ストレプトゾシン治療:1型糖尿病のゼブラフィッシュモデル

- 1型糖尿病は、免疫系が膵臓のインスリン産生ベータ細胞を破壊するヒトの病気です。ストレプトゾシンは、ゼブラフィッシュに1型糖尿病を誘発する可能性があります。まず、魚の水中の2-フェノキシエタノールの溶液で魚を麻酔します。魚を取り、腹側を上に向けてペトリ皿に置きます。魚の体重1グラムあたり0.35ミリグラムに基づいてストレプトゾシンの投与量を計算し、生理食塩水で希釈します。

ゼブラフィッシュの腹側にある骨盤帯の下に腹腔内注射によりストレプトゾシンを投与します。.ストレプトゾシンは、膵臓ベータ細胞のGLUT2受容体に結合し、インスリンの分泌につながるリガンドであるN-アセチルグルコサミンと構造的に類似しています。したがって、ストレプトゾシンは、細胞内でそれを輸送する膵臓ベータ細胞に存在するGLUT2受容体に結合します。

β細胞に侵入すると、ストレプトゾシンは免疫応答を引き起こし、自己抗原の放出につながります。自己抗原は、免疫系がベータ細胞を異物として認識し、それらを破壊してインスリンのレベルを低下させます。ストレプトゾシンを3日目と5日目に繰り返し投与し、その後、免疫応答を維持するために7日ごとに1回、毎週投与します。

次の例では、1 型糖尿病のゼブラフィッシュ モデルを生成します。糖尿病のゼブラフィッシュを作製するには、通常の魚水が入った回収タンクと、2-フェノキシエタノールを1〜1,000倍に希釈した魚水の麻酔タンクを準備します。ドラフトの下で、6ミリグラムのSTZを2ミリリットルの0.09%塩化ナトリウムに加えて、ストレプトゾシンまたはSTZの0.3%溶液を準備し、すぐに溶液を氷の上に置きます。.

別のチューブに、コントロールフィッシュに十分な生理食塩水を詰めます。27ゲージと1/2ゲージの針を装備したハーフCCシリンジにSTZまたは制御溶液を充填し、気泡が閉じ込められないようにします。1匹の魚を麻酔水に入れ、遊泳の動きが止まるまで約1〜2分待って麻酔をかけます。

麻酔をかけたら、魚をペーパータオルの上に短時間置き、余分な水分を吸収します。次に、魚を計量ボートに入れて計量します。次に、魚を固い面に置きます。次に、斜角を過ぎた針を腹側腹膜の後面に挿入し、STZ1グラムあたり0.35ミリグラムまたは同量の制御溶液を魚の腹腔に注入します。

注射後、魚を回収水タンクに入れ、通常の遊泳活動を監視します。実験に十分な量の魚を注入した後、通常の生きている水槽に移し、摂氏22〜24度の温度に保ちます。温度の低下は、高血糖の効率的な誘導にとって重要です。非常に高い高血糖の長期状態を誘発するには、ここに示すように、導入段階で頻繁に注射し、その後毎週の維持注射のスケジュールに従います。.