November 3rd, 2016
Presented는 마우스 신생아 운동 테스트의 간결한 배터리입니다. 이러한 검사를 사용하면 다양한 신생아 운동 장애에서 신생아 운동 결손을 입증할 수 있습니다. 표준화된 테스트 세트를 통해 서로 다른 연구의 결과를 비교할 수 있으므로 그룹 간에 더 우수하고 정확한 보고가 가능합니다.
이 방법론 비디오의 전반적인 목표는 신생아 운동 검사를 쉽게 재현하고 정량화할 수 있도록 일련의 신생아 운동 검사를 수행하는 적절한 방법을 보여주는 것입니다. 이 비디오는 일련의 신생아 운동 테스트와 각 개별 테스트를 수행하고 채점하는 방법을 보여줍니다. 발표된 다른 행동 논문의 문제점 중 하나는 이러한 테스트의 세부 사항이 단어만으로는 잘 번역되지 않고 비교할 수 없는 다른 연구자의 결과로 이어졌다는 것입니다.
이 일련의 테스트의 주요 장점은 표준화되고 정량화 가능한 채점 시스템을 사용하여 결과를 더 정확하고 더 잘 보고할 수 있다는 것입니다. 여기에서 시연하는 검사는 운동 결함을 확인하거나, 부상 또는 질병 모델을 검증하거나, 치료가 효과가 있는지 여부를 결정하는 데 사용할 수 있습니다. 새끼 쥐의 기어 다니는 것은 출생 후 첫 5일 이내에 발달합니다.
10일째가 되면 강아지는 걷기로 바뀝니다. 따라서 보행 테스트는 8일째에 수행됩니다. 모든 면에서 볼 수 있는 투명한 인클로저에 마우스를 배치하는 것으로 시작합니다.
3분 동안 마우스를 관찰하고 보행 점수를 매깁니다. 강아지가 스스로 걷지 않으면 강아지의 꼬리를 부드럽게 찔러서 걷기를 장려합니다. 움직임이 없으면 0점을 줍니다.
비대칭 팔다리 움직임으로 기어 다니는 것에 1점을 줍니다. 비대칭 사지 움직임은 강아지의 발 위치가 일관되지 않고 스테핑 패턴이 불규칙한 경우입니다. 대칭적인 팔다리 움직임으로 천천히 크롤링하는 데 2점을 줍니다.
이 경우 뒷발은 각 단계에서 앞발을 만나야 하며 각 단계는 다음 단계로 부드럽게 전환되어야 합니다. 마우스가 빠르고 대칭적으로 기어가거나 걷는 경우 이 동작에 3점을 부여합니다. 이 발달 기간 동안 뒷다리 자세에 측정 가능한 변화가 있으며, 기어 다니는 것에서 걷기로 전환하는 동안 뒷다리 사이의 각도가 감소합니다.
발 각도를 측정하기 위해 3분 동안 위 또는 아래에서 강아지를 비디오로 녹화합니다. 비디오에서 마우스가 두 발을 땅에 평평하게 놓고 직선으로 완전한 보폭을 내딛는 세그먼트를 찾습니다. 뒤꿈치 끝에서 가장 긴 발가락 끝까지 선을 그려 강아지의 발 각도를 측정합니다.
강아지가 움직이지 않거나 회전하는 동안에는 측정하지 마십시오. 오른쪽 반사는 새끼 쥐가 누운 자세에서 발로 뒤집을 때 나타납니다. 이 반사는 생후 1일에서 10일 사이의 생쥐에서 발생한다.
이 반사 작용을 테스트하려면 강아지를 벤치 패드에 등을 대고 놓고 5초 동안 누운 자세로 유지한 다음 강아지를 풀어주고 엎드린 자세로 돌아가는 데 걸리는 시간을 기록합니다. 또한 바로잡는 방향을 기록하십시오. 각 강아지가 뒤집을 수 있도록 최대 1분의 시간을 주십시오.
네거티브 지오택시(Negative Geotaxis)는 강아지를 아래를 향하게 하고 자연스럽게 몸을 돌릴 때 관찰할 수 있는 타고난 행동입니다. 이 반사 작용은 생후 3일에서 15일 사이에 설치류에서 발생한다. 머리가 아래를 향하도록 강아지를 45도 경사면에 놓고 5초 동안 유지한 다음 강아지를 풀어줍니다.
강아지가 언제 어느 방향으로 회전하는지 기록하여 2분 동안 행동을 보여줄 수 있도록 합니다. 경사면에서 떨어지거나 회전하지 않는 마우스는 다시 테스트하거나 제거하거나 0점을 부여할 수 있습니다. 생후 10일이 넘은 마우스의 경우 Front-Limb Suspension Test를 사용하여 앞다리 간의 근력 차이를 감지합니다.
강아지의 몸을 단단히 잡고 양쪽 앞발로 뻣뻣한 철사를 잡은 다음 강아지를 풀어주고 떨어지는 데 걸리는 시간을 측정합니다. 강아지가 한쪽 발을 다른 발보다 먼저 놓는지 아니면 두 발을 동시에 놓는지 기록합니다. 생후 2일에서 14일 사이의 강아지의 경우 뒷다리 서스펜션 테스트를 사용하여 뒷다리 힘과 신경근 기능의 차이를 감지합니다.
강아지의 꼬리를 잡고 뒷다리를 테두리 위에 놓은 50ml 원뿔형 튜브로 부드럽게 내립니다. 그런 다음 강아지를 풀어주고 떨어지는 데 걸리는 시간을 기록하십시오. 또한 뒷다리의 자세에 점수를 매기십시오.
