Name: הערכת ההשפעה של חומרי הדברה על הזחלים של הדבורים הבודדות (וידאו) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-10-15T14:20:00.000+00:00
Duration: 5 min 13 s
Description: חקור את ההשפעות האקוטוקסיקולוגיות של חומרי הדברה על זחלים של Osmia excavata באמצעות סימולציית האכלה. שיטה זו מאפשרת הערכת סיכוני חומרי הדברה לדבורים בודדות ותורמת לשימור מקיימות של מאביקים.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

מחקר זה נתמך על ידי תוכנית המו"פ הלאומית המרכזית של סין (2017YFD0200400), פרויקט חדשנות מדעית וטכנולוגית גדולה (2017CXGC0214), צוות החדשנות בתעשיית הדבורים של מחוז שאנדונג, פרויקט החדשנות במדע וטכנולוגיה חקלאית של אקדמיית שאנדונג למדעי החקלאות (CXGC2019G01), ופרויקט החדשנות במדע וטכנולוגיה חקלאית של אקדמיית שאנדונג למדעי החקלאות (CXGC2021B13).

1. הכנת צינור ההזנה
<ol><li>נקב חור (בקוטר של כ-0.3 מ"מ) למכסה של צינור צנטריפוגה 2 מ"ל באמצעות ברזל מתפתל חשמלי (ראו טבלת חומרים). השתמש בצינור צנטריפוגה כזה כדי לשמור על זחל O. dicavata ועל מסת האספקה שלו.</li>
</ol>2. הכנת חומרי הדברה
<ol><li>ממיסים את חומר ההדברה ברמה הטכנית (ראו טבלת חומרים) באצטון כדי לרכוש תמיסות מלאי של 1 x 104 מיקרוגרם a.i. mL-1. לאחר מכן, בצע דילולים הדרגתיים של התמיסה ליותר מחמישה ריכוזים. הערה: כלורפיריפוס ב 0.1, 0.2, 0.4, 0.8, 1.6, 3.2, 6.4 מיקרוגרם a.i. mL-1 שימשו במחקר זה.</li>
</ol>3. הכנת ההוראות
<ol><li>רכשו צינורות דבורים מפלסטיק המכילים אספקה (ראו טבלת חומרים) וזחלים שזה עתה בקעו של O. dicavata מתוכנית גידול המונית. הערה: לא נעשה שימוש בחומרי הדברה החל מ-20 יום לפני הפריחה ועד לתקופת הפריחה כולה; תוצאות אנליזה כימית הראו כי תכולת חומרי ההדברה הנפוצה בחמישים הוראות שנבחרו באקראי הייתה שתיהן מתחת לרמות הבדיקה המינימליות.</li>
	<li>הפרד את ההפרשות והזחלים בעדינות באמצעות מברשת רכה. בחר זחלים נקבות על סמך גודל ההפרשה ומיקום התא בתוך הקן9. לאחר מכן, מניחים כלים בגודל אחיד וזחלים נקביים נבחרים בצלחות פטרי (בקוטר 60 מ"מ) ומניחים אותם בצד לשימוש. הערה: חמישים הוראות נבחרו באקראי כדי לנתח את התוכן של חומרי הדברה נפוצים: כלורפיריפוס, imidacloprid, fendifenuron, phoxim, avermectin. פרמטרי המברשת הרכה הם (א) קוטר המברשת: 0.3 מ"מ, (ב) אורך המברשת: 2 ס"מ, (ג) אורך העט: 18 ס"מ.</li>
</ol>4. מתן טיפול בחומר הדברה
<ol><li>השרו את ההפרשות שנבחרו בגודל שווה (משלב 3.2) בחומר הדברה מדולל (משלב 2.1; כלורפיריפוס ב-0.1, 0.2, 0.4, 0.8, 1.6, 3.2, 6.4 מיקרוגרם א.כלומר מ"ל-1) במשך 10 שניות באמצעות כלוב. השרו את בדיקת הבקרה (CK) בממס של 0.2% (אצטון במחקר זה). הערה: ישנם שלושה שכפולים לכל טיפול בריכוז, וכל שכפול כלל 60 הוראות. ניתן להקטין את הפרש המינון של כל הפרשה על ידי בחירת הוראות בגודל שווה.</li>
	<li>יש למדוד את נפח תמיסת חומרי ההדברה לפני ואחרי הטיפול בחומרי ההדברה. לאחר מכן, חשב את הנפח השקוע של קוטל חרקים בכל טיפול, כולל 60 הפרשות מסה (טבלה משלימה 1). מקם את ההוראות בצינורות צנטריפוגליים נפרדים עם חורים (משלב 1.1) לאחר ייבוש אוויר על שולחן עבודה סטרילי. הערה: לפני הניסוי, הכניסו את הכלובים המכילים את האספקה לתמיסת ההדברה, ולאחר מכן מדדו את נפח תמיסת ההדברה לפני ואחרי הטבילה כדי למנוע את השגיאה.</li>
	<li>מעבירים את נקבות הזחלים בנפרד אל פני השטח של אספקה מיובשת באופן טבעי באמצעות מברשת רכה. הערה: זחל אחד בצינור אחד.</li>
</ol>5. תנאי צמיחה
<ol><li>מאחורי הזחלים של O. dicavata בתא גדילה בחושך, 65%-75% לחות יחסית, ו 25 ± 2 °C16.</li>
</ol>6. בחינת התוצאות
<ol><li>בדיקת הרעילות הקטלנית החריפה<ol>
<li>מדוד את תמותת הזחלים לאחר הנחתם על המטופלים ואת הוראות הבקרה (CK) במשך 48 שעות. הערה: קריטריוני המוות: כאשר הזחלים לא הגיבו למגע קל באמצעות מברשת רכה תחת מנורות אור שחור22. מנורות אור שחור שימשו כדי לדמות את תנאי הגדילה הכהים של הזחלים ולהימנע מהשפעת האור על הזחלים בעת בדיקת אינדיקטורים לצמיחה. לצורך ביטול טעויות אנוש נמדדו גם מקרי התמותה עם ובלי הוצאת זחלים מההוראות לאחר 48 שעות בקבוצות הביקורת.</li>
		<li>שקלו 60 הוראות לפני ואחרי 48 שעות של ניסויים בגידול חרקים כדי לקבוע את כמות האספקה הנצרכת על ידי כל זחל.</li>
		<li>חישבו את מינון חומרי ההדברה בכל ריכוז הנצרך על ידי כל זחל בהתאם לאחוז ההפרשה הנאכל ולתכולת חומרי ההדברה בכל אספקה. הערה: המשוואה לחישוב מינון היא23: <img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/62946/62946eq01.jpg"> כאשר, D הוא המינון הנצרך של חומר הדברה על ידי כל זחל; W1 הוא משקל של 60 הוראות לפני עירוי של חומר הדברה; W2 הוא המשקל הנותר של 60 הפרשות לאחר 48 שעות; V1 הוא נפח חומרי ההדברה לפני הטבילה במשך 60 אספקה; V2 הוא נפח ההדברה לאחר טבילה במשך 60 אספקה; C הוא הריכוז של חומר ההדברה.</li>
	</ol>
</li>
	<li>בדיקת הרעילות הסובלתלית<ol>
<li>שקלו את הזחלים לפני ניסויי הגידול ולאחר 14 יום של טיפולים כדי לקבוע את העלייה במשקל הזחל.</li>
		<li>התבונן ב- O. חופרת מדי יום במהלך פקעת תחת מנורות אור שחורות כדי למדוד את משך התפתחות הזחל.</li>
		<li>שקול את שאר חלקי ההפרשות לאחר 14 ימי האכלה על הוראות מטופלות ו- CK כדי לחשב את הצריכה ואת היעילות של המרת מזון שנבלע (ECI)24.</li>
		<li>בחנו את מספר ההסתגרויות על ידי הצלפת הפקעות באמצעות מספריים קטנים כאשר דבורי הבקרה מגיחות לבוגרים.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Sgolastra, F., Tosi, S., Medrzycki, P., Porrini, C., Burgio, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toxicity+of+spirotetramat+on+solitary+bee+larvae%2C+Osmia+cornuta+%28hymenoptera%3A+megachilidae%29%2C+in+laboratory+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Apicultural+Science%22%5BJournal%5D)">Toxicity of spirotetramat on solitary bee larvae, Osmia cornuta (hymenoptera: megachilidae), in laboratory conditions.</a> Journal of Apicultural Science. 59 (2), 73-83 (2015).</li>
