ラットにおけるパブロフ付きアルコール探索行動の状況誘発性のリニューアルを観察する手順

この手順では、アルコールに関連するコンテキストがパブロフのアルコール探索行動の更新を引き起こす能力を調べます。これは、最初にエタノール経験ラットを2つのユニークな状況に構成されたコンディショニングチャンバーに慣れさせることによって達成されます。手順の2番目のステップは、2つの異なる聴覚の手がかりがアルコールの利用可能性またはアルコールの欠如を示す1つのコンテキストでパブロフ識別トレーニングセッションを実施することです。

3つ目のステップは、絶滅訓練を行うことです。両方の聴覚の手がかりがアルコールなしで提示される2番目のコンテキストでは、最後のステップは、ラットを元のトレーニングコンテキストに戻し、アルコールなしで両方の聴覚の手がかりを提示することです。この操作は、以前はアルコールに関連付けられていた聴覚の合図によって引き起こされるアルコール探索行動の更新を引き起こします。

この手法の主な利点は、器械的条件付けなどの既存の手順よりも優れている点として、アルコールを予測するパブロフの手がかりによって誘発されるアルコール探索行動の動物モデルを提供することです。この方法は、アルコールに関連するコンテキストが再発を引き起こすなど、依存症分野の重要な質問に答えるのに役立ちますトレーニングの前に、ラットをテストルームに慣れさせ、彼らが経験する2つの環境コンテキストにします。ラットを動物飼育施設から試験室まで常に一貫した方法で輸送してください。

最初のセッションでは、24時間後に部屋の照明を点灯させ、防音キュービクルのファンをオンにした状態で、ラットを試験室に20分間放置します。最初の慣れセッションと同様に2回目の慣れセッションを行いますが、次に各ラットの体重を量り、取り扱います。3回目のセッションは24時間後に実施します。

このためには、視覚嗅覚刺激と触覚刺激の2つの特徴的な組み合わせのいずれかで各コンディショニングチャンバーを設定します。一貫したコンテキストを提供するためには、嗅覚刺激は各チャンバーに追加される最後のコンテキスト刺激である必要があります。異なる嗅覚刺激の混ざり合いを最小限に抑えるために、チャンバーのドアと各チャンバーが収容されている音響減衰キュービクルを閉じます。

3回目のセッションで嗅覚刺激を適用した直後に、各ラットの体重を量り、コンディショニングチャンバーに20分間入れます。ラットの半分は1つのコンテキストを経験する必要があり、残りの半分はコンテキストを経験する必要があります。2つ目は、ラットとそのチャンバーとの間の一貫性に対する重要なニーズを維持するために、ラットに特定のチャンバーを識別する番号をマークすると便利です。

すべてのネズミが部屋に置かれてから1分後、部屋の家の光を照らします 20分間で、ネズミが行ったすべての流体ポートエントリを記録します。その後、照明を消し、ネズミを降ろして、世話施設に戻します。同じ日の後半に、条件付けチャンバーの文脈が逆転する3回目のセッションとほぼ同じ4回目の慣れセッションを実施します。

最後に、毎回のセッションの後、コンディショニングチャンバーの廃棄物トレイと床パネル、および嗅覚の文脈刺激が適用されたペトリ皿を常に洗ってください。毎週、無香料の洗浄液のみを使用してください。このトレーニングのためにチャンバー全体を清掃します。

ラットを2つのグループに分け、最後の2回のエタノールアクセスセッションで平均エタノール摂取量が同じです。1つのグループはコンテキストでトレーニングされ、1つのグループはコンテキストでトレーニングされ、もう1つのグループはコンテキストでトレーニングされます。2。パブロフ弁別訓練に使用されるコンテクストは、コンテクストAと呼ばれ、これらのセッション中に、ラットはエタノールと対になったものとそうでないものの2つの異なる聴覚手がかりを区別することを学びます。

したがって、最初のステップは、エタノールで20ミリリットルの注射器を準備することです。液剤ポートについては、液剤ポートの背面から装填されたシリンジにチューブを接続します。鈍い針を使用して、各シリンジを音減衰キュービクルの外側にある独自のポンプにロードします。

次に、ポンプを手動で前進させてチューブをプライミングし、液体ポートから余分なエタノールを拭き取ります。次に、ラットを実験室の試験室に連れて行きます。慣れるときと同様に、割り当てられたコンディショニングチャンバーに入れる前に、各ラットの体重を量ります。

