Name: Un modello del Chronic Infusion nutrienti nel ratto (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-08-14T12:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 18 s
Description: Impara a cateterizzare vene giugulari e arterie carotidee nel ratto per infusione cronica di glucosio e lipidi. Questo modello permette di studiare gli effetti dell'eccesso nutrizionale sull'omeostasi del glucosio e sulla funzione delle cellule beta.

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Questo lavoro è stato sostenuto dal National Institutes of Health (R01DK58096 a Vincent Poitout). Vincent Poitout detiene il Canada Research Chair in diabete pancreatico e funzione delle cellule beta. Bader Zarrouki ricevuto borse di studio post-dottorato da Merck e Eli Lilly. Ghislaine Fontes è stato sostenuto da una borsa di studio post-dottorato della Canadian Diabetes Association.

Sommario: La procedura consiste cateterizzazione della vena giugulare destra e sinistra arteria carotide in anestesia generale; consentendo un periodo di recupero di 7 giorni; collega i cateteri alle pompe utilizzando una girevole e sistema di contrappesi che consente all&#39;animale di muoversi liberamente nella gabbia; e infondendo glucosio e / o Intralipid (un&#39;emulsione di olio di soia che genera una miscela di circa 80% unsaturated/20% di acidi grassi saturi quando infuso con eparina 9) per 72 hr. 1. Canulation della Vena giugulare destra e l&#39;arteria carotide sinistra <ol><li> Sterilizzare gli strumenti chirurgici. Canulation tubazione deve essere sterilizzato a freddo usando un agente sterilizzante liquido (2,6% glutaraldeide) prima della procedura. Immergere il tubo in un contenitore sterilizzato per 16-24 ore. Risciacquare e lavare abbondantemente con acqua distillata sterile per rimuovere tutte le tracce di glutaraldeide prima dell&#39;uso. </li><li> Pesare il ratto per calcolaredosaggi di farmaci: Carprofene 5 mg / kg: diluizione 1/10 = Peso corporeo (g) x 0.001 ml SC (analgesico) Glicopirrolato 0,01 mg / kg: diluizione 1/10 = BW (g) X 0,0012 ml SC (anticolinergici) </li><li> Anestetizzare il ratto utilizzando isoflurano e ossigeno. </li><li> Posizionare il topo sul suo stomaco. Radere la zona dietro le orecchie alla base delle spalle. Posare il ratto sulla sua schiena. Radersi la regione sotto il collo per le zampe anteriori. </li><li> Preparazione del sito chirurgico con clorexidina, alcol e iodio. Somministrare farmaci. </li><li> Trasferire il ratto al campo chirurgico. </li><li> Utilizzando una tecnica asettica, canulate vena giugulare destra e l&#39;arteria carotide sinistra con una cannula PE-50 attaccato ad una siringa da 1 ml riempita con 5 U di soluzione fisiologica eparinizzata. Lavare le cannule con 50 U di soluzione fisiologica con eparina per evitare la coagulazione durante il periodo di recupero. Utilizzare aghi 23G smussati. Chiudere ogni cannula con un perno 23G. </li><li> Dopo l&#39;intervento chirurgico, tagliare circa 2,5 mm dalincisivi inferiori e il luogo del ratto in una giacca di infusione per evitare che le cannule da essere mangiato. </li><li> Fornire ossigeno (1 L / min per 10 minuti) per aiutare evacuare isoflurano. </li><li> Collocare il ratto in una gabbia riscaldata finché non è completamente sveglio. </li><li> Operare quattro ratti di utilizzare uno per condizione infusione (Tabella 1). </li></ol> 2. Assistenza post-operatoria (trattamento post-chirurgico e di collegamento dei cateteri) <ol><li> Pesare i ratti al giorno 1 e giorno 2 post-chirurgico. </li><li> Somministrare glycopyrrolate (BW (g) x 0,00048 ml) SC due volte al giorno 1 post-chirurgico e una volta il giorno 2 post-chirurgico. </li><li> Ulteriori trattamenti di supporto possono essere somministrati se necessario: liquidi, rilievo di riscaldamento, la dieta umida, ossigenoterapia, analgesici, anticolinergici. </li><li> Il giorno 7 post-chirurgia, pesare i topi per calcolare le portate per infusione. </li><li> Collegare ogni ratto di un sistema di infusione con un laccio e girevole montata su un grill da gabbia (Figura 1).