Name: ラットにおけるパブロフ付きアルコール探索行動の状況誘発性のリニューアルを観察する手順 (動画) | JoVE Journal
Uploaded: 2014-09-19T14:00:00.000+00:00
Duration: 13 min 24 s
Description: 学ぶ ラットにおけるパブロフ付きアルコール探索行動の状況誘発性リニューアル法。異なる環境文脈での判別訓練と消去訓練を通じて、再発メカニズムを解明する動物モデルを提供します。

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

この作業は、米国カリフォルニア州サンフランシスコ校のPatricia H. Janak博士に授与された国立アルコール乱用・アルコール依存症研究所（RO1 AA014925、ケベック州サンテ財団）、および自然科学・工学研究評議会（NC））によって支援されました。この記事のオープンアクセス公開は、Med Associates Inc.のスポンサーシップによって可能になりました。

<ol><li>Field, M., Duka, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cues+paired+with+a+low+dose+of+alcohol+acquire+conditioned+incentive+properties+in+social+drinkers%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Cues paired with a low dose of alcohol acquire conditioned incentive properties in social drinkers.</a> Psychopharmacology (Berl). 159, 325-334 (2002).</li>
<li>Litt, M. D., Cooney, N. L., Morse, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reactivity+to+alcohol-related+stimuli+in+the+laboratory+and+in+the+field%3A+predictors+of+craving+in+treated+alcoholics%29%5BTitle%5D)+AND+%22Addiction%22%5BJournal%5D)">Reactivity to alcohol-related stimuli in the laboratory and in the field: predictors of craving in treated alcoholics).</a> Addiction. 95, 889-900 (2000).</li>
<li>Pomerleau, O. F., Fertig, J., Baker, L., Cooney, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reactivity+to+alcohol+cues+in+alcoholics+and+non-alcoholics%3A+implications+for+a+stimulus+control+analysis+of+drinking%5BTitle%5D)+AND+%22Addict+Behav%22%5BJournal%5D)">Reactivity to alcohol cues in alcoholics and non-alcoholics: implications for a stimulus control analysis of drinking.</a> Addict Behav. 8, 1-10 (1983).</li>
<li>Sinha, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+findings+on+biological+factors+predicting+addiction+relapse+vulnerability%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Psychiatry+Rep%22%5BJournal%5D)">New findings on biological factors predicting addiction relapse vulnerability.</a> Curr Psychiatry Rep. 13, 398-405 (2011).</li>
<li>Conklin, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Environments+as+cues+to+smoke%3A+implications+for+human+extinction-based+research+and+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Clin+Psychopharmacol%22%5BJournal%5D)">Environments as cues to smoke: implications for human extinction-based research and treatment.</a> Exp Clin Psychopharmacol. 14, 12-19 (2006).</li>
<li>Conklin, C. A., Robin, N., Perkins, K. A., Salkeld, R. P., McClernon, F. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proximal+versus+distal+cues+to+smoke%3A+the+effects+of+environments+on+smokers%27+cue-reactivity%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Clin+Psychopharmacol%22%5BJournal%5D)">Proximal versus distal cues to smoke: the effects of environments on smokers' cue-reactivity.</a> Exp Clin Psychopharmacol. 16, 207-214 (2008).</li>
<li>Janak, P. H., Chaudhri, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+potent+effect+of+environmental+context+on+relapse+to+alcohol-seeking+after+extinction%5BTitle%5D)+AND+%22Open+Addict+J%22%5BJournal%5D)">The potent effect of environmental context on relapse to alcohol-seeking after extinction.</a> Open Addict J. 3, 76-87 (2010).</li>
<li>Chaudhri, N., Sahuque, L. L., Cone, J. J., Janak, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reinstated+ethanol-seeking+in+rats+is+modulated+by+environmental+context+and+requires+the+nucleus+accumbens+core%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Reinstated ethanol-seeking in rats is modulated by environmental context and requires the nucleus accumbens core.</a> Eur J Neurosci. 28, 2288-2298 (2008).</li>
<li>Chaudhri, N., Sahuque, L. L., Janak, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Context-induced+relapse+of+conditioned+behavioral+responding+to+ethanol+cues+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Context-induced relapse of conditioned behavioral responding to ethanol cues in rats.</a> Biol Psychiatry. 64, 203-210 (2008).</li>
<li>Crombag, H. S., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Renewal+of+drug+seeking+by+contextual+cues+after+prolonged+extinction+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Renewal of drug seeking by contextual cues after prolonged extinction in rats.</a> Behav Neurosci. 116, 169-173 (2002).</li>
<li>Fuchs, R. A., Eaddy, J. L., Su, Z. I., Bell, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interactions+of+the+basolateral+amygdala+with+the+dorsal+hippocampus+and+dorsomedial+prefrontal+cortex+regulate+drug+context-induced+reinstatement+of+cocaine-seeking+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Interactions of the basolateral amygdala with the dorsal hippocampus and dorsomedial prefrontal cortex regulate drug context-induced reinstatement of cocaine-seeking in rats.</a> Eur J Neurosci. 26, 487-498 (2007).</li>
<li>Marchant, N. J., Hamlin, A. S., McNally, G. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lateral+hypothalamus+is+required+for+context-induced+reinstatement+of+extinguished+reward+seeking%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Lateral hypothalamus is required for context-induced reinstatement of extinguished reward seeking.</a> J Neurosci. 29, 1331-1342 (2009).</li>
<li>Zironi, I., Burattini, C., Aicardi, G., Janak, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Context+is+a+trigger+for+relapse+to+alcohol%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Context is a trigger for relapse to alcohol.</a> Behav Brain Res. 167, 150-155 (2006).</li>
<li>Sciascia, J. M., Mendoza, J., Chaudhri, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blocking+dopamine+D1-like+receptors+attenuates+context-induced+renewal+of+Pavlovian-conditioned+alcohol-seeking+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Alcohol+Clin+Exp+Res%22%5BJournal%5D)">Blocking dopamine D1-like receptors attenuates context-induced renewal of Pavlovian-conditioned alcohol-seeking in rats.</a> Alcohol Clin Exp Res. 38, 418-427 (2014).</li>
<li>Chaudhri, N., Woods, C. A., Sahuque, L. L., Gill, T. M., Janak, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unilateral+inactivation+of+the+basolateral+amygdala+attenuates+context-induced+renewal+of+Pavlovian-conditioned+alcohol-seeking%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Unilateral inactivation of the basolateral amygdala attenuates context-induced renewal of Pavlovian-conditioned alcohol-seeking.</a> Eur J Neurosci. 38, 2751-2761 (2013).</li>
<li>Chaudhri, N., Sahuque, L. L., Schairer, W. W., Janak, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Separable+roles+of+the+nucleus+accumbens+core+and+shell+in+context-+and+cue-induced+alcohol-seeking%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropsychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Separable roles of the nucleus accumbens core and shell in context- and cue-induced alcohol-seeking.</a> Neuropsychopharmacology. 35, 783-791 (2010).</li>
