January 25th, 2018
Questa carta presenta un protocollo per l'indagine sociale trasmissione di preferenza dell'alimento nei topi. I vantaggi e le possibili applicazioni per questa procedura, per esempio, nel rilevare i cambiamenti in anticipo in modelli murini di annuncio, sono evidenziate. Per concludere, interpretazione dei risultati alla luce dettagli critici sono discussi.
L'obiettivo generale di questa procedura è valutare il potere della trasmissione sociale delle preferenze alimentari per lo studio della memoria olfattiva socialmente indotta e l'individuazione della malattia di Alzheimer. Questi metodi possono aiutare a rispondere a domande chiave nel campo delle neuroscienze comportamentali, come ad esempio come i roditori comunicano con gli altri o trasmettono segnali olfattivi. Questa tecnica ha il potenziale per la diagnosi della malattia di Alzheimer in quanto la disfunzione della cognizione olfattiva durante le prime fasi della malattia, può essere utile per la diagnosi dell'Alzheimer.
Prima di iniziare la trasmissione sociale delle preferenze alimentari, o procedura STFP, seppellisci un biscotto con gocce di cioccolato in un angolo casuale di una gabbia di alloggiamento individuale pulita a circa un centimetro sotto la superficie della lettiera e posiziona il topo osservatore nella gabbia. Registra la latenza per trovare il cookie con un cutoff di 15 minuti per escludere deficit di rilevamento dell'olfatto e per evitare test STFP dispendiosi in termini di tempo e non necessari. Quindi, abbassare le pareti per separare gli scomparti destro e sinistro e posizionare un contenitore pieno di normali pellet per cibo in ciascuno dei due angoli dell'apparato a tre camere.
Posizionare delicatamente il mouse osservatore nella camera centrale e lasciare che il mouse soggetto si abitui all'apparecchio per 10 minuti. Quindi, apri le porte scorrevoli e lascia che il mouse in questione esplori liberamente l'intero apparato per altri 10 minuti. Il giorno successivo, abbassare le pareti per separare nuovamente i compartimenti destro e sinistro e posizionare un mouse dimostratore all'interno di una tazza di contenimento del filo metallico.
Posiziona la tazza nella camera centrale e scrivi l'abbreviazione del cibo con cui è stato utilizzato il dimostratore sul coperchio della tazza di filo di fronte alla telecamera montata. Posiziona delicatamente il mouse soggetto nella camera centrale e lascia che il mouse soggetto esplori liberamente il mouse dimostratore per 30 minuti. Alla fine del periodo di esplorazione, pesare ogni topo ed etichettare ogni animale con un ID e un sapore osservati.
Quindi, rimuovere le pareti divisorie e posizionare un contenitore per alimenti del cibo in un angolo dell'apparecchio a tre camere e un contenitore per alimenti di un nuovo cibo non utilizzato in un altro angolo dell'apparecchio. Posiziona delicatamente il mouse soggetto nella camera centrale e lascia che il mouse esplori liberamente l'intera arena per 120 minuti. Quindi, misura la preferenza alimentare pesando il cibo rimanente.
Nell'analisi rappresentativa della fase di esplorazione sociale, i topi wild type non hanno dimostrato alcuna differenza nella distanza totale percorsa o nel tempo trascorso con il topo dimostratore rispetto ai topi transgenici con malattia di Alzheimer. Durante la fase di test delle preferenze alimentari, l'animale di tipo selvatico ricordava il suo precedente contatto con l'odore e preferiva mangiare di più e trascorrere più tempo con il cibo aromatizzato corrispondente, indicando una memoria alimentare intatta e socialmente indotta. Gli animali mutanti, tuttavia, non hanno mostrato una preferenza per il cibo stimolato rispetto al nuovo cibo non stimolato, indicativo di una memoria alimentare diminuita e socialmente indotta.
Una volta padroneggiata, questa tecnica può essere completata in tre ore per soggetto in tre giorni consecutivi, se eseguita correttamente. Prima e dopo aver tentato questa procedura, è importante ricordarsi di pulire accuratamente l'attrezzatura e l'interno dell'arena per evitare pregiudizi olfattivi tra i topi. Questa tecnica si basa sul fenomeno di un roditore osservatore ingenuo che mostra una maggiore preferenza per un alimento specifico dopo l'interazione con i roditori dimostrativi che hanno mangiato lo stesso cibo.
Sebbene questi metodi possano fornire informazioni sull'apprendimento olfattivo e sulla memoria in modelli murini transgenici di Alzheimer, possono essere utilizzati anche in altri modelli murini di disturbi neuropsichiatrici caratterizzati da ricondizionamento olfattivo e deficit di memoria. Dopo aver visto questo video, dovresti avere una buona comprensione di come valutare i miglioramenti sociali delle preferenze dietetiche nei topi.
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Questo documento presenta un protocollo per studiare la trasmissione sociale delle preferenze alimentari nei topi, enfatizzando le sue potenziali applicazioni nella rilevazione dei primi cambiamenti nei modelli di malattia di Alzheimer. Lo studio discute l'interpretazione dei risultati alla luce di dettagli critici.