</li><li> Lavare le cannule con 5 U di soluzione fisiologica con eparina per rimuovere i coaguli. Lavare le cannule, una volta di più con 50 U di soluzione fisiologica con eparina per prevenire la coagulazione. </li><li> Lasciare i ratti si adatti al laccio e girevole per almeno 24 ore prima di iniziare l&#39;infusione. </li></ol> 3. Infusione <ol><li> Disegnare 0,15 ml di sangue dalla carotide di ciascun ratto e misurare glicemia. Lavare le cannule giugulari. Utilizzare 50 U di soluzione fisiologica con eparina per prevenire la coagulazione sia cannule di ogni ratto. </li><li> Trasferire il campione di sangue di un tubo di raccolta ml 0,5 contenente il 2% di EDTA. Centrifugare a 10.000 rpm per 2 min e congelare il plasma a -20 ° C. </li><li> Riempire due siringhe 60 ml per ciascuna delle condizioni di infusione sotto elencate. Siringa 1 posto sulla posizione anteriore della pompa e siringa 2 posto sulla posizione posteriore della pompa. </li><li> Unisciti a ogni coppia di soluzioni con y-connettori e CO-EX tubi T22 che è stato sterilizzato. Mettere le siringhe su un Harvard 33doppia pompa siringa. </li><li> Modificare il fondo della gabbia e rimuovere tutti gli alimenti alla griglia superiore della gabbia. </li><li> Pesare 150 g di cibo standard e posto sulla griglia superiore della gabbia. </li><li> Collegare le siringhe per la girella sulla griglia della gabbia. Lavare le siringhe correttamente per rimuovere l&#39;aria intrappolata dalle linee. </li><li> Calcolare le portate di infusione utilizzando il peso corporeo che è stata presa prima di collegare il ratto al sistema di infusione. Le tariffe sono calcolate con un file di Microsoft Excel che converte il tasso di infusione di glucosio (GIR) in ml / h. </li><li> Impostare la pompa per amministrare le portate per 60 ml siringhe in base alle impostazioni del produttore. Inserire il tasso di siringa 1 (siringa anteriore) e il tasso per siringa 2 (torna siringa). </li><li> Avviare la pompa. </li></ol> 4. Monitoraggio <ol><li> Dopo aver avviato la pompa, verificare che non vi sia fuoriuscita dalla girevole o dalle cannule e tubi di infusione non sia attorcigliata. Verificare inoltre che non vi siano bolle d&#39;aria nelil tubo. </li><li> Dopo 3 ore di infusione, prelevare un campione di sangue per monitorare la glicemia. Ripetere dopo 6, 24, 48, e 72 ore di infusione. Per precauzione, glicemia viene monitorato anche dopo 30, 34, 54, e 60 ore di infusione. Glucosio nel sangue può essere misurata usando una goccia di sangue intero utilizzando un monitor portatile glucosio. Questo limita la quantità di sangue prelevato durante l&#39;infusione e quindi evita alterare significativamente il volume del sangue e / o ematocrito. </li><li> Il tasso per siringa 1 è modificato sulla base di valori di glicemia a mantenere glicemia a 220-250 mg / dl. Il tasso di siringa 2 non cambia durante la 72 ore di infusione, perché gli acidi grassi liberi sono mantenuti a 1 mmol / L. </li><li> Condizioni di infusione sono accoppiati in modo che il volume ricevuto per gli animali di controllo è equivalente al volume ricevuto per gli animali di prova (Tabella 1). </li><li> Dopo 24 ore di infusione, cambiare il fondo gabbia e pesare il cibo che rimane nella griglia gabbia. Restituire la parte non mangiato tØ la griglia della gabbia. Ripetere dopo 48 ore. </li><li> Refill siringhe al giorno secondo necessità durante la 72 ore di infusione. </li><li> Durante l&#39;infusione, osservare sempre il ratto per eventuali segni di infiammazione o di disagio. L&#39;assistenza appropriata, se necessario. </li></ol> 5. Eutanasia post-infusione <ol><li class="jove_content"> Dopo 72 h di infusione, i ratti vengono anestetizzati per via endovenosa con 0,5 ml di un cocktail di ketamina / xilazina (182 mg / kg di ketamina e 11,6 mg / kg di xilazina diluito 1:2 con 0,9% NaCl). </li><li class="jove_content"> Il riflesso toe-pinch viene utilizzato per verificare il livello di anestesia. Ulteriori anestetico viene somministrato come necessario. </li><li class="jove_content"> Quando il ratto è anestetizzato, la cavità addominale viene aperto con forbici chirurgiche. Il ratto è dissanguato disegnando 10-15 ml di sangue in una siringa dalla aorta o la vena cava. </li></ol>

