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DOI: 10.3791/52454-v
Kasper J. Kyng1, Torjus Skajaa1, Sigrid Kerrn-Jespersen1, Christer S. Andreassen2, Kristine Bennedsgaard1, Tine B. Henriksen1
1The Perinatal Research Unit, Department of Pediatrics,Institute of Clinical Medicine, Aarhus University Hospital, 2Department of Otorhinolaryngology and Head & Neck Surgery,Institute of Clinical Medicine, Aarhus University Hospital
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
주산기 질식에 따른 저산소성 허혈성 뇌병증은 동물 모델을 사용하여 연구할 수 있습니다. 우리는 신생아 저산소성-허혈성 뇌병증의 새끼 돼지 모델을 확립하는 데 필요한 절차를 보여줍니다.
다음 실험의 전반적인 목표는 주산기 저산소성 허혈성 뇌병증의 새끼 돼지 모델을 입증하는 것입니다. 그런 다음 이 모델을 신생아 뇌 손상 조사에 사용할 수 있습니다. 먼저, 새끼 돼지는 신생아 집중 치료실과 유사한 환경에서 진정, 인공호흡 및 모니터링됩니다.
본 원고에 기술된 기술은 저산소증을 적정하기 위해 진폭 통합 EEG를 사용합니다. 각 개별 연구의 탄력성에 따르면, 동물 저산소증은 통제된 방식으로 유도되어 진폭을 통합하고 EEG를 억제하면서 생존을 보장합니다. 이 4일 생존 모델에서는 동물들이 저산소증 후 72시간이 지나면 안락사됩니다.
마지막으로, 실험의 목적에 따라 자기 공명 영상, 신경 병리학 및 체액 및 장기 분석을 사용하여 대뇌 및 기타 결과를 평가할 수 있습니다. 이 연구에서는 신생아 저산소성 허혈성 뇌병증의 새끼 돼지 모델을 확립하는 데 필요한 기술적 절차를 단계별로 시각화합니다. 신경 발달 결과는 신생아 집중 치료의 모든 영역에서 주요 관심사입니다.
좋은 동물 모델은 신생아 뇌 손상 관리를 개선하는 데 필수적입니다. 당신이 곧 보게 될 모델은 저산소증 isch의 임상 과정에 대한 좋은 근사치입니다. 이러한 이유로, 결과는 여기에 제시된 모델의 임상 환경에 잘 반영되며, 저산소성 모욕의 심각성과 시기를 제어하여 생물학적 변이를 최소화합니다.
임상 연구의 해석을 복잡하게 만드는 것은, 우리는 출생 후 18시간에서 24시간 사이에 덴마크 육상 자돈들을 사용한다는 것입니다. 몸무게는 평균 1000-2000g이며, 생리적 특성은 여러모로 신생아와 비슷하다. 이 모델은 뇌척수액, 소변 및 혈액과 같은 체액의 자기 공명 영상, 신경 병리학 및 바이오마커에 대한 치료 효과를 조사하는 데 사용할 수 있습니다.
기술적으로 작업하기 어려운 모델입니다. 다음에서는 모델 완성에 필요한 각 단계를 보여줍니다. 마취를 시작하는 데 필요한 장비는 세보 불소 투여용 마스크, 식염수, 프로포폴, 펜타닐, 근육 이완제 및 페니실린이 함유된 말초 정맥 카테터 주사기입니다.
입을 벌리기 위한 슬링, 솜 팁 스왑, 직선 블레이드 Sloane 스프레이 커프 기관내관, SIIS 3 0 2 0.5 및 커프 팽창 및 청진기를 위한 2개의 OH 자체 팽창 백 주사기가 있는 수의학 후두경. VO 불소는 마스크를 사용하여 투여하고 마취 깊이를 모니터링합니다. 프로토콜에 따라 말초 정맥 카테터를 귓 정맥에 삽입하고 살란으로 씻어냅니다.
이 시점에서 동물은 진정제를 투여받지만 자발적으로 호흡을 합니다. 정맥 마취는 펜타닐을 킬로그램당 30마이크로그램으로 투여한 후 삽관 직전에 프로포폴, 킬로그램당 5밀리그램, 브론을 킬로그램당 1밀리그램으로 투여하여 시작합니다. 삽관을 위해 새끼 돼지는 앙와위 자세로 변위됩니다.
기관내관의 길이는 끝에서 흉골 찌르기 위까지 측정됩니다. 일반적으로 약 13cm의 면 스왑을 사용하여 긴 후두개를 들어 올릴 수 있도록 앞으로 당깁니다. 성대의 아데노이드 연골을 전체적으로 볼 수 있도록 후두경에 사용됩니다.
