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동소 접종은 세포의 자연적인 해부학적 위치와 일치하는 특정 조직 또는 부위에서 암세포를 수용 동물에게 전달하는 데 도움이 됩니다. 시작하려면 마취된 암컷 누드 마우스를 수술 단계에서 배가 아래로 향하도록 준비합니다. 흉곽과 대퇴골 사이의 척추 근처에 수직 절개를 합니다. 복부 근육을 열어 복막강을 부분적으로 노출시킵니다. 난소 중 하나를 찾습니다.
주사기에 냉각된 세포외 기질로 난소암 세포의 현탁액을 준비합니다. 낮은 온도는 현탁액이 응고되는 것을 방지합니다. 이 현탁액을 마우스의 난소에 주입합니다. 매트릭스가 응고되어 암세포가 난소 내에 내장될 수 있도록 바늘을 제자리에 고정합니다. 바늘을 집어넣습니다. 절개 부위를 봉합하여 상처를 봉합합니다. 마우스가 복구되도록 합니다.
시간이 지남에 따라 주입된 난소암 세포는 증식하여 원발성 종양을 형성합니다. 결국, 몇 개의 세포가 주요 위치에서 분리되어 복막강 내에서 전파됩니다. 이러한 이동하는 종양 세포가 복강 내막에 부착되면 복막 조직을 침범하여 증식하여 전이된 이차 종양을 형성합니다.
동소 접종을 수행하려면 텍스트 프로토콜에 따라 8주 된 암컷 누드 마우스를 마취한 후 발가락 꼬집기를 수행하여 마취 깊이를 확인합니다. 마취된 마우스를 수술 단계에 놓고 배가 아래로 향하게 합니다. 그런 다음 클로르헥시딘 기반 스크럽과 알코올을 사용하여 여러 번 세척하여 수술 부위를 소독합니다.
다음으로 오른쪽 늑골궁과 대퇴골 사이의 척추 근처에 약 2cm의 수직 절개를 합니다. 절개 부위 주위에 멸균 수술용 드레이프를 놓습니다. 그런 다음 절개된 피부 표면을 클램프로 고정하여 개구부를 유지합니다.
이제 첫 번째 절개 아래 두정 복막에 두 번째 1cm 절개를 하여 복강을 엽니다. 그런 다음 절개된 복부 표면을 고정합니다. 클램프를 사용하여 동측 난소와 나팔관을 둘러싸고 있는 지방 조직을 잘라 복강에서 난소를 제거합니다.
그런 다음 해부 현미경 아래에 마우스를 배가 아래로 향하게 하기 전에 난소와 나팔관을 거즈 위에 조심스럽게 놓습니다. 세포 현탁액을 인슐린 주사기로 옮깁니다. 그런 다음 준비된 세포 현탁액 1-2마이크로리터를 즉시 조심스럽게 난소에 주입합니다.
몇 초 동안 하이드로겔이 굳도록 바늘을 난소에 유지합니다. 겔화 후 주입된 종양 세포는 난소에 남아 있습니다. 조심스럽게 난소를 몸으로 되돌립니다. 멸균 의료용 실크를 사용하여 상처 클립을 사용하여 피부를 밀봉하기 전에 두 번째 절개 부위를 봉합합니다.
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