<li>Sparks, L. M., Sciascia, J. M., Ayorech, Z., Chaudhri, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vendor+differences+in+alcohol+consumption+and+the+contribution+of+dopamine+receptors+to+Pavlovian-conditioned+alcohol-seeking+in+Long-Evans+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Vendor differences in alcohol consumption and the contribution of dopamine receptors to Pavlovian-conditioned alcohol-seeking in Long-Evans rats.</a> Psychopharmacology (Berl). 231, 753-764 (2014).</li>
<li>Simms, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intermittent+access+to+20%25+ethanol+induces+high+ethanol+consumption+in+Long-Evans+and+Wistar+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Alcohol+Clin+Exp+Res%22%5BJournal%5D)">Intermittent access to 20% ethanol induces high ethanol consumption in Long-Evans and Wistar rats.</a> Alcohol Clin Exp Res. 32, 1816-1823 (2008).</li>
<li>Wise, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Voluntary+ethanol+intake+in+rats+following+exposure+to+ethanol+on+various+schedules%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacologia%22%5BJournal%5D)">Voluntary ethanol intake in rats following exposure to ethanol on various schedules.</a> Psychopharmacologia. 29, 203-210 (1973).</li>
<li>Bouton, M. E., Westbrook, R. F., Corcoran, K. A., Maren, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contextual+and+temporal+modulation+of+extinction%3A+behavioral+and+biological+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Contextual and temporal modulation of extinction: behavioral and biological mechanisms.</a> Biol Psychiatry. 60, 352-360 (2006).</li>
<li>Pavlov, I. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPavlov%2C+I+%22Conditioned+reflexes%3A+an+investigation+of+the+physiological+activity+of+the+cerebral+cortex%22">Conditioned reflexes: an investigation of the physiological activity of the cerebral cortex</a>. , Oxford University Press. Oxford, England. (1927).</li>
<li>Gibbon, J., Baldock, M. D., Locurto, C., Gold, L., Terrace, H. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trial+and+intertrial+durations+in+autoshaping%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Psychol+Anim+Behav+Process%22%5BJournal%5D)">Trial and intertrial durations in autoshaping.</a> J Exp Psychol Anim Behav Process. 3, 264-284 (1977).</li>
<li>Holland, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CS-US+interval+as+a+determinant+of+the+form+of+Pavlovian+appetitive+conditioned+responses%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Psychol+Anim+Behav+Process%22%5BJournal%5D)">CS-US interval as a determinant of the form of Pavlovian appetitive conditioned responses.</a> J Exp Psychol Anim Behav Process. 6, 155-174 (1980).</li>
<li>Stein, L., Sidman, M., Brady, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Some+effects+of+two+temporal+variables+on+conditioned+suppression%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Anal+Behav%22%5BJournal%5D)">Some effects of two temporal variables on conditioned suppression.</a> J Exp Anal Behav. 1, 153-162 (1958).</li>
<li>Coleman, D. A., Hemmes, N. S., Brown, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relative+durations+of+conditioned+stimulus+and+intertrial+interval+in+conditioned+suppression%5BTitle%5D)+AND+%22J+Exp+Anal+Behav%22%5BJournal%5D)">Relative durations of conditioned stimulus and intertrial interval in conditioned suppression.</a> J Exp Anal Behav. 46, 51-66 (1986).</li>
<li>Schwarz-Stevens, K. S., Cunningham, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pavlovian+conditioning+of+heart+rate+and+body+temperature+with+morphine%3A+effects+of+CS+duration%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Pavlovian conditioning of heart rate and body temperature with morphine: effects of CS duration.</a> Behav Neurosci. 107, 1039-1048 (1993).</li>
<li>Palm, S., Roman, E., Nylander, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differences+in+voluntary+ethanol+consumption+in+Wistar+rats+from+five+different+suppliers%5BTitle%5D)+AND+%22Alcohol%22%5BJournal%5D)">Differences in voluntary ethanol consumption in Wistar rats from five different suppliers.</a> Alcohol. 45, 607-614 (2011).</li>
<li>Gauvin, D. V., Moore, K. R., Holloway, F. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Do+rat+strain+differences+in+ethanol+consumption+reflect+differences+in+ethanol+sensitivity+or+the+preparedness+to+learn%5BTitle%5D)+AND+%22Alcohol%22%5BJournal%5D)">Do rat strain differences in ethanol consumption reflect differences in ethanol sensitivity or the preparedness to learn.</a> Alcohol. 10, 37-43 (1993).</li>
<li>Goodwin, F. L., Amit, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relative+taste+thresholds+for+ethanol%2C+saccharin%2C+and+quinine+solutions+in+three+strains+of+rats+nonselected+for+ethanol%3A+a+comparative+study%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Clin+Psychopharmacol%22%5BJournal%5D)">Relative taste thresholds for ethanol, saccharin, and quinine solutions in three strains of rats nonselected for ethanol: a comparative study.</a> Exp Clin Psychopharmacol. 8, 216-224 (2000).</li>
<li>Goodwin, F. L., Bergeron, N., Amit, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differences+in+the+consumption+of+ethanol+and+flavored+solutions+in+three+strains+of+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Biochem+Behav%22%5BJournal%5D)">Differences in the consumption of ethanol and flavored solutions in three strains of rats.</a> Pharmacol Biochem Behav. 65, 357-362 (2000).</li>
<li>Wilson, A. W., Neill, J. C., Costall, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strain+differences+in+ethanol+preference+and+reinforced+behaviour%3A+a+comparison+of+two-bottle+choice+and+operant+self-administration+paradigms%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Strain differences in ethanol preference and reinforced behaviour: a comparison of two-bottle choice and operant self-administration paradigms.</a> Behav Pharmacol. 8, 37-46 (1997).</li>
<li>Yap, C. S., Richardson, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extinction+in+the+developing+rat%3A+an+examination+of+renewal+effects%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Psychobiol%22%5BJournal%5D)">Extinction in the developing rat: an examination of renewal effects.</a> Dev Psychobiol. 49, 565-575 (2007).</li>
<li>Carew, M. B., Rudy, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiple+functions+of+context+during+conditioning%3A+a+developmental+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Psychobiol%22%5BJournal%5D)">Multiple functions of context during conditioning: a developmental analysis.</a> Dev Psychobiol. 24, 191-209 (1991).</li>
<li>Chaudhri, N., Sahuque, L. L., Janak, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ethanol+seeking+triggered+by+environmental+context+is+attenuated+by+blocking+dopamine+D1+receptors+in+the+nucleus+accumbens+core+and+shell+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Ethanol seeking triggered by environmental context is attenuated by blocking dopamine D1 receptors in the nucleus accumbens core and shell in rats.</a> Psychopharmacology (Berl). 207, 303-314 (2009).</li>
</ol>