사인 스프레이는 경련을 방지하기 위해 후두에 국소적으로 적용됩니다. 기관내관은 성대가 진행되면 성대를 통해 천천히 전달되며, 미리 측정된 거리에 따라 기관내관은 수동 환기를 위해 자동 팽창 백에 연결됩니다. 기관내관 배치는 대칭적인 흉부 움직임, 청진기에 의한 진동, 튜브의 미스트의 시각적 확인 및 모니터에서 흰색으로 보이는 tid CO2 곡선을 관찰하여 확인합니다.
마지막으로, 안전한 기도를 보장하기 위해 커프가 팽창됩니다. 기관내관은 이제 기계적 환기를 위해 인공호흡기에 연결됩니다. 마지막으로 프로포폴, 시간당 킬로당 5밀리그램, 펜타닐을 주입합니다.
시간당 킬로당 10마이크로그램이 시작됩니다. 인공호흡기는 부피 제어 모드로 설정되어 모니터링을 위해 장비 킬로당 10밀리리터의 일회 호흡량을 전달합니다. 새끼 돼지는 ECG 전극, 맥박 산소 측정기, 직장 온도 프로브 및 장비입니다.
중앙 동맥압 모니터링을 위해 산소 포화도 측정기를 배치한 다음 직장 온도 프로브를 삽입합니다. 전극을 삽입하기 전에 가슴을 면도합니다. 화면에는 ECG 및 심박수, 중심 동맥압 및 산소 포화도가 표시됩니다.
제대 카테터를 배치하는 데 필요한 장비는 멸균 드레이핑 메스, 마이크로 기구, 제대 카테터, 크기 3.5 프렌치 및 혈액 샘플링을 위한 5개의 프렌치 주사기 및 탯줄 혈관의 시각화를 위한 세척 봉합사 세트입니다. 탯줄은 피부 높이에서 절단됩니다. 탯줄은 사진의 오른쪽에서 볼 수 있고 두 개의 탯줄 동맥 중 하나가 왼쪽에서 보입니다.
먼저, 동맥 카테터를 새끼 돼지의 체중(킬로에 3에 10cm)을 더한 것과 같은 깊이로 삽입합니다. 올바른 위치는 혈액을 채취하여 확인합니다. 그 후, 정맥 카테터를 5cm 깊이까지 삽입합니다.
카테터는 봉합사로 고정됩니다. 3 개의 예술 봉합사를 사용하여 전극 배치를 위해 머리를 깎습니다. 진폭 통합 EEG 모니터링을 위해 두정엽 전극은 최소 2-4cm 사이에 배치해야 하며, 기준 전극은 정중선에, 접지 전극은 머리의 아무 곳에나 배치해야 합니다.
발기 부전 테스트는 양호한 신호 대 잡음비로 올바르게 배치된 4개의 전극을 보여줍니다. 화면 하단에는 실시간 EEG가 표시되며, 상단 화면에는 시간 압축 진폭이 통합된 EEG, 새끼 돼지는 이제 저산소증 유도 전에 60분 동안 휴식을 취할 수 있습니다. 저산소증은 인공호흡기로 전환하여 질소와 4%의 산소를 혼합하여 전달함으로써 시작됩니다.
상당한 저산소증에 해당하는 진폭 통합 EEG에서 평평한 추적을 달성하는 데 평균 2분이 걸립니다. 45분 동안 뇌의 백혈병. 흡기 산소의 비율이 조절됩니다.
저산소증 동안 7마이크로볼트 미만의 평평한 EEG 진폭을 유지하기 위해 새끼 돼지는 처음에 심박수를 증가시켜 보상합니다. 저산소증이 계속됨에 따라 새끼 돼지는 부적합해지기 시작하고 평균 재료 압력이 떨어집니다. 이 시점에서 생존을 보장하기 위해 흡기 산소의 분율을 조정하는 것이 중요합니다.
45분 후에는 흡기 산소의 비율이 21%로 증가하여 뇌 활동이 증가합니다. 저산소증이 끝나면 새끼 돼지는 발관을 하고 다음 4일 동안 깨어날 수 있습니다. 새끼 돼지는 숙련된 동물 기술자가 돌보며 돼지에게 먹이를 주고 매일 신경학적으로 점수를 매깁니다.
7시 2분이 되면 돼지는 진정제를 투여하고 인공호흡을 합니다. 다시 말하지만, 유전자 공명 영상(genetic resonance imaging)과 분광학(spectroscopy)은 뇌를 검사하기 위한 강력한 도구입니다. 자기공명영상(MRI)은 신경병리학적 검사로 보완됩니다.
뇌는 각 부위를 주의 깊게 해부하여 경험 많은 신경병리학자가 조사합니다. 이 비디오를 시청한 후에는 신생아 저산소성 허혈성 뇌병증의 새끼 돼지 모델을 설정하는 방법을 잘 이해했을 것입니다. 이 모델을 사용하면 신생아 뇌 손상의 진단 및 치료와 관련된 관련 질문을 조사할 수 있습니다.
궁극적으로 영향을 받는 유아의 관리를 최적화합니다.
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