뇌종양에 치료제를 전달하기 위해 마우스에 두개내 캐뉼라 이식

뇌종양이 있는 마취된 마우스로 시작하여 가이드 캐뉼라를 운반하고 정위 고정 장치에 고정합니다.

두피를 소독한 후 해부합니다. 두개골을 노출시키기 위해 피하 조직을 제거합니다.

두개골 표면을 긁어 고르지 않게 만듭니다. 캐뉼라를 지지하기 위해 나사를 고정합니다.

종양에 도달하기 위해 정확한 위치에서 두개골에 구멍을 뚫습니다.

구멍을 통해 가이드 캐뉼라를 내려 종양에 삽입합니다.

아크릴 수지를 바릅니다. 고르지 않은 두개골 표면은 가이드 캐뉼라를 고정하기 위해 접착제를 잡을 수 있는 그립을 제공합니다.

마우스가 복구되도록 합니다.

마우스를 다시 마취하고 고정합니다.

치료제가 들어 있는 주사기에 부착된 치료 캐뉼라를 가져 가십시오.

가이드 캐뉼라 위에 치료 캐뉼라를 놓습니다.

치료제를 주입하고 종양으로 흘러 들어가도록 합니다.

시작하려면 머리를 깎은 마취된 마우스를 수술대 위에 놓고 주걱을 사용하여 정위 팔의 바닥을 부드럽게 엽니다. 집게로 캐뉼라를 삽입하고 흰색 플라스틱 부분의 1/2에서 2/3과 캐뉼라의 5mm가 개구부 바닥에서 돌출될 때까지 암의 나사를 조여 고정합니다.

쥐의 윗니를 정위 고정 장치의 바이트 바에 삽입하고 고정합니다. 노즈콘을 앞으로 당겨 조여 마우스가 이소플루란을 흡입하도록 합니다. 그런 다음 과도한 압력을 피하면서 이어 커프나 이어바를 사용하여 예열된 정위 장치에 마우스를 장착합니다.

수술 부위를 소독하고 원고에 설명된 대로 두개골과 평행하게 절개합니다. 면봉 끝이 있는 면봉을 사용하여 근막을 밀어냅니다. 두개골판이 만나는 전방 및 후방 표시에 해당하는 두개골의 랜드마크 브레그마와 람다를 식별합니다.

아크릴을 부착할 수 있는 표면을 만들려면 메스를 사용하여 두개골을 가로질러 부드럽게 여러 개의 슬릿을 만듭니다. 정위 팔을 사용하여 캐뉼라를 관심 랜드마크에 위치시킵니다. 캐뉼라 끝을 두개골 표면에서 1-2mm 위로 올리고 원하는 좌표로 이동합니다. 18게이지 바늘이나 수술용 드릴을 사용하여 캐뉼라가 들어가는 곳에서 멀리 떨어진 노출된 두개골에 두 개의 나사 구멍을 만들어 캐뉼라를 위한 충분한 공간을 확보합니다.

두

개골에 부착될 때까지 나사 구멍을 통해 드릴을 비틀습니다. 일자 드라이버를 사용하여 두 개의 나사를 구멍에 삽입하고 조입니다. 그런 다음 나사를 부드럽게 위로 당겨 고정되었는지 확인합니다.

캐뉼라를 삽입하려면 18게이지 바늘이나 수술용 드릴을 사용하여 식별된 좌표에서 두개골에 구멍을 만듭니다. 정위 암을 사용하여 캐뉼라를 원하는 DV 좌표로 내립니다. 도자기 12웰 플레이트에 약 0.3g의 아크릴 수지 분말과 10-15방울의 액체를 추가합니다.

준비된 점성, 흰색 물질을 1밀리리터 주사기에 넣습니다. 두개골을 코팅하고 캐뉼라와 나사 주변의 공간을 채웁니다. 시멘트가 유연할 때 정위 암의 나사를 풉니다. 주걱을 사용하여 하단 개구부의 홀더에서 캐뉼라를 부드럽게 분리하고 정위 암을 마우스에서 멀리 집어넣습니다.

시멘트가 건조되면 더미 캐뉼라를 가이드 캐뉼라에 삽입하고 시계 방향으로 돌려 단단히 고정합니다. 절차가 완료되면 복구를 위해 마우스를 따뜻하게 된 홈 케이지로 되돌립니다.

치료 캐뉼라를 준비하려면 상단을 PKG 튜브에 삽입하십시오. 그런 다음 치료 주사기에 CAR T 세포 현탁액을 채우고 치료 캐뉼라 상단을 덮고 있는 PKG 튜브의 다른 쪽 끝을 통해 삽입합니다. 마우스를 마취한 후 겸자를 사용하여 가이드 캐뉼라를 베이스에 고정합니다. 더미 캐뉼라의 나사를 풀고 제거하여 가이드 캐뉼라에 접근할 수 있도록 합니다.

CAR T 세포를 1분 동안 주입하고 치료 캐뉼라를 1분 더 제자리에 고정합니다. 치료 캐뉼라를 제거한 후 더미 캐뉼라를 단단히 조입니다. 그런 다음 통증 조절을 위해 멜록시캄을 피하 투여합니다.