全ての実験手順はコンコルディア大学動物実験倫理委員会によって承認され、動物ケアカナダ評議会からのガイドラインに従っている。 この記事のオープンアクセス出版物は、メッドアソシエーツ社からのスポンサーシップによって可能になりましたし、

この手順の結果は、日常的にアルコールの配信に伴う個別の環境刺激がアルコールを求める行動を駆動する能力を獲得することができることを明らかにした。彼らはまた、アルコールの前可用性または不在に関連するコンテキスト刺激は離散アルコール予測手がかりに調整行動応答を誘導できることを示す。 プロトコルの中の重要なステップ現在のタスクのコンテキストは、ラットの外部にある刺激を組み込む。しかし、試験でのラットの内受容状態もリニューアル20に影響を与える可能性が 「コンテキスト」を構成することができる。これは、頭蓋内microinfusionsまたは全身注射のように、更新試験前に発生し、その内受容状態を変更する可能性のある手順をラットを慣らすことが重要である。また、microinfusionsまたは全身注射に対する慣れが絶滅し、PDTの両方の前に実施すべきであるessionsは、実験の特定の一相に関連付けなるのような手順を防止する。 このようなCS期間、CS-US間隔、および試行間間隔（ITI）のような時間的なパラメータは、長いコンディショニングパラダイム21-26の多様な応答を条件付けに影響を及ぼすことが知られている。同様に、時間的なパラメータは、私たちの手順で更新効果の観察に影響を及ぼし得る。プロトコールに記載された以外の他のパラメータの任意のセットは、実験的に、より大きな調査でそれらを使用することが進む前に、パイロット研究で検証する必要があります。 修正とトラブルシューティング以前の研究では、ラットはホームケージに消費するエタノールの量はラット17,27購入されるサプライヤの関数として変化することを見出した。サプライヤーは、そのための研究のこの段階のための重要な検討事項である。同様に、ラット系統の選択は、共存する必要がありますエタノール消費28-31における系統差の多数の報告がありますので、慎重にnsidered。 嫌悪条件付けパラダイムにおける以前の研究は、ラットの発達年齢はパブロフの条件付け恐怖反応32の更新の観察に影響を与えることが示されている。非常に若いラット（生後20日未満）で更新効果の欠如は、文脈情報33の障害エンコーディングに起因することが示唆されている。本手順で使用されるラットの発育年齢、したがって考慮されるべきである。 10％9,16、15％14、又は20〜15％エタノール溶液をホームケージエタノールアクセスおよび実験のPDT段階の間に使用されたときにパブロフの条件付けのアルコール探索行動の更新が観察されている。研究者は彼らの研究所では、この手順を確立する目的で、エタノールのこれらの濃度のいずれかを使用することができますIES。 パブロフの弁別訓練の取得中にそれが配信されたすべてのエタノールが消費されていることを確認するために、各セッションの後に流体ポートを確認することが重要です。さらに10のためのコンディショニング室のラットを残して - 各セッションの後に15分のセッションの間に消費されなかったエタノールの消費を奨励するために、早期のPDTで行うことができる。 PDTが進行すると、ポートで消費されていないエタノールを残したラットの数は減少するはずである。 PDTラットの終わりまでには、（a）すべてのエタノールを消費していないおよび/または（b）CS +に応答しない場合、これらの被験者が試験からドロップされるべきである。ほとんどのラットは確実にCS-よりCS +に多くを応答します。しかし、一部のラットは、それによって差別の証拠を示さない、両方の合図に高いレベルで応答することができる。高いPDT中に、CS +とCS-の両方に対応し、SHOWラットは研究から削除されません。私たちの経験では、これらの被験者は著しい差別​​を示しているPDT中にCS-に応答するそれらの高レベルが流体ポートにおけるエタノールの存在によって駆動されていることを示唆し、エタノールの非存在下での最初の絶滅セッション中。これらの被験体はまた、堅牢な更新の効果を示す傾向がある。 手順の制限更新テストをエタノール非存在下で実施されるので、CS +によって誘発馴化ポートエントリが次第に試験セッションにわたって減少する。したがって、実験的に誘導された変化を評価することができ、それに対してテストで生成された行動の全体的な量は、かなり低い。応答このタスクにテストセッションの最後に対して、開始時に高くなる傾向があるので、トライアル·バイ·トライアルごとに応答馴化上の実験操作の効果を調べることが重要です。 流体レセプタクルにエントリは、このタスクの主な依存尺度を提供する。しかし、誤ったポートのエントリは、レジかもしれません動物がそのウィスカーと流体ポートの開口部を横切って赤外線ビームを破る流体容器に十分に近い場合stered。不定期ながら、誤った応答が前のセッションでの被験者の行動と比較して、総ポートエントリの劇的な増加として明らかである。動物をビデオテープに録画することは誤応答の検出を容易にし、トレーニングとテストを通して、ラットが示す行動のより洗練された分析を可能にするであろう。 既存/代替方法に関する技術の意義薬物探索行動の文脈によって誘発される更新は、主に一次従属変数は、レバーを押し8,34または鼻12を突くようなオペラント反応、であるインストゥルメンタルコンディショニングタスクを使用して研究されている。現在の手順では、薬物探索応答はのプレゼンテーションによって誘発される流体ポートに「エアコンのアプローチは &#39;CS +。この応答は、おそらく環境刺激およびヒトにおける乱用薬物の薬理学的効果との間の関連付けの形成を媒介する学習過程でパブロフの学習を通じて獲得される。 将来の応用このタスクは、optogeneticsと神経化学はパブロフ付きアルコール探索行動16の文脈によって誘発される更新に関与する神経機構を研究するために、神経薬と組み合わせて使用することができる。また、パブロフ付きアルコール探索行動の獲得と絶滅を規制する行動および神経機構を調査することができる。最後に、このタスクは、人間のaddi内のキュー暴露療法後に薬の予測合図に反応性の環境のコンテキストを関連付け、薬物の影響を減少させることを目的とトランスレーショナルリサーチのための重要な方向性を更新できない場合があり、絶滅の操作を探索するために使用することができますカラット。