各チャンバー内のコンテキスト構成を再確認し、正しいラットを正しいチャンバーにロードするようにしてください。間違ったコンテキストや間違ったCS plusにさらされたラットは、研究から外さなければならないかもしれません。すべてのラットの体重を量り、負荷をかけたら、トレーニングセッションのイベントを制御するコンピュータープログラムを開始します。

プログラムが始まって5分後、各セッションで各チャンバーのハウスライトが点灯し、ホワイトノイズが16、10秒、クリックノイズが16、10秒のバーストが提示されます。各ラットについて、これらの聴覚刺激の1つをエタノールに指定し、Csの最後の6秒間に2つの条件付けコンテキストでこれらの指定を相殺し、さらに、ポンプは0.2ミリリットルのエタノールを流体ポートに供給します。1時間のセッションを行うために、変動時間67秒のスケジュールで刺激を設定します。

すべての流体ポートエントリは、Csの10秒前、Cs中、およびcsの10秒後から開始します。また、パブロフ弁別トレーニングセッション全体で行われた流体ポートエントリの総数を記録します。セッションが終了したら、家の電気を消し、ネズミをコンディショニングチャンバー内の動物飼育施設に戻します。

液体ポートをチェックして、ラットがセッション中に供給された3.2ミリリットルのエタノールを消費したことを確認します。ラットがチャンバーから移動した後、液体ポートをチェックして、エタノールを消費していないラットがエタノールを消費していることを確認し、CSプラス中にポートエントリのレベルが低い場合は、研究からドロップする必要があるかもしれません。通常どおりコンディショニングチャンバーを清掃します。

最初にチューブを水で洗い流し、次に空の60ミリリットルの注射器を使用して空気を通して、チューブを清掃します。ラットがポートエントリーレスポンスで示されるように2つの聴覚刺激を区別するまで、セッションを毎日繰り返します。CS plusへのポートエントリの選択的な増加は、16〜20セッション以内に安定することが予想されます。

絶滅セッション用。すべてのラットのコンディショニングチャンバーは、パブロフ弁別訓練中に使用されたものとは異なるコンテキストで設定する必要があります。絶滅が実施される状況は、コンテキストB.同じコンピュータプログラムを使用して、識別セッションとまったく同じように絶滅セッションを実施しますが、CS Plus中にエタノールを送達しないでください。

一貫性を保つために、ポンプにはエタノールフリーチューブでチャンバーに接続された空の20ミリリットルシリンジが装填されています。ラットがCSプラスとマイナスの区別をやめるまで、絶滅セッションを毎日実行します。これには通常どおり約8回のセッションが必要な場合があり、更新テストに進む前に必要に応じて機器を清掃してください。

CS plus期間中の絶滅訓練終了時は、当初に比べて港湾入港が大幅に減少することが重要です。コンテキスト誘導更新テストは、パブロフ弁別トレーニングで使用されたのと同じチャンバーコンテキスト構成を使用しますが、これは絶滅トレーニングとは異なるコンテキストです。このシングルセッションテストは、エタノールが供給されず、注射器が空であることを除いて、パブロフ弁別トレーニングセッションと同じように実行されます。

同じコンピュータープログラムを使用して、聴覚刺激を提示します。期待される結果は、CSに選択的なアルコールを求める行動の更新であり、テストの最後に機器を清掃します。以前と同様に、ラットが自宅のケージで定期的に断続的にエタノールにアクセスできるようにしたとき、エタノール消費量とエタノールの好みは、8〜12回のトレーニングセッション後に安定したレベルに増加しました。

パブロフ弁別訓練中、CS plusに対するポートエントリーの反応はトレーニングセッション全体で増加し、CSマイナスへの反応はわずかに増加しましたが、ラットは絶滅訓練中に2つの聴覚手がかりを区別することを学習しました。CSプラスへのポートエントリーの反応は徐々に低下し、CSマイナスへの反応は低いままでした。ラットをパブロフ弁別訓練に関連する状況に戻したとき、CSプラス中に、絶滅訓練後の結果と比較して、ポートエントリの選択的な増加が起こりました。一方、CSマイナスに対する反応に変化はありませんでした。

これらの結果は、目立たない手がかりによって誘発されるアルコール探索行動が、環境状況によって強く調節され得ることを示している。この手順を試みるときは、研究者が香水、コロン、またはその他の香りの製品を使用しないことが重要です。ラットは非常に嗅覚性の高い生き物であり、研究者に関連する嗅覚の手がかりは、このタスクの行動に混乱をもたらす可能性がありますこの方法に従って、頭蓋内微小注入などの他の手順を実行して、脳領域が関与しているなどの追加の質問に答えることができます。

文脈は、パブロフの条件付けアルコールシーキングの更新を誘発しました。