Registrazione in vitro delle oscillazioni theta nell'ippocampo del topo

Inizia con un ippocampo di topo isolato in una configurazione di registrazione.

Abbassare il potenziale di campo locale o l'elettrodo LFP sulla superficie dell'ippocampo. Questo elettrodo è in grado di rilevare variazioni di tensione extracellulari indicative dell'attività della rete neuronale.

Inserire l'elettrodo e osservare le variazioni di tensione.

Inserire ulteriormente nello strato inferiore e osservare l'attività ritmica della rete neuronale, nota come oscillazioni theta.

Posizionare un secondo elettrodo a una certa distanza dal primo all'interno dello stesso strato per registrare le oscillazioni theta in una regione più ampia.

Monitora la sincronizzazione delle oscillazioni theta su distanze considerevoli. Questo mostra la connettività della rete neuronale.

Per registrare le oscillazioni theta attraverso diversi strati dell'ippocampo, iniziare posizionando il secondo elettrodo nello strato superiore.

Abbassare gradualmente l'elettrodo attraverso diversi strati.

Registra e osserva l'inversione del modello di oscillazione, che riflette la composizione neuronale e la funzione uniche di ogni strato dell'ippocampo.

In questa procedura, abbassare l'elettrodo LFP sulla superficie dell'ippocampo. Far avanzare l'elettrodo LFP attraverso lo strato piramidale e osservare l'aumento dell'attività di spiking extracellulare. Viene rilevata una singola unità di scarica dai singoli neuroni.

Abbassare ulteriormente l'elettrodo e notare che lo spiking inizia a svanire di nuovo quando la punta attraversa il radio. Osservare che un'oscillazione di rete chiaramente visibile nella gamma di frequenza theta diventa evidente e raggiunge l'ampiezza massima man mano che la posizione di registrazione viene abbassata attraverso il raggio.

Per testare le proprietà spaziali delle oscillazioni theta spontanee nella regione CA1, posizionare un secondo elettrodo LFP in un sito CA1 e osservare che le oscillazioni theta CA1 si sincronizzano su grandi distanze.

Per testare le proprietà delle oscillazioni theta attraverso gli strati dell'ippocampo, lasciare un elettrodo di riferimento in un sito di radiato CA1. Partendo da appena sopra lo strato oriens, si abbassa un secondo elettrodo nello strato di cella piramidale e attraverso il radiato. Osservare una graduale inversione del segnale LFP attraverso lo strato piramidale.