<ol><li>Poitout, V., Robertson, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glucolipotoxicity%3A+fuel+excess+and+beta-cell+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22Endocr.+Rev%22%5BJournal%5D)">Glucolipotoxicity: fuel excess and beta-cell dysfunction.</a> Endocr. Rev. 29, 351-366 (2008).</li>
<li>Poitout, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glucolipotoxicity+of+the+pancreatic+beta+cell%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim.+Biophys.+Acta%22%5BJournal%5D)">Glucolipotoxicity of the pancreatic beta cell.</a> Biochim. Biophys. Acta. 1801, 289-298 (2010).</li>
<li>Unger, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Minireview%3A+weapons+of+lean+body+mass+destruction%3A+the+role+of+ectopic+lipids+in+the+metabolic+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Minireview: weapons of lean body mass destruction: the role of ectopic lipids in the metabolic syndrome.</a> Endocrinology. 144, 5159-5165 (2003).</li>
<li>Harmon, J. S., Gleason, C. E., Tanaka, Y., Poitout, V., Robertson, R. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antecedent+hyperglycemia%2C+not+hyperlipidemia%2C+is+associated+with+increased+islet+triacylglycerol+content+and+decreased+insulin+gene+mRNA+level+in+Zucker+diabetic+fatty+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Antecedent hyperglycemia, not hyperlipidemia, is associated with increased islet triacylglycerol content and decreased insulin gene mRNA level in Zucker diabetic fatty rats.</a> Diabetes. 50, 2481-2486 (2001).</li>
<li>Bachar, E., Ariav, Y., Cerasi, E., Kaiser, N., Leibowitz, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuronal+nitric+oxide+synthase+protects+the+pancreatic+beta+cell+from+glucolipotoxicity-induced+endoplasmic+reticulum+stress+and+apoptosis%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetologia%22%5BJournal%5D)">Neuronal nitric oxide synthase protects the pancreatic beta cell from glucolipotoxicity-induced endoplasmic reticulum stress and apoptosis.</a> Diabetologia. 53, 2177-2187 (2010).</li>
<li>Peyot, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beta-cell+failure+in+diet-induced+obese+mice+stratified+according+to+body+weight+gain%3A+secretory+dysfunction+and+altered+islet+lipid+metabolism+without+steatosis+or+reduced+beta-cell+mass%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Beta-cell failure in diet-induced obese mice stratified according to body weight gain: secretory dysfunction and altered islet lipid metabolism without steatosis or reduced beta-cell mass.</a> Diabetes. 59, 2178-2187 (2010).</li>
<li>Hagman, D. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cyclical+and+alternating+infusions+of+glucose+and+intralipid+in+rats+inhibit+insulin+gene+expression+and+Pdx-1+binding+in+islets%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Cyclical and alternating infusions of glucose and intralipid in rats inhibit insulin gene expression and Pdx-1 binding in islets.</a> Diabetes. 57, 424-431 (2008).</li>
<li>Fontes, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glucolipotoxicity+age-dependently+impairs+beta+cell+function+in+rats+despite+a+marked+increase+in+beta+cell+mass%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetologia%22%5BJournal%5D)">Glucolipotoxicity age-dependently impairs beta cell function in rats despite a marked increase in beta cell mass.</a> Diabetologia. 53, 2369-2379 (2010).</li>
<li>Stein, D. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Essentiality+of+circulating+fatty+acids+for+glucose-stimulated+insulin+secretion+in+the+fasted+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Clin.+Invest%22%5BJournal%5D)">Essentiality of circulating fatty acids for glucose-stimulated insulin secretion in the fasted rat.</a> J. Clin. Invest. 97, 2728-2735 (1996).</li>
<li>Leahy, J. L., Cooper, H. E., Weir, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+insulin+secretion+associated+with+near+normoglycemia.+Study+in+normal+rats+with+96-h+in+vivo+glucose+infusions%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Impaired insulin secretion associated with near normoglycemia. Study in normal rats with 96-h in vivo glucose infusions.</a> Diabetes. 36, 459-464 (1987).</li>
<li>Hager, S. R., Jochen, A. L., Kalkhoff, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insulin+resistance+in+normal+rats+infused+with+glucose+for+72+h%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Insulin resistance in normal rats infused with glucose for 72 h.</a> The American Journal of Physiology. 260, 353-362 (1991).</li>
