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肝腫瘍を含む麻酔ラットを取ります。
ラットを解剖して、適切な肝動脈に分岐し、肝臓と胃十二指腸動脈に血液を供給する総肝動脈を露出させます。
胃十二指腸動脈を結紮して、その後の注射中にウイルスが他の臓器に到達するのを防ぎます。
総肝動脈をクランプして血流を一時的に遮断します。
溶瘤性ウイルスを胃十二指腸動脈に注入し、注射部位の上に結紮して出血を防ぎます。
ウイルスが適切な肝動脈に侵入し、肝臓内に広がるようにクランプを解除します。切開部を閉じて、ラットを回復させます。
腫瘍溶解性ウイルスが細胞に入ります。健康な細胞は、ウイルスの複製をブロックする機能的な抗ウイルスタンパク質を産生します。
がん細胞では、機能しない抗ウイルスタンパク質がウイルス複製を阻害できず、最終的にがん細胞の溶解を引き起こします。
肝動脈を分離するには、まず、湿らせた綿のアプリケーター綿棒を 2 本使用して、腸と盲腸を腹腔から下部のガーゼ綿棒にそっと移し、ガーゼを臓器の上に折りたたんで湿らせます。
次に、左外側肝葉をゆっくりと持ち上げて上部ガーゼの上にひっくり返し、小さなバネハサミを使用して葉の下側の線維膜を切ります。ガーゼをローブの上に折りたたんで所定の位置に保持します。
次に、解剖顕微鏡と細い鉗子を使用して、前尾状葉を取り囲む薄い膜を解剖し、葉を上部ガーゼの上にひっくり返します。前尾状葉を左外側葉でガーゼのひだの下に置き、次に、同じ方法で後尾状葉を解剖します。
後尾状葉をガーゼの下に置いた後、その強い脈動によって総肝動脈を見つけます。解剖学的に右の動脈をたどって、細い鉗子を使用して、胃十二指腸と適切な肝動脈を覆い隠している厚い膜組織を除去します。
コットンアプリケーターで出血を止めます。次に、2つの細い非外傷性鉗子を使用して、周囲の膜から総肝動脈、胃十二指腸動脈、および適切な肝動脈を注意深く解剖します。
肝動脈を注入するには、まず、胃十二指腸動脈の下に7-0プロレン縫合糸を通し、マイクロニードルホルダーを使用して、分岐部のすぐ上の動脈の遠位端に永久結紮糸を結び、両端に約2インチの縫合糸を残します。
次に、総肝動脈に小さなクランプを置き、血流を一時的に遮断します。クランプを配置してから 5 分以内に、胃十二指腸動脈に焦点が合い、針を正確に挿入するのに十分な大きさに見えるまで倍率を上げます。
次に、注射注射器の針を胃十二指腸動脈の内腔に挿入し、プランジャーをゆっくりと押し下げて形質導入効率を最大化します。注射量全体が投与されたら、針を動脈からゆっくりと引っ込め、胃十二指腸動脈の下に2番目の7-0プロレン縫合糸を通します。
注射部位の上に2番目の永久結紮糸を結び、総肝動脈からクランプを取り外します。肝臓に向かう適切な肝動脈を通る血流が回復したことを確認し、結紮糸の緩い端を切断します。内出血がないか確認します。次に、外部化された組織を腹腔に戻します。
4-0 ビクリルと湾曲した針を使用して、筋肉と皮膚を約 1 ミリメートル間隔で連続縫合糸で別々の層に縫合します。次に、動物が完全に回復するまで動物を監視します。