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Immunofluorescenza indiretta su sezioni congelate di mouse ghiandola mammaria
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JoVE Journal Biology
Indirect Immunofluorescence on Frozen Sections of Mouse Mammary Gland

Immunofluorescenza indiretta su sezioni congelate di mouse ghiandola mammaria

Full Text
38,696 Views
11:13 min
December 1, 2015

DOI: 10.3791/53179-v

Edith Honvo-Houéto1, Sandrine Truchet1

1Jouy-en-Josas Centre,INRA

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Il protocollo immunofluorescenza indiretta descritto in questo articolo consente il rilevamento e la localizzazione delle proteine ​​nella ghiandola mammaria del mouse. Un metodo completo è dato per la preparazione di campioni della ghiandola mammaria, per eseguire immunoistochimica, per l'immagine delle sezioni di tessuto al microscopio a fluorescenza, e di ricostruire le immagini.

L'obiettivo generale di questa procedura è localizzare le proteine di interesse nel tessuto mammario del topo durante l'allattamento. Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave nel campo della biologia cellulare, come ad esempio dove le proteine snap coinvolte nella secrezione del prodotto intermedio, si sono localizzate nelle cellule epiteliali mammarie del topo durante l'allattamento. Il vantaggio principale di questa tecnica è che è possibile osservare rapidamente e facilmente la posizione delle proteine in un determinato contesto tissutale.

Dopo l'eutanasia, posizionare il topo sul dorso, bagnare la zona ventrale con etanolo e poi asciugarlo con un tovagliolo di carta. Quindi, usa una pinza per sollevare la pelle addominale tra le due zampe posteriori e fai un'incisione lunga un centimetro attraverso la pelle con un paio di forbici affilate. Partendo da questa prima incisione, tagliare la pelle fino al collo e poi allontanare la pelle dal peritoneo.

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Biologia Molecolare Numero 106 ghiandola mammaria del mouse delle cellule epiteliali mammarie allattamento sezioni di tessuto immunofluorescenza indiretta immunoistochimica microscopia a fluorescenza l'imaging il latte SNARE

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