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당뇨병 토끼에서의 뒷 사지의 전 임상 모델
당뇨병 토끼에서의 뒷 사지의 전 임상 모델
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JoVE Journal Medicine
Preclinical Model of Hind Limb Ischemia in Diabetic Rabbits

당뇨병 토끼에서의 뒷 사지의 전 임상 모델

Full Text
9,997 Views
07:34 min
June 2, 2019

DOI: 10.3791/58964-v

Andrew D. Sligar1, Gretchen Howe2, Julia Goldman3, Patricia Felli2, Varsha Karanam1, Richard W. Smalling2,4, Aaron B. Baker1,5,6,7

1Department of Biomedical Engineering,University of Texas at Austin, 2Division of Cardiology,University of Texas McGovern Medical School, 3Center for Laboratory Animal Medicine and Care,UT Health Science Center at Houston, 4Memorial Herman Heart and Vascular Center,Texas Medical Center, 5Institute for Cellular and Molecular Biology,University of Texas at Austin, 6The Institute for Computational Engineering and Sciences,University of Texas at Austin, 7Institute for Biomaterials, Drug Delivery and Regenerative Medicine,University of Texas at Austin

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Summary

우리는 고 지 혈 증 및 당뇨병을 가진 토끼에 있는 말 초 허 혈을 유도 하기 위하여 이용 된 외과 절차를 기술 합니다. 이 수술은 환자의 말 초 동맥 질환에서 경험 하는 조건에 대 한 전 임상 모델 역할. 혈관 조 영 법은 또한 관류의 도입 된 허 혈 및 회수의 정도를 측정 하는 수단으로 서 기술 된다.

Transcript

말초 동맥 질환에 대한 재생 치료는 매우 유익할 것이며이 동물 모델은 실험 치료가 인간 환자에서 작동 할 수 있는지 여부를 더 잘 테스트 할 수 있습니다. 우리의 절차는 개선 된 모델을 제시하는 것을 목표로합니다. 당뇨병이나 고지혈증 환자에서 발생하는 치료 저항을 보다 정확하게 복제하는 것입니다.

이 동물 모델은 말초 허혈에 대한 새로운 치료법을 테스트하는 데 사용할 수 있으며 허혈에 대한 신생 혈관화를 손상시킨 전임상 모델을 제공합니다. 마취 된 4 ~6 개월 된 당뇨병 및 고지성 토끼에서 뒷발 핀치에 대한 응답의 부족을 확인 한 후, 기관의 오른쪽에 4 ~ 5 센티미터 긴 절개를하고 오른쪽 일반적인 경동맥을 노출하는 무딘 해부를 사용하여 숫자 15 블레이드와 메스를 사용합니다. 작은 Weitlaner re트랙터를 사용하여 절개를 열고 경정맥과 미주 신경에서 경동맥을 조심스럽게 분리하십시오.

경동맥이 신경과 경정맥에서 완전히 분리되면, 노출된 동맥의 근위 및 단종 에 4-O 실크 봉합사를 놓고 외과 의사의 매듭과 4 평방 매듭으로 경동맥의 말단 끝을 묶습니다. 근부 끝에, 필요에 따라 혈관 실리콘 넥타이를 사용하여 선박의 조임 또는 느슨해질 수 있습니다. 다음으로, 혈관 확장을 촉진하고 신경 자극을 줄이기 위해 노출 된 경동맥 및 신경을 따라 1 %의 리도카인약 0.5 밀리리터를 적용하십시오.

헤파린 IV의 500 개의 국제 단위를 관리하십시오.4 인치 와이어 삽입 도구를 동맥에 놓습니다. 내림차순 대동맥의 일리악 문장에서 대동맥 분비화에 삽입 도구를 통해 0.014 인치를 공급하고 와이어 위에 세 개의 프랑스 피그 테일 혈관 관증 카테터를 진행합니다. 피그테일 카테터를 내림차순 대동맥의 일리악 문장에서 대동맥 분비화까지 2센티미터 의 근위체로 전진시키고, 일곱 번째 요추와 첫 번째 대목 척추 사이에 카테터의 끝을 배치한다.

콘트라스트에이전트의 2~4밀리리터를 수동으로 주입하여 카테터의 위치를 테스트합니다. 올바른 위치 지정이 확인되면 카테터를 통해 100 마이크로그램의 니트로글리세린을 자궁 내 주사하여 혈관 확장을 증가시킵니다. 그런 다음 카테터를 통해 0.8에서 1 밀리리터를 투여하여 혈관 확장을 돕고 카테터를 분리된 식염수로 플러시합니다.

