו 120 מ של מורפיום הניסוי כולו. להמיס מורפיום הידרוכלוריד ב- 0.9% NaCl (תמיסת מלח פיזיולוגית)-ריכוז סופי של 20 מ"ג/מ"ל. לאחסן בטמפרטורת החדר (RT).</li>
	<li>הכינו 10 מ"ל של הפתרון סודיום פנטוברביטל לניתוח. להמיס סודיום פנטוברביטל ב- 0.9% NaCl-ריכוז של 1 g/mL. חנות ב 4 º C.</li>
	<li>להכין 10 מ"ל של אסטרדיול בנזואט (EB) ו- 10 מ"ל של פרוגסטרון אינדוקציה מלאכותי של ייחום. להמיס בנזואט אסטרדיול ופרוגסטרון בשמן שומשום-ריכוז של 0.125 מ"ג/מ"ל ו- 5 מ"ג/מ"ל, בהתאמה. הערה: דגירה על השעיית שמן EB או פרוגסטרון באמבט מים (55 – 60 ° C) במשך לפחות שעה, ואז ביסודיות לנער את זה. ודא כי EB או פרוגסטרון התפרקה לחלוטין. החנות RT.</li>
	<li>לבדיקה מסוכן שוחרת גמול התנהגות, השתמש התאים בשדה פתוח גמול-קרבה זכוכית אקריליק שחור. בקצה אחד של הזירה בשדה פתוח (85 ס מ זמן x 35 ס מ רחב x 50 ס מ) הר כלוב גירוי חוט מסך (15 ס מ זמן x 25 ס מ רחב x 25 ס מ). להתקין את הלוח עם סיכות על הרצפה כ-20 ס מ מול הכלוב הגירוי. הערה: סיכות קבועים על 34.5 ס מ זמן x 13 ס מ רחב לוחות (איור 1). הלוחות עם שלושה סוגים של סיכות משמשים בתורו במהלך הבדיקה (טבלה 2).</li>
</ol>2. אינדוקציה ייחום הנקבות, הזדווגות הקרנת אצל גברים
<ol><li>
Ovariectomy דו צדדיים בחולדות הנשי הערה: מכשירי הניתוח ופריטים אחרים המשמשים לניתוח הם סטרילי. הניתוח מתבצע באמצעות הטכניקה aseptic.<ol>
<li>להכין כלי כירורגי וחומרים כגון ואזמלי מנתחים, להבים כירורגי, hemostatic מלקחיים, פינצטה, מספריים אופטלמולוגיות, גזה, ספוגיות כותנה, מחטי תפירה, משי התפרים מראש, כמו גם 75% אלכוהול, יוד, סודיום פנטוברביטל, 0.9% NaCl. פניצילין נתרן.</li>
		<li>Intraperitoneally הזרקת סודיום פנטוברביטל (55 מ"ג/ק"ג), מחכה הרדמה מלאה של חולדות נקבות. חולדות אוויר מטוהר בצורה חלקה, אל תגיב לעקוב צביטה. הערה: Ovariectomy מתבצע רק כאשר המשקל של עכברוש נקבה מגיע לפחות 240 גרם.</li>
		<li>למקם את העכברוש הנשי שכיבה, לגלח את הפרווה על הגב, לחטא את העור חשוף עם iodophor. ואז להשתמש באזמל לעשות חתך אנכי באמצע (בערך 2 ס מ) על הגב (1 ס מ מתחת לקצה של קשת הצלעות).</li>
		<li>משוך את העור בצד שמאל, בלאנט לנתח עורית עם מלקחיים hemostatic לחשוף את השרירים המותני. חותכים את שכבת השריר (חתך של 1 ס מ) לתוך חלל הבטן, עד ובינות לרקמה מתמלאת.</li>
		<li>להוציא את רקמת שומן עם פינצטה כפופות ואתר השחלה אשר רקמת בשר ורוד (על 0.5 ס מ x 0.4 ס"מ x 0.3 ס"מ) מוקף על ידי רקמת שומן עם החצוצרה twining על פני השטח.</li>
		<li>תהדק את החצוצרה עם מלקחיים, מאתרים ומפסיקים אותו, לאחר מכן לחתוך את השחלה יחד עם רקמת השומן שמסביב.</li>
		<li>. תחזיר את החצוצרה שיורית ואת רקמת שומן לתוך חלל הבטן לאחר הבטחת אין דימום, תפר את שכבת השריר.</li>
		<li>להסיר את השחלה בצד השני על-ידי אותו הנוהל, ואז תפר את החתך בעור.</li>
		<li>מקם את החולדה על שמיכה מחוממת עד התעוררות, ואז תחזיר את זה לתוך הכלוב הביתה.</li>
		<li>אחרי לפחות שבועיים של התאוששות, השתמש העכברושים הנשי ככלי להזדווגות סינון ובדיקה התנהגותית. הערה: שים לב למצב של העכברוש נקבה לאחר הניתוח, לספק מים ומזון. לשמור אחת החולדות ovariectomized שוכן למשך שבוע, ואז בית ארבעה בכל כלוב.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
אינדוקציה של ייחום אצל חולדות הנשי ovariectomized
	<ol>
<li>להתמודד עם כל ovariectomized חולדות נקבות שלוש פעמים (3 דקות/יום) לפני השימוש להזדווגות ההקרנה.<ol>
<li>בעדינות להרים חולדה מהתיבה תחבורה עם יד שמאל והחזק אותו בזרועות לכמה שניות. ואז תחזיר את העכברוש לתוך התיבה, חזור על פעולות אלה למשך 3 דקות.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Subcutaneously להזריק אסטרדיול בנזואט (25 μg/עכברוש) כ 48-52 h לפני ההזדווגות ההקרנה או הבדיקה הסכסוך.</li>
		<li>Subcutaneously להזריק פרוגסטרון (מ ג 1/עכברוש) בערך 4-6 h לפני ההזדווגות ההקרנה או הבדיקה הסכסוך. הערה: הורמונים אסטרוגניים מוזרקים subcutaneously בצד האחורי של הצוואר. מאז מחזור ייחום נמשך ימים ~4\u20125, החולדות הנשי משמשים פעם בשבוע.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
הקרנת חולדות זכר להזדווגות ביצועים הערה: הקרנת הסרט מתנהל תחת אור עמום במהלך שלב כהה של המחזור/כהה בחדר דיור.<ol>
<li>מניחים חולדה זכר בנפרד הקרטון (60 ס מ זמן x 50 ס מ רחב x 40 ס מ) עם אורן עץ גילוח מצעים ולהשאיר את זה כדי habituate במשך 5 דקות.</li>
		<li>להציג עכברוש הנשי estrous לתוך ההתנהגויות copulatory זכר קרטון וצג (על-ידי משקיפים מנוסה).</li>
