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匂い物質へ節足動物Responseの垂直T-迷路チョイスアッセイ
匂い物質へ節足動物Responseの垂直T-迷路チョイスアッセイ
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JoVE Journal Neuroscience
Vertical T-maze Choice Assay for Arthropod Response to Odorants

匂い物質へ節足動物Responseの垂直T-迷路チョイスアッセイ

Full Text
15,438 Views
06:13 min
February 14, 2013

DOI: 10.3791/50229-v

Lukasz Stelinski1, Siddharth Tiwari1

1Entomology and Nematology Department,University of Florida

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This article describes a vertical T-maze olfactometer designed to assess the behavioral responses of arthropods to various odorants. The device enables the measurement of both attraction and repulsion to different odor fields.

Key Study Components

Area of Science

  • Behavioral ecology
  • Olfactory response in insects
  • Experimental design in entomology

Background

  • The olfactometer is a tool for studying insect behavior in response to odors.
  • It allows researchers to create controlled environments for testing insect preferences.
  • Understanding these behaviors can provide insights into pest management and ecological interactions.
  • Previous studies have utilized similar setups to investigate various insect responses.

Purpose of Study

  • To measure the behavioral responses of insects to different odorants.
  • To determine the effectiveness of attractants and repellents.
  • To establish a reliable method for assessing insect choices in a controlled setting.

Methods Used

  • Construction of a vertical T-maze olfactometer with two odor ports.
  • Introduction of test subjects (CIDs) into the maze for observation.
  • Control tests to eliminate bias from environmental factors.
  • Recording of insect choices over a set observation period.

Main Results

  • Insects displayed distinct preferences for certain odors over others.
  • Statistical analysis confirmed significant differences in responses to various odor combinations.
  • The setup effectively measured both attraction and repulsion behaviors.
  • Results contribute to understanding insect olfactory mechanisms.

Conclusions

  • The vertical T-maze olfactometer is a valuable tool for studying insect behavior.
  • Findings can inform pest control strategies by identifying effective attractants and repellents.
  • Future research can expand on these methods to explore other insect species and odorants.

Frequently Asked Questions

What is the purpose of the olfactometer?
The olfactometer is used to measure insect behavioral responses to different odors.
How are the insects introduced into the maze?
Insects are placed in the maze and observed for their choice between odor fields.
What types of odors can be tested?
Various attractants and repellents can be tested using the olfactometer.
How is bias eliminated in the experiments?
Control tests with clean air and solvent are conducted to ensure no positional bias affects results.
What are the main findings of the study?
Insects showed significant preferences for certain odors, indicating their behavioral responses to olfactory cues.

垂直、T迷路嗅覚は節足動物の行動反応を測定するために記載されています。嗅覚は、2つの潜在的な臭気のフィールドにさらされたとき、実験者は被験者によって行わ選択肢を測定することができます。両方の魅力と匂い物質からの反発は、この装置を用いて測定することができます。

この手順の全体的な目標は、臭気物質に反応したCIDの挙動を測定することです。これは、最初に、さまざまな臭気の選択肢が異なる空間領域に関連付けられている垂直TMAを作成することによって達成されます。2番目のステップは、CIDをテマゼに導入することです。

次に、CIDを一定時間観察して、迷路のどちらの腕を選択するかを確認し、その選択を記録します。最終的に、垂直テマス選択アッセイは、匂い物質に対する昆虫の行動反応を明らかにするために使用されます。Spectometerは昆虫の自然な行動を、さまざまな誘引物質および忌避剤への昆虫の応答をテストするために利用する。

最初のステップとして、実験アセンブリとアッセイを実行できる温度制御された部屋または環境チャンバーを見つけます。実験セットアップの構築は、カスタムの2ポート嗅覚計の組み立てから開始します。嗅覚計は、30センチメートルのガラス管を2つの別々のポートに分岐させ、テフロンストリップでテーズを形成しています。

