少年ラット用マイルド外傷性脳損傷の新規モデル

修正されたウェイトドロップ技術は、若年ラットの軽度の外傷性脳損傷の誘発に使用される簡単で費用対効果の高い手順です。この新しい技術は、軽度の外傷性脳損傷 (mTBI) と脳震盪の研究を前進させる臨床的に関連する症状を生み出します。

この手順の全体的な目標は、幼若ラットに軽度の外傷性脳損傷を引き起こすことです。これは、最初に傷害誘発プラットフォームを準備することによって達成されます。次に、麻酔をかけたラットを、スコアリングされたティンフォイルの上に伏せて置きます。

所定の位置に収まると、重りが落とされ、頭に一撃が与えられます。その後、動物は仰臥位にされ、それ自体を書くのにかかる時間が記録されます。翌日のパフォーマンスは、ウォーキングビームテストで測定されます。

したがって、この技術が他の技術よりも優れているのは、動物が短時間だけ麻酔をかけられることです。これは閉鎖性頭部外傷であり、これにより同じ動物で同じ怪我を数回繰り返すことができますが、この怪我には臨床的により関連性のある回転要素があります。この技術の意味は、モデルが臨床的に関連する症状を不均一に誘発するため、小児脳震盪と軽度の外傷性脳損傷の治療にまで及び、手順が私たちの研究室の技術者であるアイリーン・マとハーリーン・ハハであることを示しています。

研究室の学部生です。軽度の外傷性脳損傷装置を設置するには、透明なプラスチック製のU字型のステージを構築します。ステージの下部にスポンジを置いて、落下した動物を集めます。

次に、鋭利なカミソリの刃でアルミホイルに切り込みを入れます。スコアリングされたアルミホイルがラットの体重を支えていることを確認し、衝撃後の加速を妨げないようにしてください。スコアリングされたアルミホイルをステージの上部にテープで固定してタウになるようにし、ガイドチューブの下の正しい位置に置きます。

ガイドチューブをティンフォイルの3.5センチメートル上になるように配置します。次に、おもりの上部に釣り糸を取り付けます。ガイドチューブの内側に重りを置き、重りがホイルから2.5cm上にぶら下がるようにラインを固定します。

この高さは、ラットが安全に複数のヒットを受けるのを防ぎます。釣り糸をclに取り付けますamp スタンド。釣り糸でプラスチック製のガイドチューブを通してウェイトを引き上げ、0.5メートルの高さに配置された六角レンチピンで所定の位置に保持します。

まず、麻酔をかけたラットの鎮静の深さを確認し、ラットの胸部をホイルの上にすばやく置き、頭を直接落下する重量の経路に置きます。開始する準備ができたら、六角レンチピンを引いて、ウェイトがプラスチックガイドチューブを通って垂直に落下できるようにします。打たれると、ラットは急速に180度回転し、仰臥位に着地します。

すぐにラットをコレクションスポンジから取り出し、綿の先端のアプリケーターでラットの頭に局所リドカインを塗布します。.次に、ラットを仰臥位にして清潔で加熱されたケージに入れます。動物が麻酔薬から目覚め、仰臥位から腹臥位に反転するまで動物を観察します。

これを、偽の負傷した制御グループの値を書き込む時間として記録します。動物に麻酔をかけ、前に示したようにステージに置きます。次に、アレンキーピンを引っ張らずにラットをアルミホイルから取り出し、局所リドカインを頭に塗ります。

ラットを仰臥位にして清潔で加熱されたケージに置き、値を書き込むまでの時間を記録します。最後に、ラットが正常な行動を回復した後、ラットをホームケージに戻し、次の対照動物で繰り返します。脳損傷の誘発から24時間後、動物を処置室に戻します。

ラットを清潔な保持ケージに移し、ラットのホームケージを置きます。テーパー梁面の狭い方の端で、梁の幅の広い端に向かうケージの開放端部分。テーパービームには、安全性を提供する小さな棚を備えた中央プラットフォームがあります。

ビームの幅の広い端にビデオカメラを置き、全長が見えるまでピントを調整します。準備ができたら、ネズミを先細りの梁の広い端に置き、梁を横切ってホームケージに向かって歩くように促します。ネズミがビームを横切ってホームケージに入ったら、少なくとも60秒間休ませます。

ターゲットの場所を強化するために、これは試行番号1であり、分析には含まれていません。次に、ビデオカメラをオンにし、ラットがホームケージの62回目の強化期間を維持しながら、ビーム歩行タスクを追加で完了できるようにします。ラットがすべての試験を終えたら、ホームケージに戻し、次の動物をテストします。

試験中に動物がビームから落ちた場合は、すぐに持ち上げて、落下した場所のビームに戻します。データをスコアリングします。テスト後、個々の試行ごとに後肢の足のスリップの数とビームを横切るための合計時間を記録します。

このデータを使用して、各動物と試験グループの平均値を計算します。このグラフは、1回の脳損傷を経験した幼若ラットと偽対照群のスコアを書くための平均時間差を比較したものです。負傷したラットは、仰臥位から自分自身を書くのに必要な時間が大幅に増加したことを示しました。

ここでは、ビーム歩行課題で後肢の足が滑った平均回数を、1回の損傷を経験した幼若ラットについて示しています。偽の負傷したラットと比較して、負傷した動物は、この手順に従って、対照と比較してビームを横切る足の滑りが有意に多くなりました。その後、遊戯療法などの他の非侵襲的介入を検討して、そのような介入が実際に子供たちが経験する社会的欠陥の一部を改善できるかどうかを判断することができます。脳震盪。

このビデオを見た後、幼いげっ歯類の軽度の外傷性脳損傷を安全に誘発および検出する方法を十分に理解しているはずです。これは、複数の時点で繰り返すことができます。