<li>Laybutt, D. R., Chisholm, D. J., Kraegen, E. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Specific+adaptations+in+muscle+and+adipose+tissue+in+response+to+chronic+systemic+glucose+oversupply+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Specific adaptations in muscle and adipose tissue in response to chronic systemic glucose oversupply in rats.</a> The American Journal of Physiology. 273, E1-E9 (1997).</li>
<li>Jonas, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+glucose+stimulates+early+response+gene+c-Myc+expression+in+rat+pancreatic+beta+cells%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Biological+Chemistry%22%5BJournal%5D)">High glucose stimulates early response gene c-Myc expression in rat pancreatic beta cells.</a> The Journal of Biological Chemistry. 276, 35375-35381 (2001).</li>
<li>Tang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glucose-induced+beta+cell+dysfunction+in+vivo+in+rats%3A+link+between+oxidative+stress+and+endoplasmic+reticulum+stress%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetologia%22%5BJournal%5D)">Glucose-induced beta cell dysfunction in vivo in rats: link between oxidative stress and endoplasmic reticulum stress.</a> Diabetologia. 55, 1366-1379 (2012).</li>
<li>Alonso, L. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glucose+infusion+in+mice%3A+a+new+model+to+induce+beta-cell+replication%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Glucose infusion in mice: a new model to induce beta-cell replication.</a> Diabetes. 56, 1792-1801 (2007).</li>
<li>Magnan, C., Gilbert, M., Kahn, B. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+free+fatty+acid+infusion+in+rats+results+in+insulin+resistance+but+no+alteration+in+insulin-responsive+glucose+transporter+levels+in+skeletal+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22Lipids%22%5BJournal%5D)">Chronic free fatty acid infusion in rats results in insulin resistance but no alteration in insulin-responsive glucose transporter levels in skeletal muscle.</a> Lipids. 31, 1141-1149 (1996).</li>
<li>Goh, T. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipid-induced+beta-cell+dysfunction+in+vivo+in+models+of+progressive+beta-cell+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Endocrinol.+Metab%22%5BJournal%5D)">Lipid-induced beta-cell dysfunction in vivo in models of progressive beta-cell failure.</a> Am. J. Physiol. Endocrinol. Metab. 292, 549-560 (2007).</li>
<li>Pascoe, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Free+fatty+acids+block+glucose-induced+beta-cell+proliferation+in+mice+by+inducing+cell+cycle+inhibitors+p16+and+p18%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes%22%5BJournal%5D)">Free fatty acids block glucose-induced beta-cell proliferation in mice by inducing cell cycle inhibitors p16 and p18.</a> Diabetes. 61, 632-641 (2012).</li>
<li>Bell, C. G., Walley, A. J., Froguel, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+genetics+of+human+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews.+Genetics%22%5BJournal%5D)">The genetics of human obesity.</a> Nature Reviews. Genetics. 6, 221-234 (2005).</li>
<li>Fontes, G., Hagman, D. K., Latour, M. G., Semache, M., Poitout, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lack+of+preservation+of+insulin+gene+expression+by+a+glucagon-like+peptide+1+agonist+or+a+dipeptidyl+peptidase+4+inhibitor+in+an+in+vivo+model+of+glucolipotoxicity%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetes+Res.+Clin.+Pract%22%5BJournal%5D)">Lack of preservation of insulin gene expression by a glucagon-like peptide 1 agonist or a dipeptidyl peptidase 4 inhibitor in an in vivo model of glucolipotoxicity.</a> Diabetes Res. Clin. Pract. 87, 322-328 (2010).</li>
<li>Crawford, P. A., Schaffer, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+stress+in+the+myocardium%3A+Adaptations+of+gene+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Molecular+and+Cellular+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Metabolic stress in the myocardium: Adaptations of gene expression.</a> Journal of Molecular and Cellular Cardiology. , (2012).</li>
<li>Kewalramani, G., Bilan, P. J., Klip, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Muscle+insulin+resistance%3A+assault+by+lipids%2C+cytokines+and+local+macrophages%5BTitle%5D)+AND+%22Curr.+Opin.+Clin.+Nutr.+Metab+Care%22%5BJournal%5D)">Muscle insulin resistance: assault by lipids, cytokines and local macrophages.</a> Curr. Opin. Clin. Nutr. Metab Care. 13, 382-390 (2010).</li>
<li>Cusi, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+obesity+and+lipotoxicity+in+the+development+of+nonalcoholic+steatohepatitis%3A+pathophysiology+and+clinical+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Role of obesity and lipotoxicity in the development of nonalcoholic steatohepatitis: pathophysiology and clinical implications.</a> Gastroenterology. 142, 711-725 (2012).</li>
</ol>