冷静に残ったアルコール乱用障害を患っている個体が直面するかなりの挑戦である。禁欲は、パブロフの条件を通じて、酩酊1,2に関連付けられているになることが日常的にアルコール使用に伴う環境刺激の、行動心理的、生理的な影響への脆弱性の時間です。アルコール予測合図への曝露は、再発3,4を容易にアルコール探索行動を促進することができるような、アルコールへの渇望のようなコンディショニング応答を惹起することができる。 アルコール消費につながる行動のステレオタイプの配列は、刺激の特定の種類が日常的アルコール摂取の薬理作用の直前に経験されることがあります。例えば、アルコールの姿、香りと味が確実に中毒に先行アルコールの感覚特性である。 「離散」または「PROXIMAと呼ばれるそのような合図に加えて、l &#39;の合図、薬を定期的に使用される環境のコンテキストはまた渇望5,6を引き起こすことができます。薬物は、以前に使用されてきた物理ロケーションへの曝露は、したがって再発7の臨界トリガすることができる。 動物モデルは、薬物探索行動8-13に対する薬物関連するコンテキストの影響を媒介する神経機構を研究するために開発されてきた。明細書に記載の手順では、アルコール消費に関連したコンテキストは、離散、アルコール予測パブロフの合図によって誘発されるアルコールを求める行動を調節することができる方法を検討することができます。 パブロフの弁別訓練は、ラットが行動2聴覚条件刺激、アルコールと対になっているCS +、およびでないCS-を区別するために訓練されている特定の環境のコンテキスト内で行われる。消去セッションは、その後CSに応答する別のコンテキストで行われており、+が源泉徴収されているアルコールの結果として減少する。その後、アルコールに関連する、パブロフの訓練コンテキストへの再曝露はCS-への対応に変化がないと、CS +によって誘発されたアルコール探索行動の選択的増加をトリガします。私たちは一貫して9,14-16を複製して、この結果は、薬物コンテキストは、薬物送達10,13に関連したオペラント反応の再生を刺激することが見出されているいるインストゥルメンタルコンディショニングプロシージャからの調査結果を拡張します。

<table><tbody><tr><td>ヘビーデューティユーティリティカート</td><td>ラバーメイド</td><td>#4520-88</td>コロ<td>ニールームから行動室や他の施設に自宅のケージでラットを輸送するために使用される</td></tr><tr><td>、ロングエバンス</td><td>ハーラン</td><td></td><td>ラットは到着時に220-240グラムの重量を量った</td></tr><tr><td>オーハウススケール</td><td>フィッシャー</td> <td>#S402421</td><td>ラットの計量のために、最初にプラスチック容器の底を風袋引きし、次にそれにラットを入れて計量する</td></tr><tr><td>ベータチップ、 アスペン</td><td>ハーラン</td> <td>#7090A</td><td>ホームケージ</td></tr><tr><td>Nylabone</td><td>バイオサーブ</td><td>のための</td>寝具 <td>#K3580 ホームケージで提供される濃縮オート</td></tr><tr><td>クレーブ可能なげっ歯類のチャウ</td><td>Agribrands、チャールズリバー</td><td>#5075</td>ネ<td>ズミに餌をやるための</td></tr><tr><td>ワイヤーバーケージの蓋</td><td>Ancare</td> <td>#R20SS2B</td><td>2つのスロットで作られたカスタム&nbsp;ボトル</td></tr><tr><td>ケージボトム</td><td>Ancare</td> <td>#R20PC</td><td>ネズミを飼う</td></tr><tr><td>ストッパーAncare</td><td></td><td>#8.5</td><td>ウォーターボトル&メスシリンダーの開口部を閉塞するゴムストッパー;ボールポイントシッパーチューブと一緒に行きます&nbsp;</td></tr><tr><td>ボールポイントチューブ、長さ1.5インチ、</td><td>Ancare</td> <td>#TD-99</td><td>ストッパーに挿入され、ラットが水筒やメスシリンダーから飲むことができます</td></tr><tr><td>水筒</td><td>Ancare</td> <td>#FSPC8HT</td><td>473 ml (16オンス)容量、ストッパーで閉塞する必要があります</td></tr><tr><td>メスシリンダー、100 ml</td><td>フィッシャー</td><td>#0300741</td><td>ホームケージ内のアルコール曝露中にエタノールを封じ込める。ストッパーで閉塞を可能にするために、注ぎ口の端を切断する必要があります</td></tr><tr><td>メトラースケール</td><td>メトラー・トレド</td> <td>#MS6001S</td><td>水筒とエタノールボンベの計量用</td></tr><tr><td>ポリエチレンチューブ、内径1/32インチ、&nbsp; 1/32インチ肉厚、外径3/32インチ</td><td>フィッシャー</td><td>#14-169-1A</td><td>20mlのエタノールシリンジを流体ポートに接続するには</td></tr><tr><td>ニードル、18g、長さ1.5インチ</td><td>フィッシャー</td><td>#B305199</td><td>エタノールシリンジにポリエチレンチューブを接続するには、</td></tr>シ<tr><td>リンジ、20 ml、Luer-Lok非滅菌</td><td>フィッシャー</td> <td>#1482316J</td><td>流体ポンプにエタノールを封じ込めるために、18 G 1 1/2ニードル</td></tr><tr><td>シリンジ、60ミリリットル、Luer-Lok非滅菌</td><td>フィッシャー</td><td>#14-820-11</td><td>PDTセッション後にポリエチレンチューブをフラッシュするには</td></tr><tr><td>、 シングルスピードシリンジポンプ、 3.33 rpm</td><td>メッドアソシエイツ株式会社</td><td>#ENV-018MD</td><td>20mlのエタノールシリンジを保持し、エタノールを配送する</td></tr><tr><td>Fluid port</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#ENV-254-CB</td><td>PDTセッション中にエタノール送達を可能にするために、ポリエチレンチューブ付きエタノールシリンジに接続</td></tr><tr><td>ポートエントリー赤外線検出器</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#ENV-215M</td><td>流体ポートの両側に固定; 流体ポートごとに 2 個必要</td></tr><tr><td>ハウスライト、28 V、100 mA</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#ENV-135M</td><td>コンディショニングチャンバーに一般的な照明を提供</td></tr><tr><td>クリッカーモジュール</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#ENV-225SM</td><td>コンディショニングチャンバー用聴覚刺激</td></tr><tr><td>スピーカー付きホワイトノイズ発生器</td><td>株式会社メッドアソシエイツ</td><td>#PHM-100</td><td>コンディショニングチャンバーの聴覚刺激</td></tr><tr><td>Bar floor</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#ENV-009A-GF</td><td>モジュラーテストチャンバー</td></tr><tr><td>ベンチコート、吸収剤</td><td>VWR</td><td>#89126-790</td><td>金属トレイに入れる吸収紙は、金属トレイに合うようにカットする必要があります</td></tr><tr><td>ポリカーボネートシート、厚さ 1/8"、厚さ 12-5/8" x 10"</td> <td>ジョンストンプラスチック</td><td>#30102515</td><td>コンテキスト 1 に使用される滑らかな透明なフロアインサートを作るため。11.5インチ x 12.25インチにカットする必要があります</td></tr><tr><td>アルミシート 穴あき、厚さ0.063インチ、厚さ48インチ x 96インチ、0.250インチ 穴 x 0.375インチ センター</td><td>アニカスチール</td><td></td><td>コンテキスト2に使用される穴あきフロアインサートを作るため。11.5 "x 12.25 "部分の</td></tr><tr><td>黒いボール紙、0.053 "厚い、28 " x 44 "</td><td>Omer DeSerres</td> <td>#P1909</td><td>文脈1のコンディショニングチャンバーの天井、ドア、後壁を覆うパネルを構築する必要があります。サイズに合わせてカットする必要があります。各チャンバーには、約11.5インチ×13.25インチのパネルが3枚必要です。パネルは、ダクトテープを使用して狭い面で接合できます。</td></tr><tr><td>万能強度ダクトテープ、1.88インチ x 45ヤード</td><td>ダックテープ</td><td></td><td>コンテキスト1で後壁、天井、ドアを覆うために使用される黒い段ボールパネルを接続するための接着剤。</td></tr><tr><td>モジュール式テストチャンバー</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#ENV-009A</td><td>コンディショニングチャンバー</td></tr><tr><td>防音キュービクル</td><td>メッド・アソシエイツ</td><td>#ENV-200R3AM</td>は、臭気刺激を提供するスプレー溶液を封じ込めるために、<td>インストールされた28 V DCファン(#ENV-025F)</td></tr><tr><td>ペトリ皿</td><td>フィッシャー</td> <td>#08748B</td><td>底のみが付属しています。コンディショニング</td></tr><tr><td>チャンバーPCIインターフェースパッケージ</td>メ<td>ッドアソシエイツ株式会社</td>の金属トレイに中央に配置する必要があります。<td>#DIG-700P2-R2</td><td>卓上インターフェースキャビネットをコンピュータに接続。インターフェースカード 1 枚、デコードカード 1 枚、リボンケーブル 1 本、28 V DC 電源ケーブル</td></tr> 1 本を含む <tr><td>大型卓上キャビネットと電源</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#SG-6510D</td><td>SmartCrtrl 8入力、16出力パッケージ</td></tr><tr><td>SmartCtrl 8入力、16出力パッケージに含まれる12</td>枚のカードが含まれていました<td>。</td><td>#DIG-716P2</td><td>コンディショニングチャンバー内のデバイスを接続して制御するために使用されます。パッケージには、すべてのケーブル、インターフェースモジュール、および接続パネルが含まれています。</td></tr><tr><td>Med PC IVソフトウェア</td><td>Med Associates Inc.</td><td>#SOF-735</td><td>プログラムを実行するためのソフトウェア。コンピューターにインストールする必要があります。</td></tr><tr><td>モニターLG、19インチLCD</td><td>コンコルディアコンピュータストア</td> <td>#W1942TQ - BF</td><td>コンピュータモニタ;Med PC IV</td></tr><tr><td>HP Z200タワーワークステーション</td><td>Concordiaコンピュータストア</td><td></td>を実行しているコンピュータと一緒に行くために <td>#BZ788US#ABA Med PC IVが実行されているコンピュータ</td></tr>ベン<tr><td>ズアルデヒド、&ge;99%</td><td>Les produits chimiques オメガケミカル株式会社</td><td>#B37-50</td><td>アーモンドのコンテキスト臭のために水道水で希釈する</td></tr><tr><td>レモンオイル、コールドプレス、カリフォルニア</td><td>シグマ アルドリッチ</td> <td>#W262528-1KG-K</td><td>水道水で希釈してレモンコンテキスト臭</td></tr><tr><td>エチルアルコール、95%</td><td>市販アルコール</td><td></td><td>水道水で希望の濃度に希釈します</td></tr></tbody></table>