<li>Wei, S. G., Wang, R., Smirle, M. J., Xu, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Release+of+Osmia+excavata+and+Osmia+jacoti+%28Hymenoptera%3A+Megachilidae%29+for+apple+pollination%5BTitle%5D)+AND+%22TheCanadian+Entomologist%22%5BJournal%5D)">Release of Osmia excavata and Osmia jacoti (Hymenoptera: Megachilidae) for apple pollination.</a> TheCanadian Entomologist. 134 (3), 369-380 (2002).</li>
<li>Men, X. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biological+characteristics+and+pollination+service+of+Mason+bee%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Journal+of+Applied+Entomology%22%5BJournal%5D)">Biological characteristics and pollination service of Mason bee.</a> Chinese Journal of Applied Entomology. 55 (6), 973-983 (2018).</li>
<li>Bosch, J., Kemp, W. P., Trostle, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bee+population+returns+and+cherry+yields+in+an+orchard+pollinated+with+Osmia+lignaria+%28Hymenoptera%3A+Megachilidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Economic+Entomology%22%5BJournal%5D)">Bee population returns and cherry yields in an orchard pollinated with Osmia lignaria (Hymenoptera: Megachilidae).</a> Journal of Economic Entomology. 99 (2), 408-413 (2006).</li>
<li>Winfree, R., Williams, N. M., Dushoff, J., Kremen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Native+bees+provide+insurance+against+ongoing+honey+bee+losses%5BTitle%5D)+AND+%22Ecology+Letters%22%5BJournal%5D)">Native bees provide insurance against ongoing honey bee losses.</a> Ecology Letters. 10 (11), 1105-1113 (2007).</li>
<li>Garibaldi, L. A., Steffan-Dewenter, I., Winfree, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wild+pollinators+enhance+fruit+set+of+crops+regardless+of+honey+bee+abundance%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Wild pollinators enhance fruit set of crops regardless of honey bee abundance.</a> Science. 339 (6127), 1608-1611 (2013).</li>
<li>Bosch, J., Sgolastra, F., Kemp, W. P. Life cycle ecophysiology of Osmia. mason bees used as crop pollinators. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBosch%2C+J+%22Bee+Pollination+in+Agricultural+Ecosystems%22">Bee Pollination in Agricultural Ecosystems</a>. James, R. R., Pitts-Singer, T. L. , Oxford University Press. Oxford, UK. 83-104 (2008).</li>
<li>Liu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Population+investigation+and+restriction+factors+analyses+of+Osmia+excavata+Alfken+in+Jiaodong%5BTitle%5D)+AND+%22Apiculture+of+China%22%5BJournal%5D)">Population investigation and restriction factors analyses of Osmia excavata Alfken in Jiaodong.</a> Apiculture of China. 69 (9), 68-71 (2018).</li>
<li>Biesmeijer, J. C., Roberts, S. P. M., Reemer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Parallel+declines+in+pollinators+and+insect-pollinated+plants+in+Britain+and+the+Netherlands%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Parallel declines in pollinators and insect-pollinated plants in Britain and the Netherlands.</a> Science. 313 (5785), 351-354 (2006).</li>
<li>Potts, S. G., Biesmeijer, J. C., Kremen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+pollinator+declines%3A+trends%2C+impacts+and+drivers%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Ecology+%26+Evolution%22%5BJournal%5D)">Global pollinator declines: trends, impacts and drivers.</a> Trends in Ecology & Evolution. 25 (6), 345-353 (2010).</li>
<li>Chen, L., Yan, Q., Zhang, J., Yuan, S., Liu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Joint+toxicity+of+acetamiprid+and+co-applied+pesticide+adjuvants+on+honeybees+under+semi-field+and+laboratory+conditions%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Toxicology+and+Chemistry%22%5BJournal%5D)">Joint toxicity of acetamiprid and co-applied pesticide adjuvants on honeybees under semi-field and laboratory conditions.</a> Environmental Toxicology and Chemistry. 38 (9), 1940-1946 (2019).</li>
<li>Sgolastra, F., Medrzycki, P., Bortolotti, L., Renzi, M. T., Bosch, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Synergistic+mortality+between+a+neonicotinoid+insecticide+and+an+ergosterol-biosynthesis-inhibiting+fungicide+in+three+bee+species%5BTitle%5D)+AND+%22Pest+Management+Science%22%5BJournal%5D)">Synergistic mortality between a neonicotinoid insecticide and an ergosterol-biosynthesis-inhibiting fungicide in three bee species.</a> Pest Management Science. 73 (6), 1236-1243 (2017).</li>
<li>Bireley, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preface%3A+Workshop+on+pesticide+exposure+assessment+paradigm+for+non-Apis+bees%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Entomology%22%5BJournal%5D)">Preface: Workshop on pesticide exposure assessment paradigm for non-Apis bees.</a> Environmental Entomology. 48 (1), 1-3 (2019).</li>
<li>European Food Safety Authority. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((EFSA+Guidance+Document+on+the+risk+assessment+of+plant+protection+products+on+bees+%28Apis+mellifera%2C+Bombus+spp.+and+solitary+bees%29%5BTitle%5D)+AND+%22EFSA+Journal%22%5BJournal%5D)">EFSA Guidance Document on the risk assessment of plant protection products on bees (Apis mellifera, Bombus spp. and solitary bees).</a> EFSA Journal. 11 (7), 3295(2013).</li>
<li>Rundlof, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Seed+coating+with+a+neonicotinoid+insecticide+negatively+affects+wild+bees%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Seed coating with a neonicotinoid insecticide negatively affects wild bees.</a> Nature. 521 (7550), 77-80 (2015).</li>