Vincent Poitout è co-fondatore di contratti di ricerca e ha ricevuto da Bêtagenex Inc., un&#39;organizzazione di ricerca a contratto, che offre il modello di infusione presentato in questo articolo come un servizio commerciale.

Sebbene un certo numero di studi precedenti hanno impiegato infusioni cronici di glucosio (ad esempio 10-15) o lipidi (ad esempio 16,17) nei roditori, a nostra conoscenza l&#39;infusione combinata di entrambi i carburanti è stato riportato soltanto nei topi 18. Il modello di infusione cronica qui presentato offre diversi vantaggi per studiare gli effetti sulla eccesso di nutrienti su una varietà di funzioni biologiche nei ratti. In primo luogo, esso non comporta roditor...

Livelli cronicamente elevati di glucosio e lipidi in circolo sono state proposte per contribuire alla patogenesi del diabete di tipo 2 alterando la funzione dei vari organi implicati nel mantenimento dell&#39;omeostasi del glucosio compreso, ma non limitato a, il pancreas cellule beta (recensione in 1). Le ipotesi postula glucotossicità che l&#39;iperglicemia cronica aggrava il difetto delle cellule beta che ha dato origine alla iperglicemia, in primo luogo, creando così un circolo vizioso e contribuendo al deterioramento del controllo glicemico nei pazienti con diabete di tipo 2. Allo stesso modo, l&#39;ipotesi glucolipotoxicity propone che aumenti concomitanti dei livelli di glucosio e di lipidi, come spesso osservati nel diabete di tipo 2, sono dannosi per la cellula beta. Decifrare i meccanismi cellulari e molecolari degli effetti deleteri di nutrienti cronicamente elevati di funzionalità delle cellule beta del pancreas è la chiave per il understanding della patogenesi del diabete di tipo 2 1. A tal fine, un gran numero di studi hanno esaminato i meccanismi della cronica nutrienti in eccesso ex vivo in isole di Langerhans isolate o in vitro in linee cellulari clonali, secernono insulina. Tuttavia, la traduzione dei risultati ottenuti in questi sistemi modello per l&#39;intero organismo è complesso, in particolare perché le concentrazioni di acidi grassi utilizzati in cellule coltivate o isolotti raramente corrispondono i livelli circolanti nelle vicinanze delle cellule beta in vivo 2. D&#39;altra parte, i meccanismi di guasto beta-cellula in risposta ad eccesso di nutrienti sono stati esaminati in modelli di roditori di diabete, come esemplificato dal ratto Zucker Diabetic Fatty 3,4, il gerbillo Psammomys obesus 5 e l&#39;alta percentuale di grassi dieta- fed del mouse 6. Questi