ラットにおけるパブロフ付きアルコール探索行動の状況誘発性のリニューアルを観察する手順

A Procedure to Observe Context-induced Renewal of Pavlovian-conditioned Alcohol-seeking Behavior in Rats

乱用薬物が消費されている環境のコンテキストは、渇望、禁欲薬物使用者に薬物探索行動と迅速な再発を容易にすることができる、主観パブロフ付き応答をトリガすることができます。私たちは、ラットにおいて、アルコール探索行動のコンテキストの影響を仲介する行動および神経プロセスを研究するための手順を開発した。味とホームケージ15％エタノールの薬理作用に順化の後、オスLong-Evansラットは、コンディショニング室でパブロフの弁別訓練（PDT）を受け取る。各毎日（月〜金）のPDTセッションでは、16試験は二つの異なる10秒の聴覚条件刺激のそれぞれが発生する。つの刺激の間、CS +は、15％エタノール0.2mlを経口消費のための流体ポートに送達される。第2の刺激、CS-は、エタノールとペアにされていません。セッション間で、CS-中のエントリに対し、CS +上昇中の流体ポートにエントリが、prediことを示す、より低いレベルで安定CS +とエタノールctive関連付けが取得される。 PDTの間、各チャンバは、視覚的な嗅覚と触覚文脈刺激の具体的な構成を備えています。 PDTの後、吸光訓練は現在文脈刺激の別の構成を備えている同一のチャンバ内で行われる。 CS +とCS-は以前のように提示されているが、エタノールはCS +の間のポートエントリの緩やかな減少を引き起こす、源泉徴収されている。試験では、ラットをPDTコンテキストに戻されており、以前とCS +とCS-を提示するが、エタノールなしで。この操作はCS-中に応答を変えることなく、アルコール予測CS +中に行われたポートのエントリ数の堅牢かつ選択的増加をトリガします。文脈によって誘発される更新と呼ばれるこの効果は、パブロフのアルコール合図に応答して、アルコール探索行動を刺激するために、アルコール消費に関連付けられたコンテキストの強力な能力を示している。

