マウスモデルにおける治療送達のための定位固定槽マグナアプローチ

頭を傾けた定位固定フレーム上の麻酔をかけたマウスから始めます。

マウスの頭皮切開は、小脳と脳幹の間の脳脊髄液またはCSFで満たされた空間である大槽を覆う硬膜を露出させます。

鉗子を使用して硬膜をつかみ、その中に小さな開口部を作り、大貯槽にアクセスします。

滅菌綿棒を使用して、余分なCSFを除去します。

脊髄が脳幹に接続する解剖学的基準点を特定し、定位座標を決定します。

治療液が入っているマイクロピペットを保持している定位固定アームを下げます。

マイクロピペットをシスターナマグナを通して所定の座標で脳幹に進めます。

溶液をゆっくりと注入し、逆流を防ぐためにピペットを短時間保持します。

治療液は、標準的な定位固定法では到達が困難な脳幹および上部脊髄領域に直接到達します。

開いた硬膜を通して詳細なランドマークのある脳幹の背側表面を表示します。

角度の付いた鉗子を使用して、後頭骨からアトラスまで伸びる硬膜をつかみ、スプリングハサミを使用して硬膜に約0.5〜1.5ミリメートルの小さな開口部を作ります。硬膜が開いたら、滅菌綿棒で余分な脳脊髄液を排出します。中心管が第4脳室に通じる点であるobexは、標準的な前後および中外側のゼロ点です。

定位固定アームを使用して、ピペットまたはシリンジをターゲットに配置します。背腹の腕を背腹のゼロ点から形成される背側表面に下げます。次に、ピペットを脳幹に下げて溶液を注入します。

3〜50ナノリットルの容量を使用する場合、針の跡を避けるために、注射後1〜5分間針を所定の位置に置いてください。次に、定位固定アームを使用してピペットまたはシリンジを持ち上げ、複数のターゲットに対してこれを繰り返します。