modelli, tuttavia, sono caratterizzati da intrinseche anomalie metaboliche e non sono facilmente suscettibili di manipolazioni di glicemiae / o livelli di lipidi in un ambiente più controllato e meno cronica. Per essere in grado di alterare i livelli circolanti di nutrienti in un lasso di tempo di giorni in animali altrimenti normali, abbiamo sviluppato un modello di infusione cronica in ratti normali che ci permette di esaminare gli effetti di lipidi e del glucosio, da soli o in combinazione, su parametri fisiologici e funzionali 7,8.

<table><tbody><tr><td>Soluzione salina 0,9%</td><td>BD</td><td>JB1324</td><td></td></tr><tr><td>Destrosio 70%</td><td>McKesson</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Intralipide 20%</td><td>Fresenius Kabi</td><td>JB6023</td><td></td></tr><tr><td>Metricide (Glutaraldeide 2,6%)</td><td>Metrex</td><td>11-1401</td><td></td></tr><tr><td>Eparina Sodica 10.000 USP u/ml</td><td>PPC</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Carprofene</td><td>Metacam</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Glicopirrolato</td><td>Sandoz</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Isoflurano</td><td>Abbott</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cloesadina 2%</td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td>Alcool 70%</td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td>Iodio</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>PE-50</td><td>BD</td><td>427411</td><td></td></tr><tr><td>CO-EX T22</td><td>Instech Solomon</td><td>BCOEX-T22</td><td></td></tr><tr><td>Connettore 22G</td><td>Instech Solomon</td><td>SC22/15</td><td></td></tr><tr><td>Girevole 22G</td><td>Instech Solomon</td><td>375/22PS</td><td></td></tr><tr><td>Connettore a Y 22G</td><td>Instech Solomon</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Contrappeso e braccio</td><td>Instech Solomon</td><td>CM375BP</td><td></td></tr><tr><td>23 G aghi smussati</td><td>Instech Solomon</td><td>LS23</td><td></td></tr><tr><td>23 G perni di canulazione</td><td>Instech Solomon</td><td>SP23/12</td><td></td></tr><tr><td>Lacci (12 pollici)</td><td>Lomir</td><td>RT12D</td><td></td></tr><tr><td>Giacche per infusione </td><td>Lomir</td><td>RJ01, RJ02, RJ03, RJ04</td><td></td></tr><tr><td>(SM-XL)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pezzo di fissaggio</td><td>Lomir</td><td>RS T1</td><td></td></tr><tr><td>Siringa da 60 ml</td><td>BD</td><td>309653</td><td></td></tr><tr><td>Siringa da 1 ml</td><td>BD</td><td>309602</td><td></td></tr></tbody></table>

