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Vivo에서 혈액-뇌 장벽 침투성 분석 결과 사용 하 여 마우스에 붙일 추적기 표시
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JoVE Journal Neuroscience
An In Vivo Blood-brain Barrier Permeability Assay in Mice Using Fluorescently Labeled Tracers

Vivo에서 혈액-뇌 장벽 침투성 분석 결과 사용 하 여 마우스에 붙일 추적기 표시

Full Text
26,531 Views
09:35 min
February 26, 2018

DOI: 10.3791/57038-v

Kavi Devraj1,2, Sylvaine Guérit1, Jakranka Macas1, Yvonne Reiss1

1Institute of Neurology (Edinger Institute),Goethe University Hospital, 2Pharmazentrum Frankfurt, Institute for General Pharmacology and Toxicology,Goethe University Hospital

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study presents a method for assessing mouse brain vascular permeability using intraperitoneally injected fluorescent tracers. It aims to investigate blood-brain barrier dysfunction, relevant in conditions such as stroke and Alzheimer's disease, by providing quantitative and visual data on neurovascular permeability.

Key Study Components

Area of Science

  • Neuroscience
  • Vascular Biology
  • Biomedical Research

Background

  • Assessing blood-brain barrier dysfunction is critical for understanding various neurological disorders.
  • The use of fluorescent tracers allows for both quantitative and qualitative analysis of permeability.
  • This method can provide insights on recovery from vascular dysfunction after therapy.
  • Implications extend towards the diagnosis and treatment of brain edema occurring in multiple diseases.

Purpose of Study

  • To develop a reliable assay for measuring vascular permeability in mouse brain models.
  • To evaluate therapeutic interventions aimed at restoring blood-brain barrier functionality.
  • To facilitate deeper investigations into the underlying mechanisms of neurovascular permeability changes.

Methods Used

  • This study employs an intraperitoneal injection method using fluorescent tracers.
  • A mouse model is utilized to examine the integrity of the blood-brain barrier.
  • Concurrent quantitative assessment of permeability is performed via fluorometry, alongside fluorescence microscopy for regional visualization.
  • The complete procedure, from injection to analysis, takes approximately 5–6 hours for 10 mice.
  • Detailed steps include anesthesia, cardiac perfusion, tissue harvesting, and subsequent fluorescence measurements.

Main Results

  • The method allows for effective quantification of blood-brain barrier permeability.
  • Fluorescent microscopy provides visual confirmation of tracer localization and permeability assessments.
  • The procedure has shown potential applicability in studying recovery processes following various neurological injuries.

Conclusions

  • This study demonstrates a specific, efficient assay for examining vascular permeability in mouse models.
  • It enables researchers to further explore therapeutic impacts on blood-brain barrier integrity.
  • The method contributes to understanding the mechanisms of vascular dysfunction in neurological disorders.

Frequently Asked Questions

What are the advantages of using this permeability assay?
This assay provides a quantitative approach to measure vascular permeability and allows for both fluorometric and microscopic methods for comprehensive analysis.
How is the mouse model prepared for the assay?
Mice are injected with a fluorescent tracer, deeply anesthetized, and undergo cardiac perfusion before tissue harvesting for analysis.
What types of data can be obtained from this method?
The method yields quantitative permeability data from fluorometric readings and detailed visualizations from fluorescence microscopy.
How can this technique be applied in research?
It can be used to study the blood-brain barrier's response to treatments and its role in various neurological diseases, like strokes or brain tumors.
Are there any limitations to this method?
The assay's effectiveness relies on proper perfusion technique and timely processing, which requires careful attention to procedural details.
What are the key safety considerations for handling mice during the procedure?
Ensure adherence to institutional animal care protocols, including proper anesthesia and humane treatment throughout the procedure.

여기 우리는 마우스 뇌 혈관 침투성 분석 결과 형광 추적기 관류 뇌혈관 장애의 동물 모델에 적용 되는 다음의 복 주사를 사용 하 여 현재. 한 반의 두뇌 양적 침투성을 평가 하 고 추적 프로그램 시각화/immunostaining에 대 한 다른 사용 됩니다. 절차 10 쥐에 대 한 5-6 시간 걸립니다.

이 절차의 전반적인 목표는 동물 모델에서 혈액 뇌 장벽 기능 장애를 평가하기 위해 형광 표지된 추적자를 사용하여 마우스의 뇌 혈관 구조의 투과성을 평가하는 것입니다. 이 방법은 질병의 신경 혈관 투과성 및 치료 시 회복과 관련된 혈액 뇌 장벽 분야의 주요 질문에 답하는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 방법의 가장 큰 장점은 간단하고 정량적이라는 것입니다.

이는 정량적 형광 측정법(fluometrictry)에 의한 투과성 평가와 지역 방어를 위한 형광 현미경 검사의 동시 평가 가능성을 제공합니다. 이 기술의 의미는 뇌종양, 뇌졸중 및 알츠하이머병을 포함한 여러 신경 장애의 진단 및 치료로 확장되는데, 이러한 질병은 생명을 위협하는 뇌부종 및 주요 치료 대상으로서의 BBD 기능 개선과 관련이 있기 때문입니다. 절차의 일부를 시연하는 것은 연구소의 과학 기술 책임자인 Miss Jadranka Macas가 될 것입니다.

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