		<li>לשים את החולדות בחזרה לכלובים הביתה לאחר חולדות זכרים להשלים את השפיכה הראשונה שלהם בתוך 30 דקות או אינם מציגים intromission בתוך 15 דקות או שפיכה תוך 30 דקות.</li>
		<li>להקצות לעכברושים הזכר לעבור ההקרנה (מוצלחת שפיכה 3 ימים רצופים) באופן אקראי לקבוצות שונות (כגון הקבוצות תמיסת מלח ו מורפיום-שטופלו).</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. רעלני בחולדות זכר לפני הבדיקה הסכסוך
<ol><li>
טיפול מוגזמת כמו מורפיום הערה: חולדות זכרים מוזרקים intraperitoneally עם מי מלח או מורפיום במשלוח בצורה מוגזמת כמו משטר14 (טבלה 1).<ol>
<li>שוקל לעכברושים הזכר ולחשב את עוצמת הקול של הזרקת כל העכברוש מבוסס על משקל הגוף (ראה טבלה 1).</li>
		<li>הכנת מזרקים עם פתרונות מורפיום או תמיסת מלח.</li>
		<li>להזריק עכבר אחד בכל פעם intraperitoneally והכנס אותו מיד בעדינות לתוך הכלוב הביתה (4 חולדות בכלוב).</li>
		<li>אחרי 6 שעות לפחות, לתת לעכברושים הזכר הזריקה השנייה באותו אופן.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
כהתקפת הערה: הרגל זעזועים יימסרו לפני כל מבחן הסכסוך בתאי זהים ארבעה מורכבים עם ארבעה גנרטורים הלם ונשלט על ידי תוכנה מקצועיים מותקן במחשב.<ol>
<li>ביום של הבדיקה הסכסוך, לקחת לעכברושים הזכר שונה מן הסכסוך בדיקת חדר אחר חדר.</li>
		<li>לשים לעכברושים הזכר לתוך התאים (30.5 ס מ זמן x 25.4 ס"מ x 30.5 ס מ) כדי habituate עבור 1 דקות.</li>
		<li>להגדיר את התוכנה מראש. התוכנית כוללת השוקים רגל לסירוגין מועברים בתוך 10 דקות (0.5 mA x 0.5 min s x 10; אומר הבין-הלם מרווח 40 s, טווח s 10 – 70).</li>
		<li>הזן חיה מזהי ובחר להפעיל את גנרטורים הלם על פי הקיבוץ (הקבוצה הלם, קבוצת הביקורת). לאחר מכן הקש על לחצן ' התחל '.</li>
		<li>לאחר סיום ההליך מתח, להביא את החולדות מיד לחדר הבדיקה הסכסוך בתיבות הובלה; עכבר אחד לארגז.</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. בדיקת התנגשות
הערה: המבדק מתבצע תחת אור עמום במהלך שלב כהה של המחזור/כהה בחדר הבדיקה הסכסוך.
<ol><li>ביום לפני בדיקה, להביא כל העכברושים לחדר הבדיקה הסכסוך ולאפשר להם habituate אל התא בשדה פתוח גמול-קרבה (ללא כל מכשול, איור 1) למשך 15 דקות.</li>
	<li>ביום הבדיקה, מקם את החולדה זכר בבית הבליעה המאפשר גלישה חופשית למשך 10 דקות (תחת באותו המצב כמו יום לפני הבדיקה).</li>
	<li>מקום עכברוש הנשי estrous הגירוי-כלוב כתמריץ לאפשר הזכר בכפוף בחופשיות הגישה, לחקור את החולדה תמריץ עבור 5 דקות. הערה: העכברוש הזכר חשוף באופן אקראי הנקבה estrous, הנקבה הזאת הוא לא חולדה מוכר.</li>
	<li>לאחר 5 דקות ללא גישה, להעביר את הנושא זכר מן הגירוי-הכלוב לקצה השני של הארנה, להציב מכשול (14 ס מ ברוחב לוח עבה עם סיכות) ולאחר מכן התחל במשפט הראשון של הבדיקה. הערה: רמת הקושי של מכשולים מגוון בין ניסויים בהתבסס על סוגי סיכות, ואת הגובה של הלוח. מערכת לדירוג מוצג בטבלה מס ' 2.</li>
	<li>להזיז את החולדה זכר מן הכלוב הגירוי 15-20 s לאחר כל פעם זה טיפס את המכשול.</li>
	<li>סיום משפט אם הנושא גבר מטפס או קופץ מעל המכשול 3 פעמים בתוך 4 דקות ומיד להתחיל את המשפט הבא עם הגדלת הקושי של המכשול.</li>
	<li>אם נושא זכר טיפס את המכשול שלוש פעמים בתוך 4 דקות, לסיים את המבחן ולהקליט את הזמנים שזה טיפס את המכשול.</li>
	<li>להחזיר את החולדה זכר הכלוב הביתה ולקרצף את התא בשדה פתוח עם 0.05% חומצה אצטית.</li>
	<li>ציון כל ואישית (או מתקרב) לפי טבלה 2. להשתמש את סכום הציונים עבור כל surmountings ניקוד הכולל עבור נושא זכר במבחן הסכסוך הזה.</li>
</ol>5. ניתוח סטטיסטי
<ol><li>להציג את הנתונים כפי ± SEM או נקודות נתונים יחיד. למקרה שלא מאתגרים את ההומוגניות של שונות או התפלגות נורמלית של קבצי הנתונים, יומן שינוי ערכות הנתונים.</li>
	<li>לנתח את השפעת רעלני מורפיום על הפרס שמחפש המוצגים ביום 7 וביום 17 של גמילה (Wd7 ו- Wd17) באמצעות t-בדיקות עם "רעלני" כגורם בין נושאים (מורפיום לעומת תמיסת מלח, איור 2).</li>
	<li>לנתח את השפעת רעלני מורפיום על הפרס שמחפש אחרי חזר על בדיקות באמצעות השונות של חוזר על עצמו-המידה (ANOVA) עם "זמן גמילה" (Wd7 לעומת Wd14) וגם בתוך נושאים פקטור "רעלני" (מורפיום לעומת מלוחים) כגורם בין נושאים.</li>
	<li>בנוסף, השתמש המתאם של פירסון כדי לנתח המתאם בין ציוני הזה נושאים זכר רכשה בימים 7 ו-14 פרישות (Wd7 ו- Wd14, איור 3). הערה: לאחר ההמרה לוגריתמי של הנתונים המקוריים, מבוצעים ניתוחים סטטיסטיים.</li>
	<li>לנתח את השפעת כהתקפת להתנהגות שוחרת גמול בחולדות נאיבי סמים באמצעות מבחן t עם מתח כגורם בין נושאים (הלם לעומת שליטה, איור 4)</li>
</ol>