<li>Yuan, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toxicity+and+hazard+assessment+of+six+neonicotinoid+insecticides+on+Osmia+excavata+%28hymenoptera%3Amegachilidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Entomologica+Sinica%22%5BJournal%5D)">Toxicity and hazard assessment of six neonicotinoid insecticides on Osmia excavata (hymenoptera:megachilidae).</a> Acta Entomologica Sinica. 61 (8), 950-956 (2018).</li>
<li>Lin, Z., Meng, F., Zheng, H., Zhou, T., Hu, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+neonicotinoid+insecticides+on+honeybee+health%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Entomologica+Sinica%22%5BJournal%5D)">Effects of neonicotinoid insecticides on honeybee health.</a> Acta Entomologica Sinica. 57 (5), 607-615 (2014).</li>
<li>Gradish, A. E., Scott-Dupree, C. D., Cutler, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Susceptibility+of+Megachile+rotundata+to+insecticides+used+in+wild+blueberry+production+in+Atlantic+Canada%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pest+Science%22%5BJournal%5D)">Susceptibility of Megachile rotundata to insecticides used in wild blueberry production in Atlantic Canada.</a> Journal of Pest Science. 85, 133-140 (2012).</li>
<li>Hodgson, E. W., Pitts-Singer, T. L., Barbour, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+the+insect+growth+regulator%2C+novaluron+on+immature+alfalfa+leafcutting+bees%2C+Megachile+rotundata%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Insect+Science%22%5BJournal%5D)">Effects of the insect growth regulator, novaluron on immature alfalfa leafcutting bees, Megachile rotundata.</a> Journal of Insect Science. 11, 43(2011).</li>
<li>Konrad, R., Ferry, N., Gatehouse, A. M. R., Babendreier, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Potential+effects+of+oilseed+rape+expressing+oryzacystatin-1+%28OC-1%29+and+of+purified+insecticidal+proteins+on+larvae+of+the+solitary+bee+Osmia+bicornis%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Potential effects of oilseed rape expressing oryzacystatin-1 (OC-1) and of purified insecticidal proteins on larvae of the solitary bee Osmia bicornis.</a> PLoS ONE. 3 (7), 2664(2008).</li>
<li>Abbott, V. A., Nadeau, J. L., Higo, H. A., Winston, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lethal+and+sublethal+effects+of+imidacloprid+on+Osmia+lignaria+and+clothianidin+on+Megachile+rotundata+%28Hymenoptera%3A+megachilidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Economic+Entomology%22%5BJournal%5D)">Lethal and sublethal effects of imidacloprid on Osmia lignaria and clothianidin on Megachile rotundata (Hymenoptera: megachilidae).</a> Journal of Economic Entomology. 101, 784-796 (2008).</li>
<li>Yan, Z., Wang, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sublethal+effect+of+abamectin+on+3rd+instar+larvae+of+Prodenia+litura%5BTitle%5D)+AND+%22Chinese+Journal+of+Tropical+Crops%22%5BJournal%5D)">Sublethal effect of abamectin on 3rd instar larvae of Prodenia litura.</a> Chinese Journal of Tropical Crops. 32 (10), 1945-1950 (2011).</li>
<li>Song, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+ecotoxicity+of+insecticides+with+different+modes+of+action+to+Osmia+excavata+%28Hymenoptera%3A+Megachilidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Ecotoxicology+and+Environmental+Safety%22%5BJournal%5D)">Comparative ecotoxicity of insecticides with different modes of action to Osmia excavata (Hymenoptera: Megachilidae).</a> Ecotoxicology and Environmental Safety. 212 (5), 112015(2021).</li>
<li>Chen, F. J., Wu, G., Ge, F., Parajulee, M. N., Shrestha, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+elevated+CO2+and+transgenic+Bt+cotton+on+plant+chemistry%2C+performance%2C+and+feeding+of+an+insect+herbivore%2C+the+cotton+bollworm%5BTitle%5D)+AND+%22Entomologia+Experimentalis+Et+Applicata%22%5BJournal%5D)">Effects of elevated CO2 and transgenic Bt cotton on plant chemistry, performance, and feeding of an insect herbivore, the cotton bollworm.</a> Entomologia Experimentalis Et Applicata. 115 (2), 341-350 (2005).</li>
<li>Cang, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toxicity+and+safety+evaluation+of+pesticides+commonly+used+in+strawberry+production+to+bees%5BTitle%5D)+AND+%22Zhejiang+Agricultural+Sciences%22%5BJournal%5D)">Toxicity and safety evaluation of pesticides commonly used in strawberry production to bees.</a> Zhejiang Agricultural Sciences. (4), 785-787 (2009).</li>
<li>Cang, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+toxicity+and+safety+assessment+of+chiral+fipronil+against+Apis+mellifera+and+Trichogramma+ostriniae%5BTitle%5D)+AND+%22Ecotoxicology%22%5BJournal%5D)">Acute toxicity and safety assessment of chiral fipronil against Apis mellifera and Trichogramma ostriniae.</a> Ecotoxicology. 7 (3), 326-330 (2012).</li>
<li>Liu, X., Pan, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measures+to+ensure+pollination+effect+and+cocoon+recovery+rate+of+Osmia+excavata+in+apple+orchard%5BTitle%5D)+AND+%22Northwest+Horticulture%22%5BJournal%5D)">Measures to ensure pollination effect and cocoon recovery rate of Osmia excavata in apple orchard.</a> Northwest Horticulture. (3), 20-21 (2017).</li>
