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자궁 내 세포 주사는 관심 있는 세포를 수혜 동물의 자궁강으로 전달할 수 있습니다. 시작하려면 마취된 면역 저하 누드 마우스를 오른쪽 측면 위치로 준비합니다. 수술적 절개를 하고 복부 근육을 해부하여 복강을 노출시킵니다.
자궁 뿔 중 하나를 찾으십시오. 이 관형 구조는 양쪽의 난관에서 확장되어 단일 자궁경부로 열리는 두 개의 별개의 자궁과 유사합니다.
다음으로, 분할을 위해 뿔의 앞쪽과 뒤쪽 끝을 고정합니다. 이제 난소암 세포 현탁액을 분절된 자궁 내강에 천천히 주입하여 세포의 효율적인 전달을 보장합니다.
그런 다음 자궁 뿔을 복강으로 되돌리고 수술 절개 부위를 봉합합니다. 마우스가 케이지에서 회복되도록 합니다.
주사 후 며칠 이내에 종양이 주사 부위에 발생하여 전이되어 복막강의 다른 조직이나 기관에 이차 종양을 형성합니다.
이 절차를 시작하려면 7-8주 된 무척 누드 마우스를 2% 이소플루란으로 마취합니다. 그런 다음 발바닥을 꼬집어 완전히 마취되었는지 확인합니다. 다음으로, 동물을 멸균 거즈 패드 위에 오른쪽으로 눕히고 머리를 실험자에게서 멀리 둡니다. 마취 상태에서 건조함을 방지하기 위해 양쪽 눈에 연고를 바르십시오.
그런 다음 이소플루란 기화기에 연결된 노즈콘 시스템에 동물의 머리를 빠르게 삽입합니다. 알코올 패드를 사용하여 복부 오른쪽을 소독한 다음 요오드를 소독합니다. 그런 다음 멸균 수술용 드레이프를 그 위에 놓습니다. 멸균 수술용 가위와 겸자를 사용하여 마우스의 왼쪽 아래 사분면에 1-2cm의 피부 절개를 합니다.
그런 다음 근육을 들어 올리고 복막에 도달하도록 절개합니다. 그런 다음 경사 근육을 해부하여 복강을 노출시킵니다. 그런 다음 왼쪽 자궁 뿔을 찾습니다. 멸균 지혈제를 사용하여 뿔의 앞쪽과 뒤쪽을 모두 고정합니다.
전방 클램프를 나팔관 바로 아래에 놓고 후방 클램프를 자궁경부 바로 위에 놓습니다. 이 시점에서 두 번째 실험자에게 바늘이 들어 있는 세포를 뿔에 수직으로 45도 각도로 배치하여 세포 현탁액을 주입하게 합니다. 그런 다음 50마이크로리터의 세포 현탁액을 자궁 뿔의 내강에 천천히 주입합니다. 그런 다음 전방 클램프를 풀고 후방 클램프를 풉니다.
그런 다음 자궁 뿔을 복강에 다시 넣습니다. 합성 흡수성 봉합사를 사용하여 복막을 닫습니다. 그런 다음 티슈 접착제를 사용하여 피부를 닫습니다.
완료되면 노즈콘에서 마우스를 제거하고 케이지에 다시 넣습니다. 동물을 방치하기 전에 동물이 깨어 있고 활동적인지 확인하십시오. 수술 후 처음 48시간 동안 식수에 이부프로펜을 제공하십시오.
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