<ol><li>Everitt, B. J., Robbins, T. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drug+Addiction%3A+Updating+Actions+to+Habits+to+Compulsions+Ten+Years+On%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Psychology%22%5BJournal%5D)">Drug Addiction: Updating Actions to Habits to Compulsions Ten Years On.</a> Annual Review of Psychology. 67, 23-50 (2016).</li>
<li>Bari, A., Robbins, T. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+and+impulsivity%3A+Behavioral+and+neural+basis+of+response+control%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Neurobiology%22%5BJournal%5D)">Inhibition and impulsivity: Behavioral and neural basis of response control.</a> Progress in Neurobiology. 108, 44-79 (2013).</li>
<li>Dalley, J. W., Everitt, B. J., Robbins, T. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impulsivity%2C+compulsivity%2C+and+top-down+cognitive+control%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Impulsivity, compulsivity, and top-down cognitive control.</a> Neuron. 69 (4), 680-694 (2011).</li>
<li>Peter, W., Kalivas, N. D. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Neural+Basis+of+Addiction%3A+A+Pathology+of+Motivation+and+Choice%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">The Neural Basis of Addiction: A Pathology of Motivation and Choice.</a> American Journal of Psychiatry. 162, 1403-1413 (2005).</li>
<li>Morein-Zamir, S., Robbins, T. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fronto-striatal+circuits+in+response-inhibition%3A+Relevance+to+addiction%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Fronto-striatal circuits in response-inhibition: Relevance to addiction.</a> Brain Research. 1628, 117-129 (2015).</li>
<li>Garavan, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dissociable+Executive+Functions+in+the+Dynamic+Control+of+Behavior%3A+Inhibition%2C+Error+Detection%2C+and+Correction%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroimage%22%5BJournal%5D)">Dissociable Executive Functions in the Dynamic Control of Behavior: Inhibition, Error Detection, and Correction.</a> Neuroimage. 17 (4), 1820-1829 (2002).</li>
<li>Garavan, H., Ross, T. J., Kaufman, J., Stein, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+midline+dissociation+between+error-processing+and+response-conflict+monitoring%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroimage%22%5BJournal%5D)">A midline dissociation between error-processing and response-conflict monitoring.</a> Neuroimage. 20 (2), 1132-1139 (2003).</li>
<li>Connolly, C. G., Foxe, J. J., Nierenberg, J., Shpaner, M., Garavan, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+neurobiology+of+cognitive+control+in+successful+cocaine+abstinence%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+and+Alcohol+Dependence%22%5BJournal%5D)">The neurobiology of cognitive control in successful cocaine abstinence.</a> Drug and Alcohol Dependence. (1-2), 45-53 (2012).</li>
<li>Kaufman, J. N., Ross, T. J., Stein, E. A., Garavan, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cingulate+hypoactivity+in+cocaine+users+during+a+GO-NOGO+task+as+revealed+by+event-related+functional+magnetic+resonance+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Cingulate hypoactivity in cocaine users during a GO-NOGO task as revealed by event-related functional magnetic resonance imaging.</a> The Journal of Neuroscience. 23 (21), 7839-7843 (2003).</li>
<li>Forman, S. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+activity+of+opiate+addicts+predicts+subsequent+treatment+retention%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Meeting+of+the+American-College-of-Neuropsychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Brain activity of opiate addicts predicts subsequent treatment retention.</a> Annual Meeting of the American-College-of-Neuropsychopharmacology. , DEC 12-16 (2004).</li>
<li>Kolokotroni, K. Z., Rodgers, R. J., Harrison, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+nicotine+increases+both+impulsive+choice+and+behavioural+disinhibition+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Acute nicotine increases both impulsive choice and behavioural disinhibition in rats.</a> Psychopharmacology. 217, 455-473 (2011).</li>
<li>Belin-Rauscent, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+impulses+to+maladaptive+actions%3A+the+insula+is+a+neurobiological+gate+for+the+development+of+compulsive+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">From impulses to maladaptive actions: the insula is a neurobiological gate for the development of compulsive behavior.</a> Molecular Psychiatry. 21 (4), 491-499 (2016).</li>
<li>Groman, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dysregulation+of+D%282%29-mediated+dopamine+transmission+in+monkeys+after+chronic+escalating+methamphetamine+exposure%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Dysregulation of D(2)-mediated dopamine transmission in monkeys after chronic escalating methamphetamine exposure.</a> Journal of Neuroscience. 32 (17), 5843-5852 (2012).</li>
<li>Bai, Y., Li, Y., Lv, Y., Liu, Z., Zheng, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Complex+motivated+behaviors+for+natural+rewards+following+a+binge-like+regimen+of+morphine+administration%3A+mixed+phenotypes+of+anhedonia+and+craving+after+short-term+withdrawal%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Behavioral+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Complex motivated behaviors for natural rewards following a binge-like regimen of morphine administration: mixed phenotypes of anhedonia and craving after short-term withdrawal.</a> Frontiers in Behavioral Neuroscience. 8, 23(2014).</li>
<li>Vandaele, Y., Janak, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Defining+the+place+of+habit+in+substance+use+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Neuropsychopharmacology+%26+Biological+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Defining the place of habit in substance use disorders.</a> Progress in Neuropsychopharmacology & Biological Psychiatry. 87 (Pt A), 22-32 (2018).</li>