<li>Meikle, W. G., Adamczyk, J. J., Weiss, M., Ross, J., Beren, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sublethal+concentrations+of+clothianidin+affect+honey+bee+colony+growth+and+hive+CO2+concentration%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Sublethal concentrations of clothianidin affect honey bee colony growth and hive CO2 concentration.</a> Scientific Reports. 11 (1), 4364(2021).</li>
<li>Meikle, W. G., Adamczyk, J. J., Weiss, M., Ross, J., Beren, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sublethal+concentrations+of+clothianidin+affect+honey+bee+colony+behavior+and+interact+with+landscapes+to+affect+colony+growth%5BTitle%5D)+AND+%22BioRxiv%22%5BJournal%5D)">Sublethal concentrations of clothianidin affect honey bee colony behavior and interact with landscapes to affect colony growth.</a> BioRxiv. , (2020).</li>
<li>Wang, Y. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Combination+effects+of+three+neonicotinoid+pesticides+on+physiology+and+survival+of+honey+bees+%28Apis+mellifera+L%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Environmental+Entomology%22%5BJournal%5D)">Combination effects of three neonicotinoid pesticides on physiology and survival of honey bees (Apis mellifera L).</a> Journal of Environmental Entomology. 41 (3), 612-618 (2019).</li>
<li>Kopit, A. M., Pitts-Singer, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Routes+of+pesticide+exposure+in+solitary%2C+cavity-nesting+bees%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Entomology%22%5BJournal%5D)">Routes of pesticide exposure in solitary, cavity-nesting bees.</a> Environmental Entomology. 47 (3), 499-510 (2018).</li>
<li>Cheng, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+oral+toxicity+of+chlorpyrifos+and+imidacloprid+to+adult+honey+bees+%28Apis+mellifera+L%29%5BTitle%5D)+AND+%22Asian+Journal+of+Ecotoxicology%22%5BJournal%5D)">Chronic oral toxicity of chlorpyrifos and imidacloprid to adult honey bees (Apis mellifera L).</a> Asian Journal of Ecotoxicology. 11 (2), 715-719 (2016).</li>
<li>Li, M., Ma, C., Xiao, L., Li, Z., Su, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+chlorpyrifos+on+behavior+response+of+Apis+mellifera+and+Apis+cerana%5BTitle%5D)+AND+%22Apicultural+Science+Association+of+China%22%5BJournal%5D)">Effects of chlorpyrifos on behavior response of Apis mellifera and Apis cerana.</a> Apicultural Science Association of China. , (2016).</li>
<li>Cresswell, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+meta-analysis+of+experiments+testing+the+effects+of+a+neonicotinoid+insecticide+%28imidacloprid%29+on+honey+bees%5BTitle%5D)+AND+%22Ecotoxicology%22%5BJournal%5D)">A meta-analysis of experiments testing the effects of a neonicotinoid insecticide (imidacloprid) on honey bees.</a> Ecotoxicology. 20 (1), 149-157 (2011).</li>
<li>Nauen, R., Ebbinghaus-Kintscher, U., Schmuck, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toxicity+and+nicotinic+acetylcholine+receptor+interaction+of+imidacloprid+and+its+metabolites+in+Apis+mellifera+%28Hymenoptera%3B+Apidae%29%5BTitle%5D)+AND+%22Pest+Management+Science%22%5BJournal%5D)">Toxicity and nicotinic acetylcholine receptor interaction of imidacloprid and its metabolites in Apis mellifera (Hymenoptera; Apidae).</a> Pest Management Science. 57 (7), 577-586 (2001).</li>
<li>Colin, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+to+quantify+and+analyze+the+foraging+activity+of+honey+bees%3A+relevance+to+the+sublethal+effects+induced+by+systemic+insecticides%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Environmental+Contamination+and+Toxicology%22%5BJournal%5D)">A method to quantify and analyze the foraging activity of honey bees: relevance to the sublethal effects induced by systemic insecticides.</a> Archives of Environmental Contamination and Toxicology. 47 (3), 387-395 (2004).</li>
<li>Decourtye, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+sublethal+toxicity+of+nine+pesticides+on+olfactory+learning+performances+of+the+honeybee+Apis+mellifera%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Environmental+Contamination+%26+Toxicology%22%5BJournal%5D)">Comparative sublethal toxicity of nine pesticides on olfactory learning performances of the honeybee Apis mellifera.</a> Archives of Environmental Contamination & Toxicology. 48 (2), 242-250 (2005).</li>
<li>Williamson, S. M., Wright, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exposure+to+multiple+cholinergic+pesticides+impairs+olfactory+learning+and+memory+in+honeybees%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Experimental+Biology%22%5BJournal%5D)">Exposure to multiple cholinergic pesticides impairs olfactory learning and memory in honeybees.</a> Journal of Experimental Biology. 216 (10), 1799-1807 (2013).</li>
<li>Henry, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+common+pesticide+decreases+foraging+success+and+survival+in+honey+bees%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">A common pesticide decreases foraging success and survival in honey bees.</a> Science. 336 (6079), 348-350 (2012).</li>
<li>Matsumoto, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reduction+in+homing+flights+in+the+honey+bee+Apis+mellifera+after+a+sublethal+dose+of+neonicotinoid+insecticides%5BTitle%5D)+AND+%22Bulletin+of+Insectology%22%5BJournal%5D)">Reduction in homing flights in the honey bee Apis mellifera after a sublethal dose of neonicotinoid insecticides.</a> Bulletin of Insectology. 66 (1), 1-9 (2013).</li>
</ol>

