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마취된 마우스를 정위 고정 프레임에 고정합니다.
각막 건조를 방지하기 위해 눈 연고를 바르십시오.
두피를 면도하고 피부를 소독하십시오.
이어바를 삽입하여 두개골을 안정시킵니다.
그런 다음 정중선을 절개하여 두개골을 노출시킵니다.
목표 좌표에서 두개골에 구멍을 뚫습니다.
시각화를 위해 유전자 변형 인간 신경 전구 세포 또는 루시페라아제 및 형광 단백질을 발현하는 NPC가 주사기에 로드됩니다.
주사기를 대상 부위에 맞추고 바늘을 원하는 깊이로 내립니다.
세포 누출을 방지하기 위해 바늘 주위에 티슈 접착제를 바르십시오.
균일한 분포를 보장하기 위해 세포를 천천히 주입하십시오.
세포 현탁액의 역류를 방지하기 위해 바늘을 제자리에 잠깐 고정합니다.
마지막으로 바늘을 천천히 빼내고 절개 부위를 닫습니다.
이제NPC를 이식한 마우스 모델을 시각화할 준비가 되었습니다.
안면 마스크를 사용하여 마취를 유지하면서 동물을 유도실에서 정위 고정 프레임으로 이송합니다.
눈이 건조해지는 것을 방지하기 위해 안과용 윤활제를 바르십시오. 전기 면도기로 쥐의 두피를 면도하고 면봉을 사용하여 5% 베타딘 용액으로 피부를 소독합니다. 마우스 헤드를 고정하고 이어바를 외부 비도에 삽입합니다.
수술용 치과용 드릴로 두개골을 통해 직경 2-3mm의 구멍을 뚫습니다. 준비된 세포를 튜브에 재현탁시키고 2마이크로리터의 세포 현탁액을 주사기에 끌어당깁니다. 주사기를 대상 부위 위에 놓고 바늘을 경막 표면으로 천천히 움직여 깊이 좌표를 계산합니다.