<li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+consummatory+and+motivational+behaviors+for+natural+rewards+following+long-term+withdrawal+from+morphine%3A+no+anhedonia+but+persistent+maladaptive+behaviors+for+high-value+rewards%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">The consummatory and motivational behaviors for natural rewards following long-term withdrawal from morphine: no anhedonia but persistent maladaptive behaviors for high-value rewards.</a> Psychopharmacology (Berl). 234 (8), 1277-1292 (2017).</li>
<li>Bai, Y., Belin, D., Zheng, X., Liu, Z., Zhang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+stress+worsens+the+deficits+in+appetitive+behaviors+for+social+and+sexual+stimuli+displayed+by+rats+after+long-term+withdrawal+from+morphine%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Acute stress worsens the deficits in appetitive behaviors for social and sexual stimuli displayed by rats after long-term withdrawal from morphine.</a> Psychopharmacology. 234, 1693-1702 (2017).</li>
<li>Schoenbaum, G., Saddoris, M. P., Ramus, S. J., Shaham, Y., Setlow, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cocaine-+experienced+rats+exhibit+learning+deficits+in+a+task+sensitive+to+orbitofrontal+cortex+lesions%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Cocaine- experienced rats exhibit learning deficits in a task sensitive to orbitofrontal cortex lesions.</a> European Journal of Neuroscience. 19 (7), 1997-2002 (2004).</li>
<li>Belin, D., Belin-Rauscent, A., Murray, J. E., Everitt, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Addiction%3A+failure+of+control+over+maladaptive+incentive+habits%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Neurobiology%22%5BJournal%5D)">Addiction: failure of control over maladaptive incentive habits.</a> Current Opinion in Neurobiology. 23 (4), 564-572 (2013).</li>
<li>Everitt, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neural+and+psychological+mechanisms+underlying+compulsive+drug+seeking+habits+and+drug+memories--indications+for+novel+treatments+of+addiction%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Neural and psychological mechanisms underlying compulsive drug seeking habits and drug memories--indications for novel treatments of addiction.</a> European Journal of Neuroscience. 40 (1), 2163-2182 (2014).</li>
<li>Dai, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+Development+of+Organs+and+Serum+Sex+Hormone+Levels+in+Normal+Pre-pubertal+Female+Sprague-Dawley+Rats%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Journal+of+Comparative+Medicine%22%5BJournal%5D)">Dynamic Development of Organs and Serum Sex Hormone Levels in Normal Pre-pubertal Female Sprague-Dawley Rats.</a> Chinese Journal of Comparative Medicine. 19 (07), 33-37 (2009).</li>
<li>Orsini, C. A., Trotta, R. T., Bizon, J. L., Setlow, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dissociable+roles+for+the+basolateral+amygdala+and+orbitofrontal+cortex+in+decision-making+under+risk+of+punishment%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Dissociable roles for the basolateral amygdala and orbitofrontal cortex in decision-making under risk of punishment.</a> Journal of Neuroscience. 35 (4), 1368-1379 (2015).</li>
<li>Shimp, K. G., Mitchell, M. R., Beas, B. S., Bizon, J. L., Setlow, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Affective+and+cognitive+mechanisms+of+risky+decision+making%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiology+of+Learning+and+Memory%22%5BJournal%5D)">Affective and cognitive mechanisms of risky decision making.</a> Neurobiology of Learning and Memory. , 60-70 (2015).</li>
<li>Di Ciano, P., Le Foll, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluating+the+Impact+of+Naltrexone+on+the+Rat+Gambling+Task+to+Test+Its+Predictive+Validity+for+Gambling+Disorder%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Evaluating the Impact of Naltrexone on the Rat Gambling Task to Test Its Predictive Validity for Gambling Disorder.</a> PLoS One. 11 (5), e0155604(2016).</li>
<li>Ravel, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elucidating+Poor+Decision-Making+in+a+Rat+Gambling+Task%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Elucidating Poor Decision-Making in a Rat Gambling Task.</a> PLoS One. 8 (12), e82052(2013).</li>
<li>Charles, A., Pradhan, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delta-opioid+receptors+as+targets+for+migraine+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Neurology%22%5BJournal%5D)">Delta-opioid receptors as targets for migraine therapy.</a> Current Opinion in Neurology. 29 (3), 314-319 (2016).</li>
<li>Lu, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Truncated+mu-Opioid+Receptors+with+6+Transmembrane+Domains+Are+Essential+for+Opioid+Analgesia%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesia+%26+Analgesia%22%5BJournal%5D)">Truncated mu-Opioid Receptors with 6 Transmembrane Domains Are Essential for Opioid Analgesia.</a> Anesthesia & Analgesia. 126 (3), 1050-1057 (2018).</li>
<li>Sinha, R., Shaham, Y., Heilig, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Translational+and+reverse+translational+research+on+the+role+of+stress+in+drug+craving+and+relapse%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Translational and reverse translational research on the role of stress in drug craving and relapse.</a> Psychopharmacology (Berl). 218 (1), 69-82 (2011).</li>
<li>Wilson, C. A., Schade, R., Terry, A. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Variable+prenatal+stress+results+in+impairments+of+sustained+attention+and+inhibitory+response+control+in+a+5-choice+serial+reaction+time+task+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Variable prenatal stress results in impairments of sustained attention and inhibitory response control in a 5-choice serial reaction time task in rats.</a> Neuroscience. 218, 126-137 (2012).</li>
</ol>