各半分は、2つの選択スタイルの嗅覚計のアームに類似しており、被験者は2つの潜在的な匂いフィールドから選択できます。最適な光拡散を得るには、不透明な容器を使用して実験アセンブリを囲みます。TMAのOlfactometerを垂直に取り付けた後、蛍光灯900 luxe電球の下に置き、昆虫入口をolfactometerに接続します。

臭気源は、固相マイクロ抽出源チャンバーに収容されています。テフロンガラス管コネクタを使用して、嗅覚計アームを臭気源に接続します。次に、空気供給システムを、一定の圧力下にある加湿および炭素精製された空気の外部ソースに接続します。

臭気源を調製するには、目的の化学サンプルを適切な溶媒に溶解します。これを綿の芯にピペットで固定します。また、コントロールサンプルを作成するためだけに、綿の芯に溶媒を含浸させます。

処理された制御綿の芯を実験室の組織に包み込み、ガラス器具の重大な汚染を防ぎます。サンプルが必要な場合は、ソースチャンバーの1つに入れます。臭気のある試験を行う前に、T MAs Olfactometerでケイツを清浄な空気と清浄な空気、および溶媒と清浄な空気にさらします。

これは、被験者に位置バイアスや効果的な溶媒がないことを確認するのに役立ちます。清浄な空気と清浄な空気を比較するには、空気供給システムに接続された2つのポンプを介して、空のソースチャンバーを通じて精製および加湿された空気の流れを開始します。嗅覚計の両アームを通る空気の流れを毎分0.1リットルに維持します。

すべての観察が標準温度と相対湿度で行われることを確認してください。次に、チャンバー内に約20個のSIDSを配置することにより、この制御テストを開始します。100 秒から 300 秒の間の所定の間隔で SIDS を観察します。

重量により、彼らは環境に反応することができます。時間が経過したら、テスト環境に対する CID の応答を記録します。ディバイダーの最低点より上のTアゼの左部分に交差する各SLIの左腕のスコアリングを採点します。右腕のスコアと同様にスコアを付けます。

他の選択が行われない場合、リリースアームの選択を採点します。すべての応答が記録されたら、アスピレーターを使用してCIDを収集します。溶媒と清浄な空気について同様の試験を行い、ソースチャンバーの1つに溶媒芯を導入します。

コントロールの実行後の観測値には、異なる CID のセットを使用します。臭気試験を開始するには、各バイオアッセイの開始時に、匂い源を嗅覚計のアームの1つにランダムに割り当てます。少なくとも10人の被験者がアッセイを行うたびに、この位置を逆にして、潜在的な位置バイアスを排除します。

再度、空気の流れ、温度、湿度が変わっていないことを確認してください。1回のランでチャンバーに1つ以上のセートを導入する ここでのテストでは、約10個が導入されます。臭気の組み合わせごとに最低30人から最大120人の被験者の応答をテストします。

状態を100〜300秒間観察して、行動反応を示すようにします。時間間隔は事前に設定する必要があります。被験者が匂い、コントロールアーム、またはリリースアームの選択で嗅覚計アームに入ったときに、匂いの選択を採点することにより、被験者のアームの選択を記録します。

最後に、すべての観察結果が記録されたら、別の臭気処理のセットアップを使用する前に、吸引器を使用してCIDを取り外し、嗅覚計と接続チューブを2%SOAP溶液で完全に洗浄し、ガラス部品を華氏200度で24時間焼きます。このプロットは、柑橘類の宿主植物からの揮発性物質に対するアジアの柑橘類の反応と、クリーンな空気制御を選択しました。このプロットは、上部と下部の両方のプロットで、柑橘類の揮発性物質に対するアジアの柑橘類の反応と、ジメチルジスルフィド、撥水剤と共放出された柑橘類の揮発性物質の応答を選択しました。

文字でラベル付けされた列は、統計的に有意に異なり、信頼度は 95% を超えています。一元配置分散分析とそれに続く tui によると。正直なところ、有意差テストは、その設計に非常に広く、多くの場合、調査されている特定の昆虫の問題に合わせて設計され、調整されています。

現在の記事では、垂直方向のtマサルの設計と使用について説明しています。さまざまな臭いに対する昆虫の反応を測定するために使用される反射率計。

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