뒷다리가 정상적으로 분리되고 꼬리가 올라간 경우 4점을 줍니다. 뒷다리가 서로 더 가깝지만 거의 접촉하지 않는 경우 강아지에게 3점을 줍니다. 뒷다리가 서로 가깝고 자주 닿는 경우 2점을 얻습니다.
뒷다리가 거의 항상 꼬리를 들고 움켜쥔 위치에 있으면 1점을 얻습니다. 그리고 꼬리를 내린 상태에서 뒷다리를 계속 움켜쥐거나 일정 시간 동안 튜브를 잡지 못하면 0점을 받습니다. 강아지가 뒷다리를 사용하여 몸을 들어 올리려고 할 때 이것은 당기는 것으로 간주됩니다.
이것들도 계산하고 기록 할 수 있습니다. 악력 테스트는 네 발의 강도를 동시에 검사합니다. 악력은 빠르면 5일, 늦어도 15일째부터 측정할 수 있습니다.
강아지를 유리 섬유 스크린 조각에 놓습니다. 강아지가 약 5초 동안 이 환경에 적응하도록 한 다음 화면을 천천히 180도로 반전시킵니다. 강아지가 떨어지면 화면의 각도를 기록하십시오.
강아지가 화면이 완전히 뒤집혔을 때 화면을 잡을 수 있으면 떨어질 때까지의 대기 시간을 기록하십시오. Grasping Reflex를 사용하여 특정 발 잡기 결함을 확인합니다. 이 반사는 보통 3일에서 15일 사이에 나타난다.
시작하려면 강아지의 목덜미를 잡고 강아지는 본능적으로 움직이지 않고 편안해져야 합니다. 다음으로, 면도날의 뭉툭하고 둥근 면으로 각 발의 아래쪽을 쓰다듬고 잡는 것의 유무를 기록합니다. 그런 다음 텍스트에 제공된 방정식을 사용하여 강아지의 발 선호도를 계산합니다.
절벽 혐오 테스트는 강아지의 미로 반사 신경과 힘 및 협응력을 측정합니다. 이 검사는 출생 후 1일차부터 14일째까지 새끼에게 사용할 수 있습니다. 이 테스트에는 평평하고 높은 선반이 있는 상자를 사용합니다.
최소 5개의 마우스로 상자를 미리 설정합니다. 이제 앞발, 손가락, 주둥이를 가장자리에 매달아 놓은 강아지를 상자 가장자리에 놓습니다. 그런 다음 강아지를 풀어주고 타이머를 시작합니다.
마우스가 가장자리에서 멀어지는 데 걸리는 시간을 기록합니다. 테스트를 완료하는 데 최소 30초가 소요됩니다. 강아지가 떨어지면 다시 검사할 수 있습니다.
자세한 내용은 텍스트를 참조하십시오. 뇌성마비는 앞서 설명한 바와 같이 생후 6일 된 새끼 쥐에서 유발되었습니다. 수술용 가짜 강아지가 대조군으로 사용되었습니다.
부상 후 48시간 후의 대표 결과가 표시됩니다. 보행 테스트(Ambulation Test)에서 뇌성마비 강아지는 가짜와 비교할 때 부상 후 48시간에 덜 대칭적으로 보행합니다. 부상 후 48시간이 지났을 때, 뒷발 각도는 가짜 동물과 비교했을 때 CP 마우스에서 더 넓게 벌어졌습니다.
CP 마우스는 약간 있지만 sham과 비교할 때 뒷다리 힘이 현저히 약합니다. 가짜 강아지는 CP 강아지보다 훨씬 더 강한 그립 강도를 가지고 있습니다. CP 마우스는 shams와 비교할 때 더 적은 발로 움켜 쥐었습니다.
부상 후 48시간이 지나면 CP 마우스는 오른쪽 뒷발을 선호합니다. 이 신생아 운동 검사 세트를 사용하면 다양한 연구 그룹의 결과를 신뢰할 수 있게 보고하고 비교할 수 있습니다. 이러한 테스트를 수행할 때 일관성을 유지해야 합니다.
생쥐는 어리고 시험 사이에 휴식이 필요합니다. 또한 그들은 따뜻하게 유지해야하며 때때로 먹이를 위해 댐으로 돌아 가야합니다. 결과의 일관성과 정확성을 높이기 위해 하루 중 같은 시간에 이러한 테스트를 수행해야 하며, 불참여와 작업 수행 불능의 구별 및 기타 유용한 힌트를 포함하여 보다 구체적인 세부 사항은 작성된 텍스트를 참조하십시오.
이 기사는 생쥐 새끼의 운동 결손을 평가하도록 설계된 표준화된 신생아 운동 검사 배터리를 제시합니다. 이러한 검사는 다양한 연구 간의 결과의 재현성과 비교 가능성을 촉진합니다.
Standardized neonatal motor testing enables reproducible assessment of motor deficits in preclinical models of cerebral palsy and related neurological disorders. This battery supports target validation by quantifying functional outcomes in disease-relevant systems, facilitating mechanistic de-risking and predictive confidence in early discovery. The approach enhances translational continuity by aligning rodent phenotypes with human motor impairments, informing go/no-go decisions in therapeutic development pipelines.
Position the method within the discovery continuum from Early Discovery to Lead Identification, supporting hypothesis testing and biological de-risking in neonatal disease models.