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돼지 각막 내피 세포의 레이저 보조 선택적 절제: 생체 외 연구를 위한 집속 돼지 각막 내피 손상을 유도하는 기술
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Transcript
돼지 각막의 가장 안쪽 층(투명한 무혈관 앞눈 부분)은 각막 내피 세포(CEC)로 구성되어 있으며, 기저막(Descemet's membrane, DM)에 의해 지지됩니다. CEC는 각막의 투명도와 최적의 시력을 유지합니다. 손상이 있으면 시력에 영향을 줄 수 있습니다.
선택적 CEC 손상의 경우 적절한 배지에서 갓 수확한 돼지 눈으로 시작하십시오. 주변 조직을 제거하십시오. 표면 미생물 오염을 제거하기 위해 적절한 소독제로 눈을 치료하십시오. 식염수 세척 후 레이저 조사 전에 이상을 배제하기 위해 전방 눈을 광학적으로 검사합니다.
특정 파장의 레이저가 장착된 슬릿 램프 장치 앞에 있는 맞춤형 고정 장치에 눈을 고정합니다. 개별 각막층을 시각화합니다. 적절한 레이저 에너지와 초점 포인트 위치를 사용하여 레이저 펄스를 각막 내피층으로 향하게 합니다. 집중된 단기간, 고출력 펄스는 열 확산을 피하면서 노출된 표면에서 선택적 CEC 파열을 일으켜 DM 또는 기질 조직을 보호합니다.
변두리(limbus) - 각막 접합부(corneoscleral junction)에 가까운 진입구를 만들고, 각막을 포함하는 전방에 점탄성 용액을 주입하여 각막을 안정화하고 나머지 CEC를 보호합니다. 레이저로 처리된 각막 분절을 절제하여 CEC 면이 위를 향하도록 하는 매체가 포함된 다중 웰 플레이트로 이동합니다. 체외 각막 내피 손상 모델은 추가 연구에 사용할 수 있습니다.
