FRET Microscopy for Real-time Monitoring of Signaling Events in Live Cells Using Unimolecular Biosensors

Julia U. Sprenger; Ruwan K. Perera; Konrad R. G&#246;tz; Viacheslav O. Nikolaev

doi:10.3791/4081

単分子バイオセンサーを用いた生細胞中のシグナル伝達事象をリアルタイムで監視するための顕微鏡のFRET

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Biology

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FRET Microscopy for Real-time Monitoring of Signaling Events in Live Cells Using Unimolecular Biosensors

単分子バイオセンサーを用いた生細胞中のシグナル伝達事象をリアルタイムで監視するための顕微鏡のFRET

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10:34 min

August 20, 2012

DOI: 10.3791/4081-v

Julia U. Sprenger¹, Ruwan K. Perera¹, Konrad R. Götz¹, Viacheslav O. Nikolaev¹

¹Emmy Noether Group of the DFG, Department of Cardiology and Pneumology, European Heart Research Insitute Göttingen,Georg August University Medical Center, Göttingen, Germany

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

フェルスター共鳴エネルギー移動（FRET）顕微鏡は、レポーターとして、様々なバイオセンサーを用いた生細胞中のシグナル伝達事象をリアルタイムで監視するための強力な手法です。ここで我々はどのようにカスタマイズされたエピ蛍光を構築するには市販のコンポーネントと方法実験をFRETのためにそれを使用するからイメージングシステムをFRETについて説明します。

このビデオ記事では、市販のコンポーネントからカスタマイズされたエピ蛍光フレットイメージングシステムを構築する方法を説明し、無傷の細胞における細胞内環状 a MP のリアルタイムモニタリングにそれを使用する方法を示します。まず、フレットイメージングを組み立てるための段階的な手順について詳しく説明します。次に、システムが完全にセットアップされたら、ソフトウェアのインストールと構成のプロセスを示します。

細胞内環状物質の測定に使用します。トランスフェクションされた細胞のA MPレベルは、このシステムを使用して得られたデータが、フレット比を測定することにより、細胞内の環状A MPダイナミクスのモニタリングに有用であることが実証されています。この手法の主な利点は、SECメッセンジャー、生化学的イベント、またはタンパク質タンパク質相互作用を、無傷の細胞や組織で高い空間的および時間的分解能で視覚化できることです。

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