למחברים אין ניגודי עניינים להצהיר עליהם.

עבור מאביקים בוגרים, ישנן שתי שיטות עיקריות למדידת הרעילות האקולוגית של חומרי הדברה. האחת היא שיטת המגע, שבה החומר ההדברה מיושם על הפרוטורקס של החרקים הבוגרים; השנייה היא שיטת רעילות הקיבה, שבה המאביקים הבוגרים ניזונים במי דבש המכילים חומרי הדברה25,26. בשנים האחרונות נמצא כי אפקט ההאבקה ושיעור ההאבקה של O. excavata נמוכים יחסית27. משערים כי השפעת השימוש בחומרי הדברה על גדילתם והתפתחותם של זחלים היא אחת הסיבות העיקריות לכך. עם זאת,...

מאביקים ממלאים תפקיד קריטי בשירותי המערכת האקולוגית של החקלאות הגלובלית המודרנית. בעוד דבורי דבש (Apis mellifera; Hymenoptera: Apidae) נחשבים באופן מסורתי כמאביקים הכלכליים החיוניים של גידולים חקלאיים, מחקרים אחרונים מצביעים על כך שאוסמיה (Hymenoptera: Megachilidae) חשובה מאוד גם בשיפור ההאבקה לגידולים מסוימים, הגדלת גודל הפרי ומספר הזרעים, והקטנת שיעור הפירות האסימטריים במטעים מסחריים בחלקים שונים של העולם1. חופרת Osmia נחשבה למין אידיאלי להאבקת תפוחים, בעיקר באסיה, כמו בצפון וצפון מערב סין וביפן 2,3,4. זה יכול לספק שירותי האבקה עבור גידולים מסוימים עם יעילות דומה או לפעמים עם יעילות רבה יותר. מבחינה זו, הוכח שהם מחליפים או עובדים בסינרגיה עם דבורי הדבש 4,5,6.
המאפיינים הביולוגיים של O. dicavata הם ייחודיים בהשוואה לדבורים חברתיות. פעילותו החד-משמעית, הבודדה והקינון מתרחשת בעיקר באביב ובתחילת הקיץ. הקינים של O. dicavata נמצאים בדרך כלל בחורים קיימים, בדרך כלל בדדוודים, צמחים חלולים, צינורות קש וגבעול במבוק במצב הטבעי3. ה-O. excavata הבוגר מגיח מתוך הגולם שלו כדי להזדווג, לאסוף אבקה ולבנות קן להטלת ביצים, שמתחילות לבקוע שבוע לאחר מכן. הביציות המופריות מתפתחות לנקבות, ואילו הביציות הלא מופרות מתפתחות לזכרים3. הנקבות מופצות בתחתית צינור הדבורה, וההפרשות המתאימות משמעותיות יותר. לעומת זאת, הזכרים היו בקרבת יציאת הצינור עם הוראות קלות7, כך שהזכרים יוצאים ראשונים, והנקבות יוצאות מאוחר יותר. הנקבה מערבבת אבקה עם כמות קטנה של צוף לתוך כתם לח, מקור המזון היחיד לכל זחל בתא8.
מספר מחקרים דיווחו על ירידה באוכלוסיית החרקים המאביקים 9,10. השימוש הנרחב בחומרי הדברה זוהה כאחד הגורמים העיקריים לצמצום השפע והמגוון של המאביקים ועלול גם לסכן את שירותי ההאבקה11,12. כדי להפחית ולמתן את ההשפעות השליליות של חומרי הדברה, יש צורך לבצע הערכת סיכונים לחומרי הדברה עבור מאביקים. מדינות מסוימות הקימו מסגרות רגולטוריות כדי להבטיח בטיחות לדבורים מחומרי ההדברה שבהם נעשה שימושב-13,14. מחקרים אחרונים הראו כי אוסמיה הייתה רגישה יותר לחומרי הדברה מאשר דבורי דבש 1,15.
באופן מעניין, רוב הערכות הסיכונים התמקדו בדבורי דבש בוגרות11,12; מעט מאוד מחקרים נערכו על O. dicavata, במיוחד על הזחלים. יתר על כן, התמותה של אוסמיה הנגרמת ישירות על ידי חומרי הדברה נחשבת לרוב16. ובכל זאת, הרעילות הכרוניות כגון עלייה במשקל הזחל, משך ההתפתחות, דפוסי ההאכלה, יכולת ההסקה, ההתנהגות הבוגרת שלאחר מכן וההתפשטות עלולות להיות בעלות אותו נזק כמו הרעילות הקטלנית החריפה, ולעתים קרובות מתעלמים מהן בגלל היעדר שיטת ניסוי יעילה לדבורים הבודדות17.
עד כה, שתי שיטות משמשות להערכת ההשפעות של חומרי הדברה על הזחלים של דבורים בודדות: (1) כמות מתאימה של חומרי הדברה יושמה במקום המקומי של אספקה מבלי להסיר את הביצה של דבורים בודדות 1,18,19,20; (2) החלפת מצרכים בתערובות אבקה-צוף מלאכותיות המכילות כמות מסוימת של חומר הדברה21. עם זאת, ישנן כמה מגבלות לשתי השיטות הנ"ל. הראשון יכול למדוד רק רעילות חריפה, אבל לא רעילות כרונית כי הזחלים בלעו את כל המינון בפרק זמן קצר; האחרון יוביל לשיעור תמותה גבוה בגלל מניפולציה אנושית1. כאן, שיטת הטבילה תוארה כדי לחקור את הרעילות האקולוגית של חומרי הדברה ל- O. excavata בתנאי מחקר מבוקרים ביותר על ידי הדמיית התנהגות הזחלים הניזונים משאריות חומרי הדברה באספקה בסביבה האמיתית. השיטה של מחקר זה פותרת את החסרונות של שתי השיטות לעיל והיא מתאימה למדידת ההשפעות של חומר מסוכן על רעילות חריפה וכרונית.