המחברים אין לחשוף.

הגירעונות שליטה המעכבת נגרם על-ידי שימוש לרעה בסמים18 לשחק תפקיד מרכזי בקידום כפייתית סמים המבקשים לקחת התנהגויות, נסיגה19,20. המודל סכסוכים המובאים כאן מספק גישה חדשה כדי לחקור את השינויים בשליטה המעכבת של אנשים נחשפים סמים ממכרים.
ישנם מספר שלבים קריטיים בפרוטוקול. קודם כל, הנושאים (חולדות זכרים) צריכים לרכוש ניסיון מיני לפני הכניסה לפעילות המשך הסכסוך. לדוגמה, לעכברושים הזכר צריך לעבור ההקרנה עבור הזדווגות (מ...

ההתמכרות לסמים היא מחלה כרונית במוח אשר מאופיין על ידי אימפולסיבי וכפייתית סמים המבקשים ולוקח1. אלה תכונות מפתח של התמכרות יש שניהם היה שיערו כתוצאה מליקוי ביכולת של שליטה המעכבת2,3, קרי, אם ייכשל עיכוב המרדף מיידית מתגמל גירויים, ובכך ופיתוח maladaptive דפוסי התנהגות4.
הפעילות הולכים/לא הולכים ואת אותות-להפסיק פעילות הן הפעילויות ומופת למדידת היכולת של תגובת עיכוב2,5. אלה שתי פרדיגמות ניסיוני להעריך את היכולת לדכא את פעולות בהן אינם הולמים, על ידי נוגד את שכיחות מעכבות תגובות נגד משתמע ללכת בסיסית6,7. עיכוב התגובה מוצגות משימות אלה הוכח להיות לקוי של קוקאין משתמשים8,9, מכורים הוזרקה10וניקוטין משתמשים11. עוד שתי משימות – היפוך לימוד, פעילויות זמן התגובה טורי בחירה מרובות — מספקים גם מדידות של תגובת עיכוב/מעכבות לשלוט12,13. עם זאת, רוב אלה פרדיגמות הופיעה מכרסמים לא רק דורשים הכשרה לטווח ארוך כך נושאים יכולים להבחין בין הדרישות התגובה המיוצג על-ידי אותות שונים, אך גם ייתכן השונות האינדיבידואלית למידה מהירות ולמידה אפקטים להפריע התוצאות של הבדיקה מעכבות עוקבות11.
בנייר זה, אנו מציגים פעילות הרומן הסכסוך אשר יכול לשמש כדי למדוד את ירידת ערך של פקד מעכבות לאחר חשיפה סמים ממכרים. במשימה זו, טבעי מתגמל גירוי (הגירוי המיני) המייצג ערך גבוה הפרס14, הגירויים aversive (pin) שיש חולדות זכר לכבוש, במקביל מוצגים. לעכברושים הזכר צריך לטפס או לקפוץ מעל המכשול מלא סיכות לגשת ולחקור את השותף המיני. אם החיה נמשכת בהתנהגות שלה מתקרב בין הגירויים aversive, הוא נחשב כמו maladaptive או מסוכן שוחרת גמול התנהגות. אחד עילות להקמת פעילות זו היא כי הוא פשוט מבחינה מושגית ולאחר לא להציב דרישות כבדות על תהליכים מנהלים כמו משימות אחרות. לעומת פעילויות אחרות אשר מודדת עיכוב תגובה, משימה התנגשות זו מבוססת על התנהגות טבעית, וחולדות עם תפקוד מיני תקין, ניתן לבחון את החוויה המינית ישירות ללא תהליך למידה. רציונל נוסף הוא כי התנגשות הציג במשימה זו מתקרב הפרס בין הימנעות הגירויים aversive (או את הסיכון של להיות זקף) יכול להיות את ערך טוב יותר, כפי שהוא מחקה מה מתרחשת אצל מכורים אשר לעיתים קרובות למקם את עצמם דומה הסכסוך אך בהתמדה לרדוף אחרי גמול התרופה בין הסיכון של השלכות שליליות בחיים האמיתיים15.
לכן, היישום של מודל סכסוך זה היא דרך מהירה ולא רגיש לגלות את הגרעון בשליטה מעכבות לאחר חשיפה לסמים ממכרים, או גורמים אחרים עשויים להשפיע על יכולת השליטה מעכבות, כגון מתח. הוא מספק גם אסטרטגיה התנהגותית הרומן לחקירה של מנגנונים עצביים שבבסיס גירעונות בשליטה מעכבות. יתר על כן, ניתן להוסיף שינויים אלטרנטיבית על פעילות זו. לדוגמה, לשנות את יחס עלות/תועלת על-ידי החלפת הגירוי המיני הגירוי חברתי יכול לחשוף יותר חשיבות התנהגותית.