ホームケージでの断続的なエタノールへのアクセス： - 12セッション（ 図1）エタノール消費量（g / kg体重）とホームケージでの断続的なエタノールへのアクセスのセッション間でエタノールの嗜好の増加は、典型的には8で安定レベルに達する。 図1に示したデータセットでは、安定したエタノール消費は、ホームケージエタノールへのアクセスの最後の二つのセッションにわたって平均1.33の範囲であった-個別のラット6.44 g / kg体重を。 g / kg体重消費が頭打ち一旦実験のホームケージエタノール消費相が停止することができ、かつラットはセッション数のために、飲料のこの安定したレベルに維持される。 このフェーズからのデータを分析するには、エタノール消費量（g / kg体重）とエタノールの好みのセッションの被験者内要因渡っ分散分析（ANOVA）の独立した反復測定分析を行う。 文脈によって誘導される更新手順の概略：それぞれの相実験手順（PDT、絶滅、リニューアルテスト）は、 図2に示されている。詳細については、図のキャプションを参照してください。 レスポンス対策やデータ分析は：以下のすべての行動の段階では、CS +とCS-中に行われたポートのエントリの応答は、事前に、CSベースライン入港応答を参照して、正規化されている。正規化されたCS対策を作成するには、事前のCSベースライン間隔の間に作られたポートのエントリ数CS +とCS-のプレゼンテーション中に行われたポートのエントリ数から（CS発症の直前に10秒）を差し引く。行動の指標は、ベースラインレベルを超えて上昇し、CSのプレゼンテーション、によって特異的に誘発されるように正規化されたCS +と規格化CS-対策が機能します。 独立した反復測定ANOVAは、PDTと吸光フェーズのセッションとCS型（CS-対CS +）の繰り返しの被験者内因子を実施する。相間での比較のために（PDTは、絶滅、更新らテスト）、使用データは、PDTと消光と反復測定分散分析において更新テストデータの一つのセッションの最後の2セッション間で平均した。有意な主効果と交互作用をフォローアップするためには、多重比較のために補正されている独立した、または対のサンプルのための事後 t検定を使用しています。有意性についての基準は、α= 0.05に設定されている。 PDT：PDTセッション間CS +増加にポートエントリー応答は、CS-ポートエントリー応答は全体的に、低く安定したままである。 CS-に入港応答はPDTのトレーニングの初期のセッションでわずかに増加することに注意してください。しかしながら、CS-に応答して行わポートエントリはCS +に応答して作られたものよりもはるかに低いレベルで安定する。成功した差別は、CS-（ 図3）と比較して、CS +の間のポートエントリの統計学的に有意な上昇によって証明される。この結果は、パブロフ付きアルコール探索行動があることしたことを示すCS- CS +に設立さではなく、専用。 絶滅：CS +にポートエントリ応答が次第に消去セッション全体で下落。 CS-に入港応答は消去セッション全体で低く、安定した状態を保つ。理想的には、CS +とCS-のポートエントリの間に統計的に有意な差がないことによって証明されるように、絶滅の訓練の終わりまでに廃止され、応答が判別。しかし、それも絶滅の訓練の終了時に、残る応答差別ある程度のは珍しいことではありません。この場合には、絶滅のトレーニング、絶滅の開始時にCS +ポートエントリ応答よりも統計的に低くなっているだけでなく、PDTの終了時の終わりにCS +への入港応答を確認することが重要である（ 図3） 。結果のこのパターンは、パブロフ付きアルコール探索行動が大幅に消滅したことを示しています。 コンテキストによって誘発される更新テスト：ポート絶滅のトレーニングの最後に観察されたCS +ポートのエントリを基準に文脈によって誘発される更新試験におけるCS +の増加へのエントリー応答、。 CS-ポート·エントリが変更されないまま、この増加は、CS +に選択的である。また、CS +へのポートのエントリは、コンテキストによって誘発される更新試験でCS-にポートエントリ（ 図4）と比較して統計的に上昇している。 CS +ポート絶滅とテストの間のエントリだけでなく、テスト内で、CS +とCS-ポートエントリの比較の比較の統計的確認は、テストでのアルコール関連するコンテキストによって誘導されたパブロフ付きアルコール探索行動の選択的更新を示しています。 <img alt="図1" fo:content-width="4in" src="/files/ftp_upload/51898/51898fig1highres.jpg" width="400"> 平均。ホームケージでの断続的なエタノールのアクセスによって誘導されたエタノール消費や好みの1エスカレーション図 ＆＃177;ホームケージでの断続的なエタノールへのアクセスの12セッション間でSEM（A）エタノール消費量（g / kg体重）と（B）エタノールの好み。両方の手段は、典型的には、セッション間で増加し、その後安定する。個別のラット6.44 g / kg体重 - 安定エタノール消費は1.33の範囲であったホームケージエタノールへのアクセスの最後の2セッション間で平均した。これらのデータは、15％（v / v）エタノールを飲んオスLong-Evansラットを使用して得た。 <img alt="図2" fo:content-width="4in" src="/files/ftp_upload/51898/51898fig2highres.jpg" width="400"> 。図2実験手順の概略手順は、次の3つのフェーズで構成されています。パブロフの弁別訓練（PDT）、絶滅、コンテキストによって誘発される更新テスト。各PDTセッション中、ラットは、エタノールと16試験の配信を知らせる1聴覚条件刺激（CS +）の16試験を受けるエタノールの配信に関連付けられていない第2の聴覚刺激（CS-）。 PDTセッションは、視覚、嗅覚の具体的な構成、および触覚刺激からなる、コンテキストAで行われる。視覚、嗅覚、および触覚刺激の異なるセットで構成コンテキストBで行われる消去セッション、、中に、CS +とCS-が提示されているが、エタノールが源泉徴収されている。文脈によって誘発される更新試験では、ラットをコンテキストAに戻り、CS +とCS-エタノールなしで提示されている。 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/51898/51898fig2highres.jpg" target="_blank">この図の拡大版をご覧になるにはこちらをクリックしてください。</a> <img alt="図3" fo:content-width="4in" src="/files/ftp_upload/51898/51898fig3highres.jpg" width="400"> 図3の取得と差別パブロフ付きエタノール応答。平均±SEM正規化されたポートエントリm の絶滅コンテキストAおよび絶滅（セッション19から26） - PDT全体でCS +とCS-の間に（18セッション1）ADEコンテキストBにこれらのデータは、10％で訓練を受けた、雄のLong-Evansラットを用いて得た（V / V） PDTの間、CS +に関連して提示された無条件刺激（US）エタノール。 * P &lt;0.05、CS-対CS +。図は、もともとChaudhri、Sahuque＆ヤナーク（2008）で発表した。エルゼビアから許可を得て使用。 <img alt="図4" fo:content-width="5in" src="/files/ftp_upload/51898/51898fig4highres.jpg" width="500"> パブロフ付きエタノール応答を図4。文脈によって誘発されるリニューアル。コンテキストA.データにコンテキストAにおけるPDTセッションでCS +とCS-中に行われた±SEM正規化されたポートのエントリ、コンテキストBでの消去セッション、および更新テストの平均であるPDTと絶滅のための最後の二つのセッションで平均化;更新試験は、単一のセッションです。これらのデータは、PDTの間にCS +に関連して提示された無条件刺激（US）10％（v / v）エタノールで訓練オスLong-Evansラットを使用して得た。 *はp &lt;0.05; ** P &lt;0.001、CS-対CS +。 #P &lt;0.05、CS +の絶滅に対するCS + PDT。 ^ P &lt;0.05、CS +テスト対CS +の絶滅。図は、もともとChaudhri、Sahuque＆ヤナーク（2008）で発表した。エルゼビアから許可を得て使用。

ラットにおけるアルコール探索行動の更新をトリガするために環境的文脈を関連付けアルコールの能力を研究するための手順が記載されている。

Environmental contexts in which drugs of abuse are consumed can trigger craving, a subjective Pavlovian-conditioned response that can facilitate ...