un modello del chronic infusion nutrienti nel ratto

A Model of Chronic Nutrient Infusion in the Rat

Esposizione cronica a livelli eccessivi di nutrienti è postulata a pregiudicare la funzione di diversi organi e tessuti e per contribuire allo sviluppo delle molte complicazioni associate con l&#39;obesità e la sindrome metabolica, compreso il diabete di tipo 2. Per studiare i meccanismi con cui livelli eccessivi di glucosio e acidi grassi influenzano la beta pancreatiche cellule e la secrezione di insulina, abbiamo stabilito un modello infusione di sostanze nutrienti cronica nel ratto. La procedura consiste di cateterizzazione della vena giugulare destra e sinistra arteria carotide in anestesia generale; consentendo un periodo di recupero di 7 giorni; collega i cateteri alle pompe utilizzando una girevole e sistema di contrappesi che consente all&#39;animale di muoversi liberamente nella gabbia; ed infondendo glucosio e / o Intralipid (un&#39;emulsione di olio di soia che genera una miscela di circa 80% unsaturated/20% di acidi grassi saturi quando infuso con eparina) per 72 hr. Questo modello offre diversi vantagGES, compresa la possibilità di modulare finemente i livelli target di glucosio circolante e di acidi grassi, la possibilità di co-infusione composti farmacologici, e il lasso di tempo relativamente breve rispetto a modelli alimentari. Può essere usato per esaminare i meccanismi della disfunzione nutrienti indotta in una varietà di organi e testare l&#39;efficacia dei farmaci in questo contesto.

Su una serie di 42 ratti che hanno subito un intervento chirurgico, 5 ratti sono stati persi durante il periodo post-operatorio e 1 ratto è stato perso durante l&#39;infusione, con un tasso complessivo di successo del 86%. Il peso corporeo medio dei 37 ratti che sono stati poi infuse era 608 ± 5 g prima dell&#39;intervento e 588 ± 6 g al di iniziare l&#39;infusione (media ± SE, n = 37, p &lt;0,0001 per paired t-test). I seguenti risultati rappresentativi sono stati ottenuti in due gruppi: infusione. Saline (SAL), e gluc...

Un protocollo per infusioni cronici di glucosio e Intralipid nei ratti è descritto. Questo modello può essere utilizzato per studiare l&#39;impatto di un eccesso di nutrienti in funzione degli organi e dei parametri fisiologici.

Un modello del Chronic Infusion nutrienti nel ratto

Chronic exposure to excessive levels of nutrients is postulated to  affect the function of several organs and tissues and to contribute to the  ...

L'obiettivo generale di questa procedura è cateterizzare le vene giugulari e le arterie carotidi dei ratti per infondere glucosio e lipidi come modello di eccesso cronico di nutrienti. Questo viene realizzato cateterizzando innanzitutto la vena giugulare e l'arteria carotidea sotto anestesia generale. Dopo la procedura, al ratto viene consentito un periodo di recupero di sei giorni.Successivamente, i cateteri vengono collegati a pompe di infusione tramite un tubo flessibile e un giunto rotante montati sulla sommità della gabbia. Infine, il ratto viene sottoposto a infusione di soluzioni di glucosio e lipidi. In definitiva, è possibile ottenere risultati che mostrano gli effetti dell'eccesso cronico di nutrienti sull'omeostasi del glucosio.Il vantaggio principale di questa tecnica rispetto ad altri modelli, come ad esempio i modelli genetici, è che consente di esaminare i cambiamenti precoci della funzione delle cellule beta in risposta all'eccesso di nutrienti. Un altro vantaggio è la possibilità di modulare specificamente i livelli di glucosio e di intralipidi o lipidi nella circolazione. Attualmente utilizziamo questa tecnica per analizzare le alterazioni della funzione delle cel

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Questo video mostra l'incannulamento intraduodenale in un modello di ratto. Dopo aver anestetizzato il ratto, si localizza il duodeno e si crea una piccola puntura. Una cannula a forma di J con una punta smussata viene inserita e fissata con cura e l'incisione viene chiusa. Il modello di ratto cannulato consente l'infusione intra-intestinale per studi di immunopatologia.

Incannulamento intraduodenale in un modello di ratto per studi di immunopatologia

Un metodo a due stadi per stabilire malattia renale cronica (CKD) nel ratto Lewis rimuovere chirurgicamente 5/6th di massa renale è descritta. Combinazione della procedura chirurgica, NOS-inibizione e di una dieta ad alto contenuto di sale porta a un modello simile CKD umano, permettendo lo studio di meccanismi e di sviluppo di nuovi interventi terapeutici causali.