<table><tbody><tr><td>חומצה אצטית</td><td>בייג'ינג Tongguangjingxi חברת כימיקלים</td><td>CN מס' 81601</td><td>CH3COOH</td></tr><tr><td>נתרן Benzypenicillin להזרקה</td><td>Huabei Pharmaceutical</td><td>F7072109</td><td>C16H17N2NaO4S</td></tr><tr><td>צמר גפן</td><td>Wan Xin, שאנדונג, סין</td><td>8 ס"מ</td><td></td></tr> <tr><td>ובטא;-אסטרדיול בנזואט</td><td>SIGMA-ALDRICH</td><td>E8515-200MG</td><td>אסטרדיול בנזואט</td></tr><tr><td>גזה</td><td>וואן שין, שאנדונג, סין</td><td>21 שניות ופעמים; 21 שניות 110 ופעמים; 100</td><td></td></tr><tr><td>מלקחיים המוסטטיים</td><td>בייג'ינג Zhong Sheng Wanda ביוטכנולוגיה ושות', בע"מ</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מורפין הידרוכלוריד</td><td>Qinghai פרמצבטיקה ושות' בע"מ</td><td>20100105</td><td>מורפין הידרוכלוריד</td></tr><tr><td>מספריים עיניים</td><td>בייג'ינג Zhong Sheng Wanda ביוטכנולוגיה ושות', בע"מ</td><td></td><td></td></tr><tr><td>פנטוברביטל נתרן</td><td>סיגמא</td><td></td><td>C11H17O3N2Na</td></tr><tr><td>שוקר בעלי חיים מדויק</td><td>קולבורן</td><td></td><td></td></tr><tr><td>פרוגסטרון</td><td>SIGMA-ALDRICH</td><td>V900699-5G</td><td>פרוגסטרון</td></tr><tr><td>שמן ססאמה</td> חברת <td>סחר פנגי בע"מ</td><td></td><td>הזרקת שמן Sesama</td></tr><tr><td>נתרן כלורי</td><td>HuaLu פרמצבטיקה</td><td>H17092107</td><td>NaCl</td></tr><tr><td>אזמלים</td><td>ג'ילט</td><td>96797241</td><td></td></tr><tr><td>להבים כירורגיים</td><td>שנחאי Pudong Jinhuan מוצרים רפואיים ושות', בע"מ</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מחטי תפר</td><td>האן צ'ין, שנחאי, סין</td> <td>ודלתא; 1/2 6 פעמים; 14</td><td></td></tr><tr><td>תפרי משי</td><td>שנחאי Pudong Jinhuan מוצרים רפואיים ושות', בע"מ</td><td></td><td></td></tr><tr><td>חולדות Sprague-Dawley</td><td>מרכז החיות של נהר ויטל, בייג'ינג, סין</td><td>זן בעלי חיים</td><td>Sprague-Dawley</td></tr><tr><td>מזרק</td><td>WeiGao Group פולימר רפואי Co.Ltd</td><td>1 מ"ל, 2 מ"ל</td><td></td></tr><tr><td>פינצטה</td><td>בייג'ינג Zhong Sheng Wanda ביוטכנולוגיה ושות', בע"מ</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

