עיצוב של הIntranasal וניקוב, מודל כפול של דיכוי חיסוני מושרה באלח דם

פרוטוקול זה מתאר טכניקות למדידת תוצאות זיהומיות בבסיס החולים שנרכשו משני זיהומים במצב המדכא, הראשון על ידי הקמת לאחר הקשר/עכברים לאחר מכן מאתגרת אותם עם זיהום intranasal כדי ל ליצור מודל רלוונטי קלינית של אלח דם חיסוני.

הכינו את העכבר לניתוח. לגלח את הרבעים התחתונים של הבטן באמצעות סכין גילוח ולחטא את האזור עם יוד. מניחים את העכבר על משטח עבודה נקי על גבו כשהראש מצביע הרחק מהמפעיל.

הפוך חתך בעור אורך כחצי סנטימטר ארוך בבטן התחתונה השמאלית. היזהר לא לחדור את חלל הקדום. השתמש במספריים קטנים כדי להאריך את החתך על אחד עד שני סנטימטרים.

בצע חתך תוך שרירי כדי לקבל גישה לחלל ההצטלבות. ברוב המקרים, cecum הוא בצד שמאל של הבטן. לבודד את cecum.

באמצעות מדפים קהים, אנטומיים, בעדינות ובזהירות לחשוף את cecum דרך החתך. השלב הרביעי הוא הרצועה. מיקום הרצועה על cecum קובע את רמת החומרה של אלח דם.

חיבור כ 75% של cecum גורם אלח דם חמור. חיבור 50% מהסג'ם גורם לא אלח דם ברמה בינונית. בעוד קשירה 25% או פחות של cecum יגרום אלח דם קטין.

ליגה cecum בעמדה המיועדת. הקפד לא לצרף את שסתום ileocecal. השלב החמישי הוא לנקב את ההפסקה.

באמצעות מחט, לנקב את cecum עם יחיד דרך ודרך לנקב באמצע הדרך בין הקשירה ואת קצה cecum. ודא שאתה לא לנקב את כל כלי הדם. כדי להבטיח כי היה לנקב מלא, להחדיר טיפה קטנה של צואה משני חורי מחט.

בזהירות להחליף את cecum לתוך חלל הבטן. סגור את שרירי הבטן על ידי החלת תפרים ריצה פשוטה ולסגור את העור. לנקות את העור עם יוד.

להזריק לעכבר עם תמיסת מלח מחוממת מראש כדי להחיות. מניחים את העכבר בחזרה לתוך הכלוב עם גישה בלתי מוגבלת למזון ומים. לאחר כשלושה ימים מן הקשירה cecal ונקב או הליך CLP, אנו כפופים את העכבר ללהיט שני עם זיהום תוך-אנלסי כדי לעורר דלקת ריאות המתרחשת לעתים קרובות אלח דם.

התקרבו לצוואר העכבר מאחור, בצורה חלקה ובעדינות. האגודל והאצבע המורה של יד שמאל יוצרים מיקום בצורת U. החזק את הצוואר מיד מאחורי האוזניים כך ראש העכבר הוא מאופק לחלוטין.

הצג את הזיהום ה תוך-רנסאלי. באמצעות פיפית מיקרוליטר 100, להחדיר את זן סטפילוקוקוס aureus תוך-בלתי-בלתי נראה. מחזיק את העכבר במצב זקוף, לאט טיפה שניים עד שלושה microliters של הפתרון החיידקי לתוך שני הנחיריים של העכבר.

הרם את העכבר למעלה ולמטה עם ראשו למעלה וזנב למטה כדי לעזור לפתרון החיידקי להיכנס קנה הנשימה. הרם את העכבר במהירות תוך הנתחתו בעדינות ובאט. חזור על ההטמה 15 פעמים או עד שכל הפתרון החיידקי יוחדיר.

השלב האחרון הוא לסיים את ההליך. הניחו את העכבר על המצעים הזוויתי בזווית של כ-35 מעלות כדי להתאושש. ודא שהעכבר על גבו כשראשו מונח.

צפה בעכבר כדי לוודא שהוא התאושש לחלוטין מן ההרדמה ואת ההליך. לאחר שיטוח המצעים, מניחים את העכבר בחזרה בכלוב עם גישה בלתי מוגבלת למזון ומים. עכברים החלו למות בסביבות 12 שעות לאחר אינדוקציה של דלקת כליות.

התמותה הייתה הרבה יותר גבוהה עבור עכברים עם CLP לפני דלקת ריאות. שלושה ימים לאחר הניתוח, עכברי CLP היו יותר תמותה עם ממשל תוך-רנסאלי של סטפילוקוקוס אוראוס. רמות הציטוקינות התומכות בסרום עלו באופן משמעותי ב-24 שעות לאחר החדירה החיידקית בעכברי אלח דם בהשוואה לעכברים שהיו להם CLP לבד או לעכברים המופעלים על ידי Sham עם פגיעה שנייה.

עם זאת, עכברים פעמיים פגע הראו ירידה משמעותית ברמות ציטוקינות נוזל BAL בהשוואה הן SA ו ניתוח שאם בתוספת עכברי SA. לפיכך CLP פוגע בהגנה המארחת ומגביר את הרגישות לזיהום. מודל זה כפול פגע הוא כלי רב ערך כדי להבין את המנגנונים המולקולריים עבור אינטראקציה מארח-פתוגן, אשר עשוי לפתוח את השדרה לפתח תרופות חדשות ויעילות וטיפולים אחרים עבור זיהומים superbug.