Ploidy Manipulation of Zebrafish Embryos with Heat Shock 2 Treatment

Destiny L. Baars; Kendra A. Takle; Jonathon Heier; Francisco Pelegri

doi:10.3791/54492

JoVE Journal
Developmental Biology

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JoVE Journal Developmental Biology

Ploidy Manipulation of Zebrafish Embryos with Heat Shock 2 Treatment

熱ショック2処理とゼブラフィッシュ胚の倍数性マニピュレーション

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11:19 min

December 16, 2016

DOI: 10.3791/54492-v

Destiny L. Baars¹, Kendra A. Takle*^1,2, Jonathon Heier*^1,3, Francisco Pelegri¹

¹Laboratory of Genetics,University of Wisconsin, ²Department of Neurobiology,University of Massachusetts Medical School, ³Interdisciplinary Biomedical Graduate Program,University of Pittsburgh School of Medicine

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

倍数性操作のための修正されたプロトコルは、初期胚に細胞質分裂における1サイクルのストールを誘導するために熱ショックを使用しています。このプロトコルは、ゼブラフィッシュで実証されているが、他の種にも適用可能です。

この手順の全体的な目標は、1つの胚性細胞周期に対応する細胞質分裂の阻害を通じて、初期のゼブラフィッシュ胚の二倍体化を促進することです。この方法は、成体または生殖形質に関与する遺伝子の特定、近交系の生成、またはその他の遺伝子操作など、遺伝学の分野における重要な質問に答えるのに役立ちます。この技術の主な利点は、二倍体化を促進するのにシンプルでありながら効果的であり、単一のヘテロ接合体個体に存在する対立遺伝子の直接的なホモ接合を可能にすることです。

実験の前の午後、オスとメスを分離するための仕切り付きの標準的なゼブラフィッシュ交配ボックスに、目的のゼブラフィッシュ系統の交配ペアを設定します。実験当日の朝、産卵開始のための物理パーティションを取り外して開始します。交配ペアを含むタンクを目視検査して、自然交配中の卵の押し出しを検出します。

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