この手順では、アルコールに関連するコンテキストがパブロフのアルコール探索行動の更新を引き起こす能力を調べます。これは、最初にエタノール経験ラットを2つのユニークな状況に構成されたコンディショニングチャンバーに慣れさせることによって達成されます。手順の2番目のステップは、2つの異なる聴覚の手がかりがアルコールの利用可能性またはアルコールの欠如を示す1つのコンテキストでパブロフ識別トレーニングセッションを実施することです。3つ目のステップは、絶滅訓練を行うことです。両方の聴覚の手がかりがアルコールなしで提示される2番目のコンテキストでは、最後のステップは、ラットを元のトレーニングコンテキストに戻し、アルコールなしで両方の聴覚の手がかりを提示することです。この操作は、以前はアルコールに関連付けられていた聴覚の合図によって引き起こされるアルコール探索行動の更新を引き起こします。この手法の主な利点は、器械的条件付けなどの既存の手順よりも優れている点として、アルコールを予測するパブロフの手がかりによって誘発されるアルコール探索行動の動物モデルを提供することです。この方法は、アルコールに関連するコンテキストが再発を引き起こすなど、依存症分野の重要な質問に答えるのに役立ちますトレーニングの前に、ラットをテストルームに慣れさせ、彼らが経験する2つの環境コンテキストにします。ラットを動物飼育施設から試験室まで常に一貫した方法で輸送してください。最初のセッションでは、24時間後に部屋の照明を点灯させ、防音キュービクルのファンをオンにした状態で、ラットを試験室に20分間放置します。最初の慣れセッションと同様に2回目の慣れセッションを行いますが、次に各ラットの体重を量り、取り扱います。3回目のセッションは24時間後に実施します。このためには、視覚嗅覚刺激と触覚刺激の2つの特徴的な組み合わせのいずれかで各コンディショニングチャンバーを設定します。一貫したコンテキストを提供するためには、嗅覚刺激は各チャンバーに追加される最後のコンテキスト刺激である必要があります。異なる嗅覚刺激の混ざり合いを最小限に抑えるために、チャンバーのドアと各チャンバーが収容されている音響減衰キュービクルを閉じます。3回目のセッションで嗅覚刺激を適用した直後に、各ラットの体重を量り、コンディショニングチャンバーに20分間入れます。ラットの半分は1つのコンテキストを経験する必要があり、残りの半分はコンテキストを経験する必要があります。2つ目は、ラットとそのチャンバーとの間の一貫性に対する重要なニーズを維持するために、ラットに特定のチャンバーを識別する番号をマークすると便利です。すべてのネズミが部屋に置かれてから1分後、部屋の家の光を照らします 20分間で、ネズミが行ったすべての流体ポートエントリを記録します。その後、照明を消し、ネズミを降ろして、世話施設に戻します。同じ日の後半に、条件付けチャンバーの文脈が逆転する3回目のセッションとほぼ同じ4回目の慣れセッションを実施します。最後に、毎回のセッションの後、コンディショニングチャンバーの廃棄物トレイと床パネル、および嗅覚の文脈刺激が適用されたペトリ皿を常に洗ってください。毎週、無香料の洗浄液のみを使用してください。このトレーニングのためにチャンバー全体を清掃します。ラットを2つのグループに分け、最後の2回のエタノールアクセスセッションで平均エタノール摂取量が同じです。1つのグループはコンテキストでトレーニングされ、1つのグループはコンテキストでトレーニングされ、もう1つのグループはコンテキストでトレーニングされます。2。パブロフ弁別訓練に使用されるコンテクストは、コンテクストAと呼ばれ、これらのセッション中に、ラットはエタノールと対になったものとそうでないものの2つの異なる聴覚手がかりを区別することを学びます。したがって、最初のステップは、エタノールで20ミリリットルの注射器を準備することです。液剤ポートについては、液剤ポートの背面から装填されたシリンジにチューブを接続します。鈍い針を使用して、各シリンジを音減衰キュービクルの外側にある独自のポンプにロードします。次に、ポンプを手動で前進させてチューブをプライミングし、液体ポートから余分なエタノールを拭き取ります。次に、ラットを実験室の試験室に連れて行きます。慣れるときと同様に、割り当てられたコンディショニングチャンバーに入れる前に、各ラットの体重を量ります。各チャンバー内のコンテキスト構成を再確認し、正しいラットを正しいチャンバーにロードするようにしてください。間違ったコンテキストや間違ったCS plusにさらされたラットは、研究から外さなければならないかもしれません。すべてのラットの体重を量り、負荷をかけたら、トレーニングセッションのイベントを制御するコンピュータープログラムを開始します。プログラムが始まって5分後、各セッションで各チャンバーのハウスライトが点灯し、ホワイトノイズが16、10秒、クリックノイズが16、10秒のバーストが提示されます。各ラットについて、これらの聴覚刺激の1つをエタノールに指定し、Csの最後の6秒間に2つの条件付けコンテキストでこれらの指定を相殺し、さらに、ポンプは0.2ミリリットルのエタノールを流体ポートに供給します。1時間のセッションを行うために、変動時間67秒のスケジュールで刺激を設定します。すべての流体ポートエントリは、Csの10秒前、Cs中、およびcsの10秒後から開始します。また、パブロフ弁別トレーニングセッション全体で行われた流体ポートエントリの総数を記録します。セッションが終了したら、家の電気を消し、ネズミをコンディショニングチャンバー内の動物飼育施設に戻します。液体ポートをチェックして、ラットがセッション中に供給された3.2ミリリットルのエタノールを消費したことを確認します。ラットがチャンバーから移動した後、液体ポートをチェックして、エタノールを消費していないラットがエタノールを消費していることを確認し、CSプラス中にポートエントリのレベルが低い場合は、研究からドロップする必要があるかもしれません。通常どおりコンディショニングチャンバーを清掃します。最初にチューブを水で洗い流し、次に空の60ミリリットルの注射器を使用して空気を通して、チューブを清掃します。ラットがポートエントリーレスポンスで示されるように2つの聴覚刺激を区別するまで、セッションを毎日繰り返します。CS plusへのポートエントリの選択的な増加は、16〜20セッション以内に安定することが予想されます。絶滅セッション用。すべてのラットのコンディショニングチャンバーは、パブロフ弁別訓練中に使用されたものとは異なるコンテキストで設定する必要があります。絶滅が実施される状況は、コンテキストB.同じコンピュータプログラムを使用して、識別セッションとまったく同じように絶滅セッションを実施しますが、CS Plus中にエタノールを送達しないでください。一貫性を保つために、ポンプにはエタノールフリーチューブでチャンバーに接続された空の20ミリリットルシリンジが装填されています。ラットがCSプラスとマイナスの区別をやめるまで、絶滅セッションを毎日実行します。これには通常どおり約8回のセッションが必要な場合があり、更新テストに進む前に必要に応じて機器を清掃してください。CS plus期間中の絶滅訓練終了時は、当初に比べて港湾入港が大幅に減少することが重要です。コンテキスト誘導更新テストは、パブロフ弁別トレーニングで使用されたのと同じチャンバーコンテキスト構成を使用しますが、これは絶滅トレーニングとは異なるコンテキストです。このシングルセッションテストは、エタノールが供給されず、注射器が空であることを除いて、パブロフ弁別トレーニングセッションと同じように実行されます。同じコンピュータープログラムを使用して、聴覚刺激を提示します。期待される結果は、CSに選択的なアルコールを求める行動の更新であり、テストの最後に機器を清掃します。以前と同様に、ラットが自宅のケージで定期的に断続的にエタノールにアクセスできるようにしたとき、エタノール消費量とエタノールの好みは、8〜12回のトレーニングセッション後に安定したレベルに増加しました。パブロフ弁別訓練中、CS plusに対するポートエントリーの反応はトレーニングセッション全体で増加し、CSマイナスへの反応はわずかに増加しましたが、ラットは絶滅訓練中に2つの聴覚手がかりを区別することを学習しました。CSプラスへのポートエントリーの反応は徐々に低下し、CSマイナスへの反応は低いままでした。ラットをパブロフ弁別訓練に関連する状況に戻したとき、CSプラス中に、絶滅訓練後の結果と比較して、ポートエントリの選択的な増加が起こりました。一方、CSマイナスに対する反応に変化はありませんでした。これらの結果は、目立たない手がかりによって誘発されるアルコール探索行動が、環境状況によって強く調節され得ることを示している。この手順を試みるときは、研究者が香水、コロン、またはその他の香りの製品を使用しないことが重要です。ラットは非常に嗅覚性の高い生き物であり、研究者に関連する嗅覚の手がかりは、このタスクの行動に混乱をもたらす可能性がありますこの方法に従って、頭蓋内微小注入などの他の手順を実行して、脳領域が関与しているなどの追加の質問に答えることができます。文脈は、パブロフの条件付けアルコールシーキングの更新を誘発しました。

