זלוף ואינפלציה של ריאת העכבר עבור היסטולוגיה גידול

מי שתדגים את ההליך תהיה מקנזי דבנפורט, סטודנטית לתואר שני ממעבדת אדמונדס. לאחר המתת חסד של העכבר, השתמש במספריים כירורגיים כדי לבצע חתך אופקי של 3.5 עד חמישה מילימטר באמצע הבטן התחתונה. לאחר מכן, הכנס מספריים כירורגיים לחתך וחתוך אנכית במעלה קו האמצע המרכזי עד מתחת לצוואר העכבר.

משוך את העור לאחור בעזרת האצבעות ובדוק את בלוטות הלימפה בבית השחי. השתמש במספריים כירורגיים כדי לבצע חתך רוחבי של 3.5 מילימטר לפתיחת חלל הבטן. ואז חותכים בכיוון הפנימי עד לתחתית בית החזה.

בדוק את האיברים בחלל הבטן כגון הכבד, הטחול והכליות. עם המספריים הכירורגיים השטוחים הזיזו את הכבד כדי לחשוף את הסרעפת. בדוק את הסרעפת לאיתור צמיחת גידול או גרורות, ולאחר מכן גזור בעדינות את הסרעפת בצד ימין של המפעיל, ואפשר לה להתרחב.

חותכים את הסרעפת מימין לשמאל כדי לחשוף את חלל בית החזה והריאות, תוך הקפדה לא לחתוך את הריאות. חותכים דרך הקצה הצדדי של כלוב הצלעות השמאלי כדי לבדוק את האונה השמאלית של הריאות. הזז בעדינות את האונות הימניות של הריאה מהדרך.

לאחר מכן חותכים את הקצה הצדדי של כלוב הצלעות הימני ומסירים את כלוב הצלעות. אם נדרשת רקמת ריאה טרייה או קפואה, השתמש במלקחיים של המוסטט כדי להדק את הסימפונות של האונה השמאלית ולכרות את הריאה השמאלית במספריים כירורגיות לפני הזלוף. השתמש במלקחיים כדי להרים את הרקמה המכסה את קנה הנשימה ולחתוך את כל הרקמה העודפת, ולאחר מכן חתוך בעדינות את הרקמה הדקה המצפה את קנה הנשימה כדי לחשוף את דרכי הנשימה.

חותכים את עורק הכליה בעזרת מספריים כירורגיים. כדי להחדיר את הריאות, השתמש במזרק של שלושה מיליליטר עם מחט בגודל 22 כדי להזריק PBS עם 10 יחידות למיליליטר הפרין לחדר הימני של הלב. שופע לאט את הריאות במהירות של כ-300 מיקרוליטר לשנייה וגורם לריאות להפוך ללבנות.

לניפוח ריאות, השתמש במזרק של שלושה מיליליטר עם מחט בגודל 22 והחזק אותו במקביל לקנה הנשימה. הכנס את המחט לקנה הנשימה והזריק 10% פורמלין בקצב זרימה שאינו עולה על 200 מיקרוליטר לשנייה עד שהריאות מתנפחות. ברגע שהריאות מנופחות, פורמלין יזרום חזרה החוצה מקנה הנשימה.

החזק את המחט במקומה למשך מספר שניות נוספות ולאחר מכן משוך. השתמש במלקחיים כדי להרים את הלב, הכנס מספריים כירורגיים ישירות מאחורי הריאות וחתוך את רקמת החיבור כדי לכרות לריאות. ואז חותכים כדי להסיר אותו מהריאות.

הנח את הריאות בקלטת המסומנת במזהה העכבר או במזהה המחקר, ולאחר מכן הנח את הקסטה בפורמלין עם 10% מאגר למשך 24 עד 48 שעות. ניתן להשאיר את הריאות במצב מקובע במשך יותר משנה אם רוצים. בסיום, העבירו את הקסטה המכילה את הריאות ל-70% אתנול והמשיכו בהיסטולוגיה.

פרוטוקול זה מאפשר זלוף מהיר, ניפוח וקיבוע של ריאות העכבר. היסטולוגיה של גידולים בריאות שעברו חדירה ונופחה בטכניקה זו מודגמת כאן. כאשר מדלגים על שלב השפע, או שהריאות לא מצליחות לחלחל כראוי, עודף דם בריאות יוצר היסטולוגיה פחות מאידיאלית ויכול להקשות על התבוננות מלאה בארכיטקטורת הריאות.

אינפלציה היא צעד חשוב בפרוטוקול זה. קשה יותר לזהות אזורים של היפרפלזיה בריאות לא מנופחות בגלל הדחיסה והקרבה של הנאדיות. עם זאת, בריאות מנופחות יתר על המידה, רבים מהדפנות המכתשית נשברו, מה שעלול להיחשב בטעות לאמפיזמה.