<table><tbody><tr><td>Abamectin</td><td>Jinan Lvba הדברה ושות' בע"מ</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מנורות אור שחור</td><td>Kanghua מכשיר רפואי ושות', בע"מ</td><td></td><td></td></tr><tr><td>תיבת צינור צנטריפוגלי עם 100 בארות</td><td>שנחאי Rebus רשת טכנולוגיה ושות', בע"מ</td><td></td><td></td></tr><tr><td>צינור צנטריפוגה</td><td>שנחאי Rebus רשת טכנולוגיה ושות', בע"מ</td><td></td><td>2 מ"ל; &nbsp; לשמש כצינור דבורה</td></tr><tr><td>ברזל הלחמה חשמלי</td><td>Kunshan Kaipai חומרה אלקטרומכנית ושות', בע"מ</td><td></td><td></td></tr><tr><td>בקנה מידה אלקטרוני</td><td>Sartorius Scientific Instruments (בייג'ינג) ושות', בע"מ</td><td>3137510295</td><td></td></tr><tr><td>צילינדר בוגר</td><td>Anhui Weiss ציוד ניסיוני ושות' בע"מ</td><td></td><td></td></tr><tr><td>צלחות פטרי (קוטר 60 מ"מ)</td> <td>צ'ינגדאו jindian ציוד ביוכימי ושות', בע"מ</td><td></td><td></td></tr><tr><td>אספקת אבקה</td><td>Yantai Bifeng מדע וטכנולוגיה חקלאית ושות' בע"מ</td><td></td><td></td></tr><tr><td>מברשת רכה</td><td>Wengang Wenhai מפעל</td><td></td><td></td>חומרי ציור</tr><tr><td>דבורים בודדות</td><td>Yantai Bifeng מדע וטכנולוגיה חקלאית בע"מ</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

