Acido ialuronico base di idrogel per cultura 3-dimensionale delle cellule di Glioblastoma paziente-derivato

Questo metodo può aiutare a rispondere a domande chiave sui tumori del glioblastoma e su come la matrice extracellulare può facilitare la resistenza al trattamento. Questa tecnica consente la costruzione modulare di piattaforme di coltura cellulare 3D adattabili che possono essere utilizzate per coltivare cellule di glioblastoma derivate da pazienti in un ambiente che si avvicina meglio al cervello nativo. Per iniziare, posizionare stampi in gomma siliconica puliti e asciutti in ciascun pozzetto di una piastra a 12 pozzetti non trattata con coltura tissutale e utilizzare l'estremità smussata pulita di una punta di pipetta per far aderire gli stampi al fondo della piastra.

Dopo aver controllato la tenuta tra gli stampi e il fondo dei pozzetti, raccogliere le gliomasfere dissociate da una coltura cellulare di glioblastoma mediante centrifugazione e risospendere il pellet in un millilitro di enzima di dissociazione cellulare. Dopo cinque minuti a temperatura ambiente, agitare il tubo picchiettando delicatamente e arrestare la reazione enzimatica con quattro millilitri di terreno completo. Centrifugare nuovamente le celle e risospendere il pellet in un millilitro di terreno fresco completo prima di filtrare le celle attraverso un filtro da 70 micrometri.