a-procedure-to-observe-context-induced-renewal-pavlovian-conditioned

Research

JoVE Journal

Behavior

行動

復職の手続きとして知られている再発の動物モデルは、薬物探索に再発のストレスの役割を研究するために広く使用されている。ここで、我々は、穏やかな、断続的な電気フットショックへの急性曝露を経由して実験用ラットに求めてコカインの回復を誘導する方法で報告する。...

実験用ラットに求めてコカインのフットショック誘発性回復を勉強するための手順

食品または薬剤ペア合図の応答は、禁欲期間の経過とともに増加し、これが再発の行動への感受性の増加に関連する可能性があります。ここでは詳細自己管理スクロースを持つラットではこの"渇望のインキュベーションを"評価するための手順を。...

ラットのショ糖の渇望のインキュベーションを評価するための一般的な方法

食物制限されたラットで薬物探索のロバスト増強のデモンストレーションを可能にする手順が記載されている。ヘロイン自己投与の訓練後、ラットは、彼らは穏やかに制限された食品である時に、薬物のない環境で、禁欲期間を経る。薬物探索はその後、薬物に関連した環境でテストされています。...

禁欲ラットで探しているヘロインに長期の食事制限の影響を研究するための手順

このプロトコルは、すぐに水の欠乏または応答を開始するフェージングサッカリン/ショ糖を必要としない標準的な方法とは逆に、ラットでのエタノールの応答をオペラントを開始するための新規かつ効率的な方法を説明します。...

水剥奪、サッカリンフェージングまたは拡張アクセストレーニングなしでラットにおけるエタノールの補強性を評価するための方法

ここでは、ラットでパブロフの条件付けアプローチ行動を引き出すためのプロトコルを提示します。この手順は、インセンティブの顕著性に近づき、報酬関連の手がかりに帰する傾向の個人差を測定し、依存症の脆弱性を調査するために使用できます。...

ラットにおけるパブロフ馴化アプローチトレーニング

トレース瞬目反射条件づけ (ECC) を用いて評価したラット海馬依存学習投与早期新生児の脳の発達の中にアルコールの高濃度 (11.9 %v/v)。一般的には、ECC...

胎児アルコール スペクトルの無秩序のモデルラットにおける海馬機能障害を評価するためにトレース瞬目反射条件づけの使用

この原稿では、堅牢な報酬の記憶が不安定になると実際の消長の前に counterconditioning...

不安定になると危険な飲酒に不適応報酬記憶を書き換えのため予測誤り駆動型の検索手順

このプロトコルでは、再発のモデルとしてエアコンの場所の好み (CPP)...

エアコンの場所の好みのパラダイムを使用してマウスの薬物探索の復権

ここでは、モルヒネ エアコン場所選好 (CPP)...

ラットにおける渇望のインキュベーションを測定するためエアコンの場所設定プロトコル

刑罰が課せられた禁欲を求めるヘロインに対する堅牢な急性食物欠乏誘発再発を実証する手順が記載されている。刑罰が課せられた禁欲モデルは、ヘロインの自己管理のためのシークアンドテイクチェーンスケジュールを使用して首尾よく実装されました。ヘロイン探索試験は、食物欠乏ストレスの24時間後に実施される。...

罰が課せられた禁欲を求めるヘロインのストレス誘発再発を研究する手順

学ぶ ラットにおけるパブロフ付きアルコール探索行動の状況誘発性リニューアル法。異なる環境文脈での判別訓練と消去訓練を通じて、再発メカニズムを解明する動物モデルを提供します。

ラットにおけるパブロフ付きアルコール探索行動の状況誘発性のリニューアルを観察する手順

さらに動画を探す