マウス脳へのヒト神経前駆細胞の移植

麻酔をかけたマウスを定位固定フレームに固定します。

角膜の乾燥を防ぐために眼軟膏を塗ります。

頭皮を剃り、皮膚を消毒します。

耳棒を挿入して頭蓋骨を安定させます。

次に、正中線を切開して頭蓋骨を露出させます。

目標座標で頭蓋骨に穴を開けます。

視覚化のために、ルシフェラーゼと蛍光タンパク質を発現する遺伝子組み換えヒト神経前駆細胞またはNPCをシリンジにロードします。

注射器をターゲット部位に合わせ、針を希望の深さまで下げます。

細胞の漏れを防ぐために、針の周りに組織接着剤を塗布します。

細胞をゆっくりと注入して、均一な分布を確保します。

細胞懸濁液の逆流を防ぐために、針を所定の位置に短時間保持します。

最後に、針をゆっくりと引き抜き、切開部を閉じます。

で、NPCを移植したマウスモデルを視覚化する準備が整いました。

動物を誘導室から定位固定フレームに搬送し、フェイスマスクを使用して麻酔を維持します。

目の乾燥を防ぐために眼科用潤滑剤を塗布してください。電気カミソリでマウスの頭皮を剃り、綿棒を使用して5%のベタジン溶液で皮膚を消毒します。マウスヘッドを固定し、イヤーバーを外道に挿入します。

外科用歯科用ドリルで頭蓋骨に直径2〜3ミリメートルの穴を開けます。調製した細胞をチューブに再懸濁し、2マイクロリットルの細胞懸濁液をシリンジに引き込みます。注射器をターゲット部位の上に置き、針を硬膜の表面にゆっくりと動かし、深さ座標を計算します。