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DOI: 10.3791/2062-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Qui, descriviamo un non-invasiva a due fotoni (2P) approccio microscopia per lo studio dei leucociti homing nella zampa del mouse. Discutiamo gli aspetti tecnici della nostra preparazione dei tessuti di imaging e camminare il lettore attraverso un tipico esperimento di configurazione iniziale di esecuzione e di raccolta dei dati.
Il reclutamento dei leucociti svolge un ruolo significativo nella difesa dell'ospite contro le infezioni e, se non controllato, può contribuire alle malattie infiammatorie e autoimmuni. Qui il reclutamento e la migrazione dei leucociti vengono visualizzati iniettando prima punti quantici in un topo per marcare in modo fluorescente il lume dei vasi sanguigni, quindi iniettando batteri nel piede per via sottocutanea. Il topo viene quindi trasferito in uno stadio di preriscaldamento in cui la sua zampa è fissata al vetro di copertura della camera di imaging.
Le immagini del reclutamento e della migrazione dei neutrofili in vivo vengono quindi acquisite utilizzando la microscopia a due fotoni e vengono analizzate quantitativamente le varie fasi del reclutamento dei leucociti, dal rotolamento e dall'adesione alla diapedesi e alla chemiotassi. Ciao, sono Wan del Dr.Mark Miller's presso il Dipartimento di Patologia e Immunologia della Washington University di St.Louis. Oggi vi mostreremo una procedura per l'imaging non invasivo a due fotoni dei leucociti, dell'homing e della migrazione in vavo.
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