מודל ההתנגשות של שמחפש גמול בחולדות זכר

A Conflict Model of Reward-seeking Behavior in Male Rats

בפרוטוקול הנוכחי מתאר פעילות הסכסוך הרומן כמודל של שליטה המעכבת בחולדות. במודל זה, טבעי מתגמל גירוי (הגירוי המיני) המייצג פרס ערך גבוה, הגירויים aversive (pin), במקביל מוצגים. לעכברושים הזכר צריך לטפס או לקפוץ מעל המכשול מלא סיכות לגשת ולחקור את השותף המיני. אם החיה נמשכת בהתנהגותם המתקרב בין הגירויים aversive, הוא נחשב כמו maladaptive או מסוכן שוחרת גמול התנהגות. הפעילות הסכסוך מאפשר הערכת הגירעון בשליטה מעכבות הנובע מחשיפה סמים ממכרים, כגון מורפין או אירוע מלחיץ.
היתרון העיקרי של מודל זה הוא שהיא מספקת דרך פשוטה ומהירה כדי לגלות את הגרעון בשליטה מעכבות לאחר חשיפה לסמים אופיאטים או אירועים מלחיצים אחרים. בנוסף opiates, מודל התנהגותי זה גם יהיה שימושי לגילוי במהירות את הגירעונות שליטה המעכבת המושרה על ידי אחרים סמים ממכרים. עם זאת, המגבלה היא כי הביצועים של החולדות זכר עשויים להיות כפופים פעילות גופנית אפקטים עם בדיקות חוזרות ונשנות תחת פעילות זו התנגשות. בעתיד, יש לקוות כי ליחידים עם פנוטיפ כפייתית ההתנהגות שוחרת פרס לאחר חשיפה opiates יזוהו מבוסס על שינוי מודל זה הסכסוך

לחקור האם מודל זה הסכסוך יכול לחשוף maladaptive/מסוכן גמול שמחפש המושרה על ידי סמי הרגעה, ההתנהגויות שוחרת גמול המוצג על-ידי הקבוצות תמיסת מלח - ו מורפיום-pretreated הושוו על ידי t-בדיקות לאחר לטווח קצר (Wd7), (Wd17) לטווח ארוך, נסיגת מורפיום בהתאמה (איור 2). התוצאות מציגות כי הן ביום 7 וביום 17 של גמילה, החולדות מורפיום-pretreated הראו התנהגויות מתקרב יותר באופן משמעותי מאשר העכברושים תמיסת מלח-pretreated (איור 2 א: t =-3.958; ב...

מודל סכסוך זה משמש למדידת ירידת ערך של פקד מעכבות לאחר חשיפה סמים ממכרים או גורמים אחרים, שעשוי להשפיע על שליטה המעכבת. גירוי מיני, מכשול aversive מוצגים בו-זמנית, וכך חולדות זכרים יש לכבוש את המכשול להתקרב הפרס המיני.

The present protocol describes a novel conflict task as a model of inhibitory control in rats. In this model, a natural rewarding stimulus (sexual ...

מודל קונפליקט זה יכול לשמש לחשיפת פגיעה בשליטה מעכבת לאחר חשיפה לסמים ממכרים או גורמים אחרים שעשויים להשפיע על שליטה מעכבת. היתרון העיקרי של מודל זה הוא לספק דרך פשוטה ומהירה להעריך את היכולת של שליטה מעכבת ללא תהליך למידה. אנו מציירים את התורן של שיטה זו היא קריטית כי הפעולות במבחן הסכסוך קשה להבין פשוטו כמשמעו.עבור מודל confict, בית ארבעה חולדות בכל כלוב לפחות 10 ימים לפני הבדיקות. בצע את כל הבדיקות תחת תאורה עמומה במהלך השלב הכהה. הכן 120 מיליליטר של מורפיום, 10 מיליליטר של אסטרדיול בנזואט, ו 10 מיליליטר של פרוגסטרון עבור אינדוקציה מלאכותית של אסטרוס.טפל בחולדות השחלות לפחות שלוש פעמים במשך שלושה ימים, בכל פעם במשך שלוש דקות לפני ההזדווגות. כ 48 עד 52 שעות לפני הקרנת ההזדווגות או מבחן הסכסוך, להזריק את בנזואט אסטרדיול ב 25 מיקרוגרם לכל חולדה תת עורית. ארבע עד שש שעות לפני ההזדווגות או מבחן הסכסוך, להזריק תת עורית פרוגסטרון במיליגרם אחד לכל חולדה.כדי לסנן את החולדות לביצועי ההזדווגות, מניחים חולדה זכרית בקרטון עם מצעי גילוח מעץ אורן ונותנים לו להתרגל במשך חמש דקות. לאחר מכן להכניס חולדה נקבה estrus לתוך הקרטון ולפקח על התנהגות הזדווגות זכר. לאחר שהעכברוש הזכר משלים את השפיכה הראשונה שלו, תוך 30 דקות או אינו מציג הפסקה תוך 15 דקות, מעבירים את החולדה בחזרה לכלוב הביתי שלה.לטיפול במ

a-conflict-model-of-reward-seeking-behavior-in-male-rats

Research

JoVE Journal

Behavior

התנהגות

בפרוטוקול זה אנו מתארים שיטה של ​​למידה אופרנטית באמצעות גירויים חושיים כמו חיזוק בתוך העכבר. זה לא דורש הכשרה מוקדמת או הגבלת מזון, והיא מאפשרת לימוד של התנהגות מוטיבציה ללא שימוש חיזוק תרופתי או טבעי כמו מזון.

