ショックチューブ装置を用いた脳切片における外傷性損傷の誘発

位ドライバーセクション、ダイヤフラムブリーチアセンブリ、圧力センサーとサンプルホルダーを備えた遠位駆動セクションで構成されるショックチューブのセットアップから始めます。

この装置は、コントロールユニットを介して加圧ガスボンベに接続されます。

サンプルホルダーにブランキングロッドを挿入して、ショックチューブの出口に合わせます。

圧力センサーを記録装置に取り付けます。

ショックチューブコントロールを閉じたままにし、ガスボンベの出口を開いてコントロールユニットに圧力をかけます。

ポリエステルシートダイヤフラムをブリーチアセンブリに固定します。

実験培地中の脳スライスを含む膜を含むバッグをサンプルホルダーに入れます。

ショックチューブのガスコントロールノブを開くと、ドライバー部にガスが入り、空気圧が上昇します。

これによりダイヤフラムが破裂し、衝撃波を発生させる高圧が放出されます。

この衝撃波は伝わり、脳のスライスに衝撃を与え、外傷性組織損傷を引き起こします。

ブランキングロッドを使用して滅菌バッグホルダーフレームをショックチューブ遠位フランジにボルトで固定し、中央の穴がショックチューブの出口と位置が揃っていることを確認します。センサー1は、圧力トランスデューサーが被駆動部の中央部分にあり、センサー2はショックチューブの遠位フランジにあります。

これらの圧力トランスデューサを電流源電源ユニットを介してオシロスコープに接続し、オシロスコープの電源を入れます。ショックチューブソレノイドバルブと流量制御が閉じていることを確認してから、外部圧縮空気ラインを開き、ソレノイドバルブを2.5バールまで充電します。圧縮空気シリンダーの安全弁を開き、圧力調整器をゆっくりと開いて圧力を約5バールまで上げます。

次に、厚さ23ミクロンのポリエステルシートを10×10センチ四方にカットしてダイヤフラムを準備します。オートクレーブテープからハンドルを用意し、各ダイヤフラムの上下に貼り付けます。1つのダイヤフラムをブリーチに配置し、それらが中央にあることを確認します。

次に、4本のM24ボルトとナットを使用してダイヤフラムをクランプします。ダイヤフラムにしわが寄らないようにしながら、斜め対称に順番に固定します。無菌バッグをホルダーフレームの垂直位置にクランプし、器官型海馬スライスを含む組織培養インサートの表面がショックチューブ出口に面し、組織培養インサートが滅菌バッグの内側の中央にあることを確認します。

ダブルダイヤフラム構成の場合、破裂圧力はドライバーとダブルブリーチチャンバーの間のガス圧力差に依存します。したがって、ダイヤフラムが制御された方法で破裂するために、目標圧力に達すると、ダブルブリーチ安全弁が手動で開きます。

イヤーディフェンダーと安全メガネを着用してください(まだ着用していない場合は)。電磁弁を閉じます。電流源電源ユニットのスイッチを入れると、衝撃波データが取得されます。

ショックチューブコントロールパネルの流量制御ノブを操作して、ドライバーボリュームセクションとダブルダイヤフラム構成のショックチューブのダブルブリーチセクションの両方でシングルダイヤフラム構成のショックチューブのドライバーボリュームセクションをゆっくりと加圧します。ダイヤフラムが破裂したらすぐに、フローノブを使用して圧縮空気の流れをすばやく閉じ、電磁弁を開きます。

衝撃波パラメータの理想的な組み合わせは、組織損傷を引き起こすのに十分である必要がありますが、組織培養インサートまたは滅菌バッグの歪みまたは破裂を引き起こすほど高くはありません。