스트렙토조신 치료: 제1형 당뇨병의 제브라피시 모델

- 제1형 당뇨병은 면역 체계가 췌장의 베타 세포를 만드는 인슐린을 파괴하는 인간 질병입니다. 스트렙토조신은 제브라피시에서 제1형 당뇨병을 유발할 수 있습니다. 먼저, 물고기 물에 2-페녹시에탄올 용액으로 물고기를 마취합니다. 물고기를 가져다가 배쪽이 위를 향하도록 페트리 접시에 놓습니다. 물고기 체중 그램당 0.35mg을 기준으로 스트렙토조신의 복용량을 계산하고 식염수로 희석합니다.

제브라피쉬의 복부 쪽에 있는 골반 띠 아래에 복강내 주사로 스트렙토조신을 투여합니다. 스트렙토조신은 췌장 베타 세포의 GLUT2 수용체와 결합하여 인슐린 분비를 유도하는 리간드인 N-아세틸글루코사민과 구조적으로 유사합니다. 따라서 스트렙토조신은 췌장 베타 세포에 존재하는 GLUT2 수용체에 결합하여 세포 내부로 운반합니다.

베타 세포에 들어가면 스트렙토조신은 면역 반응을 유발하여 자가항원을 방출합니다. 자가항원은 면역체계가 베타 세포를 이물질로 인식하고 파괴하도록 하여 인슐린 수치를 감소시킵니다. 3일과 5일에 스트렙토조신을 반복해서 투여한 다음 면역 반응을 유지하기 위해 7일에 한 번씩 매주 투여합니다.

다음 예에서는 제1형 당뇨병의 제브라피시 모델을 생성합니다. 당뇨병을 앓고 있는 제브라피쉬를 생성하려면, 일반 어수가 있는 회수 탱크와 2-페녹시에탄올이 1-1,000 희석된 어수 마취 탱크를 준비합니다. 흄 후드 아래에서 0.3% 염화나트륨 6ml에 STZ 6mg을 첨가하여 0.09% 스트렙토조신 또는 STZ 용액을 준비하고 즉시 용액을 얼음 위에 놓습니다.

별도의 튜브에 대조군 물고기를 위한 충분한 식염수를 분취합니다. 27 및 1/2 게이지 바늘이 장착된 반 CC 주사기에 STZ 또는 제어 용액을 채워 기포가 갇히지 않도록 합니다. 물고기 한 마리를 마취수에 넣고 수영 동작이 멈출 때까지 약 1-2분 동안 마취합니다.

마취가 끝나면 생선을 종이 타월 위에 잠시 올려 여분의 물을 흡수합니다. 그런 다음 물고기를 계량 보트에 넣고 무게를 잰다. 다음으로 물고기를 단단한 표면에 놓습니다. 그런 다음 바늘을 베벨을 지나 복부 복막의 뒤쪽 측면에 삽입하고 STZ 그램당 0.35mg 또는 이에 상응하는 양의 제어 용액을 물고기의 복막강에 주입합니다.

주사 후 물고기를 회수 물 탱크에 넣고 정상적인 수영 활동을 모니터링하십시오. 실험에 필요한 물고기를 충분히 주입한 후 일반 수조로 옮기고 섭씨 22-24도의 온도를 유지합니다. 감소된 온도는 고혈당증의 효율적인 유도를 위해 매우 중요합니다. 매우 높은 고혈당 상태를 장기간 유도하려면 유도 단계에서 잦은 주사 일정을 따른 후 아래와 같이 매주 유지 주사를 주사합니다.