הערכת ההשפעה של חומרי הדברה על הזחלים של הדבורים הבודדות

Evaluating the Effect of Pesticides on the Larvae of the Solitary Bees

הערכות הסיכונים האקולוגיות הנוכחיות של חומרי הדברה על מאביקים התייחסו בעיקר לתנאי מעבדה בלבד. עבור הזחלים של דבורים בודדות, בליעה של אספקה מזוהמת בחומרי הדברה עשויה להגדיל את שיעור התמותה של הזחלים, להקטין את שיעור האיסוף ואת אוכלוסיית הדבורים הבודדות הבוגרות בשנה הבאה מנקודת מבט דמוגרפית. אבל יש מחקרים מוגבלים על ההשפעות של חומרי הדברה על הזחלים של דבורים בודדות. לכן, הבנת האופן שבו חומרי הדברה משפיעים על הזחלים של דבורים בודדות צריכה להיחשב כחלק בלתי נפרד מהערכת הסיכונים האקולוגיים של חומרי ההדברה. מחקר זה מציג שיטה לחשיפת הזחלים של דבורה בודדה, Osmia excavata, למינונים קטלניים או תת-קרקעיים של חומרי הדברה, מעקב אחר עלייה במשקל הזחל, משך ההתפתחות, יכולת ההסתגרות ויכולת צריכת המזון של מזון שנבלע. כדי להדגים את היעילות של שיטה זו, הזחלים של O. excavata הוזנו עם אספקה המכילה מינונים קטלניים וסובלתליים חריפים של כלורפיריפוס. לאחר מכן, נחקרו האינדקסים הנ"ל של הזחלים שטופלו. טכניקה זו מסייעת לחזות ולהפחית את הסיכון של חומרי הדברה למאביקים.

התוכן של חומרי הדברה נפוצים, chlorpyrifos, imidacloprid, fendifenuron, phoxim, avermectin בהוראות היו פחות ממגבלת הכימות (0.01-0.02 מ"ג ק"ג-1) בקבוצת הביקורת; תוצאות אלה לא כללו את ההשפעה של שאריות חומרי הדברה על כל טיפול. הוערך התמותה עם ובלי הסרת זחלים מההפרשות לאחר 48 שעות בקבוצות הביקורת; התוצאות לא הראו הבדלים משמעותיים (טבלה 1), מה שמעיד על טעות אנוש קלה.
בבדיקת הרעילות הקטלנית החריפה (טבלה 2), הושרו ההפרשות בשבעה תמיסות הדברה מדוללות (0.1, 0....

הפרוטוקול הנוכחי מסביר שיטה להזנת אספקה מזוהמת בחומרי הדברה לזחלי הדבורים הבודדות, אוסמיה חופרת. ההליך בוחן את הרעילות האקולוגית של חומר ההדברה לזחלי הדבורים הבודדות.

Current ecological risk assessments of pesticides on pollinators have primarily considered only laboratory conditions. For the larvae of solitary bees, ...

פרוטוקול זה יכול לשמש כדי לחזות ולמתן את ההשפעות השליליות של חומרי הדברה על דבורים בודדות. היתרון העיקרי של טכניקה זו הוא הדמיית הזחלים הניזונים משאריות חומרי הדברה באספקה. הדגמה חזותית של שיטה זו היא קריטית מכיוון שהמאפיינים הביולוגיים של אוסמיה חפירות הם ייחודיים בהשוואה לדבורים חברתיות, ומחקר מועט נערך על O.excavata, במיוחד על הזחל.כדי להכין את צינור ההזנה, נקב חור בקוטר 0.3 מילימטר לתוך המכסה של צינור צנטריפוגה של שני מיליליטר באמצעות ברזל מתפתל חשמלי. כדי להכין את חומר ההדברה, ממיסים את חומר ההדברה בדרגה הטכנית באצטון כדי לרכוש תמיסות מלאי של 10 מיליגרם למיליליטר, ולאחר מכן מבצעים דילולים הדרגתיים של התמיסה ליותר מחמישה ריכוזים. לאחר מכן, רכשו צינורות דבורים מפלסטיק המכילים אספקה וזחל אוסמיה חופר שזה עתה בקע מתוכנית גידול המונית.באמצעות מברשת רכה, מפרידים בעדינות את הזחל מההפרשות, בוחרים זחלים נקביים על סמך גודל ההפרשה ומיקום התא בתוך הקן, ואז מניחים את הוראות הגודל האחידות עם הזחל הנקבי שנבחר בצלחות פטרי בקוטר 60 מילימטר ומניחים אותם בצד לשימוש. לפני שתמשיכו לטיפול בחומרי ההדברה, שקלו את ההוראות. כדי לטפל בהוראות באמצעות חומרי הדברה, ראשית, יש למדוד את נפח תמיסת ההדברה.לאחר מכן משרים את האספקה שנבחרה בגודל שווה בתמיסות ההדברה המדוללות למשך 10 שניות. לאחר הטיפול בהוראות עם חומ

evaluating-the-effect-of-pesticides-on-the-larvae-of-the-solitary-bees

Research

JoVE Journal

Biochemistry

ביוכימיה

קונסורציומים חיידקים בתוך bumble דבורים כוורות להעשיר ולשמר אבקה של דבורה הזחלים. באמצעות רצף הדור הבא, יחד עם המעבדה, המבוסס על שדה ניסויים, כתב יד זה מתאר פרוטוקולים המשמשים כדי לבדוק את ההשערה כי שאריות פטריות לשנות את microbiome אבקה, ודמוגרפיה המושבה, המוביל בסופו של דבר אל המושבה הפסד.

