この記事では、拘束を用いて慢性固定化されたマウスにおける抑うつ様行動の誘導のための簡略化された標準化されたプロトコルを提供する。また、うつ病の誘導を検証する行動や生理学的手法について説明する。
うつ病はまだ完全に理解されていないが、様々な原因要因が報告されている。最近、うつ病の有病率が増加している。しかし、うつ病の治療法やうつ病の研究は少ない。そこで本論文では、運動制限によるうつ病のマウスモデルを提案する。慢性軽度ストレス(CMS)は、うつ病のような行動を誘発するよく知られている技術です。しかし、それは様々な軽度のストレスの組み合わせからなる複雑な手順を必要とする。対照的に、慢性固定化ストレス(CIS)は、容易にアクセス可能な慢性ストレスモデルであり、一定期間の拘束を用いて動きを制限することによって抑うつ行動を誘発する拘束モデルから改変される。うつ病様挙動を評価するために、ショ糖優先試験(SPT)、テールサスペンション試験(TST)、およびストレスマーカーコルチコステロンレベルを測定するELISAアッセイを組み合わせた実験である。記載されたプロトコルは、CISの誘導およびうつ病の検証のための行動および生理学的要因の変化の評価を示す。
大うつ病性障害(MDD)は、世界的な精神障害の主な原因であり、発生率は予想よりも速く増加しています。2001年、世界保健機関(WHO)は、MDDが2020年までに世界で2番目に一般的な疾患になると予測しました。しかし、それはすでに2013年1で2番目に一般的でした.さらに、現在の抗うつ薬には、遅延効果、薬剤耐性、再発、および様々な副作用2、3を含む多くの制限がある。したがって、研究者は、より効果的な抗うつ薬を開発する必要があります。しかし、MDDのあいまいな病態生理学は、新規抗うつ薬の開発に障害を提示する。
長期ストレスはMDDの主な危険因子です。それはまた、MDD病因4、5に関連している視床下部下垂体副腎(HPA)軸で機能不全を誘発することができます。前述したように、HPA軸は、コルチコステロンレベル6、7、8を増加させることにより、うつ病や不安障害を含むストレス誘発性精神病態生理学において重要な役割を果たしている。9.多くの動物モデルは、MDD4の患者で観察されるHPA軸の持続的な活性化に基づいている。さらに、慢性的なストレスによって誘発される高いグルココルチコイドと皮下注射されたグルココルチコイドは、神経細胞死、神経過程の萎縮、げっ歯類の脳における成人神経新生の減少と共にうつ病行動を引き起こす10,11.うつ病に関連するもう一つの重要な脳領域は、中間前頭前皮質(mPFC)である。mPFCは、視床下部や扁桃体などの脳のサブ領域を制御する上で重要な役割を果たし、感情的な行動およびストレス応答8,9を制御する。例えば、後部mPFCにおける病変は、拘束ストレス12、13に起因するHPA軸機能障害および増強コルチコステロン分泌を誘発した。最近の研究はまた、繰り返し拘束ストレスがコルチコステロンレベルを増加させ、これはmPFC9のニューロンとアストロサイト間のグルタミン-グルタミンサイクルを介してグルタミン補充によって減少させることができることを示した。
MDDの病因を研究するために使用される最初の慢性ストレスパラダイムは、Katz14によって示唆された。ウィルナーらは、カッツの所見に基づいて慢性軽度ストレス(CMS)モデルを提案した。彼らは、抗うつ薬がCMS誘発性非ヘドニック様挙動15,16を回復したことを観察することによって、モデルが予測的妥当性を持っていることを確認した。一般的に、CMSモデルは、軽度の騒音、ケージの傾き、濡れた寝具、変化した明暗サイクル、ケージの揺れ、強制水泳、社会的敗北などの様々な軽度のストレスの組み合わせで構成されています。CMSモデルは研究者によって広く利用されている;ただし、このモデルは再現性が低く、時間とエネルギー効率が低下します。したがって、うつ病を評価するためのうつ病様行動および生理学的分析の誘導のための標準化された簡素化されたプロトコルの需要が高まっています。CMSモデルと比較して、慢性固定化ストレス(CIS;慢性拘束ストレスとも呼ばれる)モデルは、より簡単かつ効率的です。したがって、CISモデルは、慢性ストレス研究17、18、19、20、21、22、23、および、 24.さらに、CISは、うつ病行動25、26を開発するために、雄と雌の両方のマウスで使用することができる。CISの間、動物は2または4週間9、27、28のために1日あたり1〜8時間のボディフィットサイズのシリンダーに置かれる。このうち、1日2時間の拘束ストレス状態は、マウス9、28における痛みを最小限に抑えたうつ病行動を引き起こすのに十分である。拘束条件下では、血中コルチコステロンレベルは9、28、29と急速に増加した。いくつかの研究は、CISモデルが予測的な妥当性を有することを示しており、CIS誘発うつ病様症状が抗うつ薬19、20、30、31によって回復することを確認した。本明細では、CISの詳細な手順、ならびにマウスにおけるCIS後のいくつかの行動および生理学的結果を報告する。
脳の複雑さとMDDの不均一性は、完全に状態を再現する動物モデルを作成することは困難です。多くの研究者は、アンヘドニア(刺激に対する関心の欠如)と絶望が進化的に保存され、動物モデルで定量化可能な行動と考えられている内方線型ベースのアプローチ32を使用して、この困難を克服しました。うつ病33の患者にも見られる。本論文では,CISとMDDの翻訳…
The authors have nothing to disclose.
本研究は、文部科学省(NRF-2015R1A5A2008833、NRF-2016R1D1D1A1B03934279)の助成を受け、韓国国立研究財団(NRF)を通じて基礎科学研究プログラム(IHS)の助成を受けました。GNU-2016-02) 慶南国立大学
1 ml disposable syringes | Sungshim Medical | P000CFDO | |
Balance | A&D Company | FX-2000i | |
Ball nozzle | Jeung Do B&P | JD-C-88 | |
CCTV camera | KOCOM | KCB-381 | |
Corticosterone ELISA kits | Cayman Chemical | ||
Digital lux meter | TES | TES-1330A | |
Ethovision XT 7.1 | Noldus Information Technology | ||
Isoflurane | HANA PHARM CO., LTD. | Ifran solution | |
Mice | Koatech | C57BL/6 strain | |
Restrainer | Dae-jong Instrument Industry | DJ-428 | |
Saccharose (sucrose) | DAEJUNG | 7501-4400 | |
Small animal isoflurane anaesthetic system | Summit | ||
Acrylic bar | The apparatus was made in the lab for TST test | ||
Tail suspension box | The apparatus was made in the lab | ||
Timer | Electronics Tomorrow | TL-2530 | |
Water bottle | Jeung Do B&P | JD-C-79 |