Sensation Seeking אופרנטית ב העכבר

את פרטי הדו"ח הנוכחי פרוטוקול מועסק על מנת למדוד את השפעת תגמול של מזון עתירת שומן אצל עכברים באמצעות יחס מתקדמת אופרנטית המשימה אוויר.

יחס מתקדמת, בתגובה על מזון עתיר שומן ו סוכר גבוהה ב טעים עכברים

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לעורר התנהגות גישה מותנית פבלובית בחולדות. ניתן להשתמש בהליך זה כדי למדוד הבדלים אינדיבידואליים בנטייה להתקרב ולייחס בולטות תמריצים לרמזים הקשורים לתגמול ולחקור פגיעות התמכרות.

הדרכת גישה אלפה הפבלובית בחולדות

אנו מתארים פרוטוקול גרימת מתגמל nonrewarding חוויות בזבובי פירות (תסיסנית) באמצעות צריכת אתנול מרצון כאמצעי לשינויים במדינות גמול.

דרך פשוטה למדוד שינויים בהתנהגות שוחרת זכה שימוש<em&gt; תסיסנית</em

מאמר זה מפרט השימוש של הקלטות amperometric פוטנציאל קבוע באמצעות אלקטרודות סיב פחמן וטכנולוגיה ביוסנסור אנזימטיות כדי למדוד את שחרורו של דופמין, גלוטמט עם רזולוציה טמפורלית גבוהה במהלך טבעי מתגמל התנהגות אוגר נקבה.

מדידת In Vivo שינויים עצביים חוץ-תאית במהלך טבעי מתגמל בהתנהגויות של אוגרים סוריים הנשי

אנו מציגים שלושה פרוטוקולים של להעריך צורות שונות של אימפולסיביות ב עכברים ויונקים קטנים אחרים. שגרות בחירה intertemporal להעריך נטייה הנחה את הערך של תוצאות מושהית. חיזוק דיפרנציאלית של שיעור נמוך ואפליה תכונה-שלילי להעריך קיבולת עיכוב תגובה עם או בלי עונש על תגובות בלתי הולם, בהתאמה.

שלושה הליכים מעבדה לשם הערכת ביטויים שונים של אימפולסיביות אצל חולדות

פרוטוקול זה מתאר שיטה לבחינת היררכיה חברתית במודל עכברוש. חולדות מבצעות משימת צלילה למזון מורכבת שבה הן יוצרות היררכיה ברורה בהתאם לנכונותן לצלול מתחת למים ולשחות כדי להשיג גלולת מזון. שיטה זו משמשת להבנת קבלת החלטות ויחסים חברתיים בין בעלי חיים חברתיים מאוד בקבוצות קטנות.

משימת צלילה למזון מורכבת לחקירת ארגון חברתי ואינטראקציות בחולדות

מתואר הליך המדגים הישנות חריפה של מחסור חריף במזון לחיפוש הרואין לאחר התנזרות שנכפתה על ידי עונש. מודל התנזרות שהוטל על ידי עונש יושם בהצלחה תוך שימוש בלוח הזמנים של שרשרת החיפוש ולקחת לניהול עצמי של הרואין. לאחר מכן מבוצעות בדיקות לחיפוש הרואין לאחר 24 שעות של לחץ על מחסור במזון.

הליך לחקר הישנות כתוצאה מלחץ של חיפוש הרואין לאחר התנזרות שנכפתה על ידי עונש

פיתחנו מודל לחץ חברתי מואץ עבור עכברי C57BL/6 מתבגרים, הפועל הן אצל זכרים והן אצל נקבות ומאפשר חשיפה במהלך תקופות התבגרות בדידות. חשיפה למודל זה גורמת להימנעות חברתית, אך רק בתת-קבוצה של עכברים זכרים ונקבות מובסים.

מודל לחץ תבוסה חברתית עבור עכברים מתבגרים C57BL/6 זכרים ונקבות

מאמר זה מציג פרוטוקול לאינדוקציה של מודל עכברוש ייחודי של הפרעה דו קוטבית הלוכד התנהגות דמוית מאניה ודיכאון.

פיתוח מודל חולדות להפרעה דו קוטבית

קולות אולטרסוניים של חולדות ועכבר במעבדה (USVs) שימושיות לחקר תפקוד קולי ועצבי. פרוטוקול זה מתאר פרדיגמת תגמול מזון שמעוררת באופן אמין את ה-USVs התיאבון ללא בלבולים הקשורים להזדווגות. הוא מפרט את התניה של בעלי חיים, הצגת גירויים, הקלטה וניתוח אקוסטי, ומספק שיטה ניתנת לשחזור ללימוד תפקוד רגשי-מוטיבציוני ותפקוד חושי מוטורי של הגולגולת.

עוררת תגמול מזון צפויה של קולות אולטרסוניים תיאבוניים בעכברים ועכברים במעבדה

חקור מודל התנגשות להערכת ליקוי בבקרת ההתנהגות בחולדות זכר לאחר חשיפה לסמים ממכרים. שיטה זו מאפשרת מדידה מהירה של יכולת הבלימה ללא שלב למידה.

מודל ההתנגשות של שמחפש גמול בחולדות זכר

גלה סרטונים נוספים