אמפירית, Metagenomic, שיטות חישוביות להאיר את מנגנוני הבריאות דבורה איזה פשרה קוטלי פטריות

בזאת אנו מציגים   שיטה להאכיל מזון מזוהם דברה כדי הן דבורת דבש פרט מושבת כוורת. ההליך מעריך את השפעת הדברה על דבורים ודבש פרט על ידי in vivo האכלה של דיאטת זחל בסיסית גם על המצב הטבעי של מושבת כוורת.

הערכת ההשפעה של כימיקלים סביבתיים על התפתחות דבורת דבש מן הפרט אל רמת קולוני

מינונים לא קטלני של חומרי הדברה עלולה להשפיע על מושבות בדרכים שאינן קשה לזהות באמצעות שיטות תקופתיים או ויזואלי בלבד. שיטות למדידת מסה הכולל דבורה למבוגרים, דגירה, מקורות מזון על ידי שקילה כוורות וחלקים הכוורת, צילום מסגרות התקנת חיישנים, הינם מסופקים. ניתוח נתונים מופנית גם.

ניטור המושבה ברמת ההשפעה של ההדברה לא קטלני על דבש דבורים

תרסיסים פטריות על צמחים פורחים עשויה לחשוף הדבורים בודד כדי ריכוזים גבוהים של שאריות אבקה בעקיצות פטריות. באמצעות מבוסס מעבדה בניסויים המערבים במבחנה-דבורה גדלו הזחלים, מחקר זה בוחן את ההשפעות אינטראקטיבי של צריכת פטריות שטופלו אבקה נגזר צמחים המחשב המארח ופונדקאי.

במבחנה גידול דבורים בודד: כלי להערכת גורמי סיכון זחל

פרוטוקול זה פותח כדי לשפר את ההבנה כיצד אגרוכימיקלים משפיעים על דבורת הדבש (Apis mellifera) רבייה על ידי יצירת שיטות לחשוף מלכות דבורי דבש ומטפלים העובדים שלהם אגרוכימיקלים בפיקוח, הגדרה מעבדה וניטור קפדני של התגובות הרלוונטיות שלהם.

הערכת הסיכון האגרוכימי למלכות דבורת הדבש המויזות

גמישות קונפורמציה משחקת תפקיד קריטי בתפקוד חלבון. בזאת, אנו מתארים את השימוש של ספקטרומטריית מסת electrospray יינון הזמן לפתור מצמידה את חילופי המימן-דאוטריום חיטוט השינויים המבניים המהירים שמניעים פונקצית חלבוני הורה אי סדר.

המרת מימן-דאוטריום electrospray יינון זמן נפתרה ספקטרומטריית מסה לימוד מבנה החלבון Dynamics

כאן נתאר פרוטוקול פשוט להפקת במהירות מאות צמיחה נמטודות מדיה אגר, 96-ובכן תרבות צלחות עם מספרים עקביים של Caenorhhabditis elegans לכל טוב. תרבויות אלה שימושיים להקרנה פנוטיפי של אורגניזם שלם. אנו מתמקדים כאן באמצעות תרבויות אלה לכימיקלים מסך עבור אפקטים פרו-אריכות ימים.

שיטה פשוטה להקרנה כימי תפוקה גבוהה ב Caenorhabditis Elegans

חלבון צבירת מעורר הסלולר סטרס חמצוני. פרוטוקול זה מתאר שיטה לניטור את המדינות amyloidogenic חלבונים תאיים סטרס חמצוני המשויכים אליהן, באמצעות cytometry זרימה. הגישה משמש כדי ללמוד על אופן הפעולה של גרסאות מסיסים ונוטה צבירת של פפטיד עמילואיד-β.

הערכת ההשפעה של חלבון צבירה על סטרס חמצוני הסלולר ב שמרים

Toeprinting נועד למדוד את היכולת של במבחנה עיבד RNA ל טופס תרגום חניכה מתחמי עם הריבוזומים תחת מגוון תנאים. פרוטוקול זה מתאר שיטה עבור toeprinting בתרבית של RNA והוא יכול לשמש כדי ללמוד תרגום תלויי-קאפ והן מונחות IRES.

ניתוח Toeprinting של תרגום חניכה היווצרות מורכבות על יונקים mRNAs

כאן אנו מציגים פרוטוקול של כל תא אלקטרוכימי ניסויים ללמוד את התרומה של פרוטון תחבורה לקצב התחבורה אלקטרון חוץ-תאית באמצעות cytochromes הממברנה החיצונית מתחם Shewanella oneidensis מר-1.

אלקטרוכימי זיהוי של דאוטריום קינטי איזוטופ אפקט על חוץ-תאית אלקטרון התחבורה מר Shewanella oneidensis -1

חקור את ההשפעות האקוטוקסיקולוגיות של חומרי הדברה על זחלים של Osmia excavata באמצעות סימולציית האכלה. שיטה זו מאפשרת הערכת סיכוני חומרי הדברה לדבורים בודדות ותורמת לשימור מקיימות של מאביקים.

הערכת ההשפעה של חומרי הדברה על הזחלים של הדבורים הבודדות

גלה סרטונים נוספים