5/6th nefrectomia in combinazione con dieta di sale e di ossido nitrico sintasi Inibizione di indurre la malattia renale cronica nel ratto Lewis

Questo protocollo descrive un modello murino cateterizzato centralmente di malattia critica prolungata. Combiniamo il metodo della legatura e della puntura cecale per indurre la sepsi con l'uso di una linea venosa centrale per la somministrazione di fluidi, farmaci e nutrienti per imitare l'ambiente clinico umano.

L&#39;uso di un venoso Central Line per fluidi, farmaci e nutrienti Administration in un modello murino di malattia critica

Questo protocollo descrive l'uso di una dieta caffetteria molto appetibile e in stile occidentale per modellare l'eccesso di cibo e l'obesità nei roditori. Qui, forniamo un contorno dettagliato della selezione, preparazione e misurazione degli alimenti e spieghiamo i fattori metodologici che aiutano a generare un fenotipo robusto e riproducibile.

Palatable Western-stile caffetteria dieta come un metodo affidabile per la modellazione dell'obesità indotta da dieta nei roditori

L'accesso per infusione a lungo termine nell'arteria mesenterica superiore (SMA) dei ratti è una procedura chirurgica che consiste nella cannulazione di un ramo prossimale della SMA. La cannula esce dalla ferita addominale e viene tunnelizzata attraverso lo spazio sottocutaneo fino alla piega interscapolare.

Targeting dell'intestino tenue del ratto: infusione a lungo termine nell'arteria mesenterica superiore

La pancreatite cronica (CP) è una malattia caratterizzata da infiammazione e fibrosi del pancreas, spesso associata a dolori addominali intrattabili. Questo articolo si concentra sul perfezionamento della tecnica per generare un modello murino di CP tramite infusione del dotto biliare con acido 2,4,6 -trinitrobenzene solfonico (TNBS).

Un modello murino per la pancreatite cronica tramite infusione di TNBS del dotto biliare

Questo documento presenta le risposte morfometriche e i risultati delle prestazioni di allenamento di un protocollo di allenamento a intervalli ad alta intensità (HIIT) in un modello di ratto Sprague-Dawley di obesità indotta dalla dieta. Lo scopo di questo protocollo era quello di massimizzare l'intensità dell'esercizio e determinare le risposte fisiologiche all'HIIT nei ratti magri e obesi.

Un modello cronico di allenamento a intervalli ad alta intensità e obesità indotta dalla dieta per massimizzare lo sforzo fisico e indurre cambiamenti fisiologici nei ratti

Questo protocollo descrive un modello di trapianto intestinale basato su ratto con ileostomia per la valutazione del decorso temporale dell'intervento farmacologico sul rigetto del trapianto.

Un modello di trapianto intestinale di rigetto dell'innesto di ratto con ileostomia esteriorizzata per la valutazione della prognosi longitudinale

Questo studio offre un metodo riproducibile e standardizzato al fine di stabilire modelli di ratto obesi che mostrano obesità semplice, comunemente caratterizzata da pancreas grasso. Include anche protocolli dettagliati per il campionamento del tessuto pancreatico e l'immunoistochimica.

Sviluppo e convalida di una metodologia per stabilire modelli di ratto obesi con pancreas grasso tipico

Questo articolo presenta un modello ischemico di CKD utilizzando IRI renale unilaterale con nefrectomia controlaterale eseguita un giorno prima della raccolta del campione; questo protocollo consente la valutazione funzionale basata sul siero, la sopravvivenza elevata e la patologia riproducibile della MRC entro 28 e 42 giorni, fornendo una piattaforma versatile per studi meccanicistici e interventistici.

Modello murino di transizione da malattia renale acuta a cronica indotta da ischemia/lesione da reperfusione renale

Impara a cateterizzare vene giugulari e arterie carotidee nel ratto per infusione cronica di glucosio e lipidi. Questo modello permette di studiare gli effetti dell'eccesso nutrizionale sull'omeostasi del glucosio e sulla funzione delle cellule beta.

Un modello del Chronic Infusion nutrienti nel ratto

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