자동 혈관 주사기용 튜브를 카테터에 부착하여 라인에서 공기를 제거하십시오. 자동화된 혈관 조인터를 사용하여 초당 3밀리리터에서 카테터를 통해 9밀리리터의 콘트라스트 배지를 전달하고 초당 6프레임의 디지털 감산 혈관조영예를 수행합니다. 직렬 이미지를 선택하고 영하 40%의 설정을 사용하여 혈관사진의 이미지를 변경하여 뼈의 모양을 최소화하고 대조적으로 혈관 관류의 전체 그림을 캡처합니다.

대퇴 동맥을 분리하려면 숫자 15 메스 블레이드를 사용하여 오른쪽 대퇴 동맥에 세로 피부 절개를하고 절개가 인구 인대에서 열등하게 확장되어 슬개골과 근간이 되는 부위에서 끝납니다. 무딘 해부를 사용하여 대퇴 동맥을 노출하고 Weitlaner re트랙터와 절개를 엽니다. 신경 자극을 줄이고 혈관 확장을 촉진하기 위해 로컬로 1 %의 약 0.5 밀리리터를 적용하십시오.

열등한 상복부, 깊은 대퇴, 측면 둘레, 피상적 상복부 동맥을 포함하여 모든 가지와 함께 대퇴동맥의 전체 길이를 해방하기 위해 조직의 무딘 해부를 계속한다. 포라이트 및 수페누스 동맥뿐만 아니라 외부 장악 동맥을 따라 해부하여 조직 손상으로부터 보호하기 위해 식염수로 부위를 주기적으로 수분화합니다. 대퇴골 동맥을 대퇴 정맥과 신경에서 조심스럽게 분리하고 두 개의 4-O 실크 봉합사를 대퇴동맥에 놓고 봉합사 사이에 충분한 공간을 두어 동맥을 절단할 수 있도록 합니다.

그런 다음 작은 Metzenbaum 가위를 사용하여 회개 동맥의 두 가지 관계 사이를 잘라냅니다. 동맥이 사페누스와 포플라이트 동맥을 형성하기 위해 분기하는 곳에서 대퇴 동맥을 소비하고, 근교적으로 작동하며, 모든 측면 가지를 묶어 대퇴동맥의 나머지 부분을 과류 동맥 바로 아래에 소비합니다. 반복 혈관 조영술의 경우 3mm 스테인레스 스틸 볼장착된 시트를 사용하십시오.

스테인레스 스틸 볼을 사두근 근육의 상부에 4-O 실크 봉합사로 부착합니다. 제자리에 있을 때 피부를 공 위로 당깁니다. 혈관 확장을 증가시키기 위해 카테터를 통해 니트로 글리세린 100 마이크로 그램의 내동맥 주입을 관리합니다.

필요한 경우, 혈관 확장을 돕고 헤파린화 된 식염수로 플러시하기 위해 카테터를 통해 1 % 리도카인의 0.8 - 1 밀리리터를 투여하십시오. 동일한 설정에서 자동화된 혈관 조인터를 사용하여 또 다른 9밀리리터의 콘트라스트 배지를 주입합니다. 그런 다음 설명한 대로 다른 혈관 검사를 수행합니다.

절차가 끝나면 오른쪽 동맥에서 카테터를 제거하고 동맥 주변에 이미 배치 된 4-O 실크 봉합사를 사용하여 동맥을 묶습니다. 이어서 4-O 폴리디옥사논 또는 3-O 폴리글락틴 910 봉합사를 테이퍼 바늘에 연속 봉합봉 패턴으로 닫고 4-O 폴리디옥사논 또는 4-O 폴리글락틴 910 봉합사를 사용하여 매장된 연속 피자 수목 패턴의 역절단 바늘에 봉합사를 사용한다. 비 당뇨병 동물에서는 콜레스테롤이 높더라도 당뇨병 동물에 비해 마지막 시점에서 혈관그램의 허혈성 사지 및 혈관에서 혈압이 회복됩니다.

조직학적으로, 부종 및 허혈성 손상과 일치하는 근육 구조의 변화는 근육 섬유의 손실 또는 중단으로 관찰된다. 또한, PECAM 1 및 알파 평활근 액틴에 대한 면역염색을 조직 섹션에서 혈관의 수와 크기를 식별하는 데 사용될 수 있다. 도플러 초음파, 레이저 도플러 이미징, 적외선 전서조 및 MRI와 같은 다른 이미징 방법을 추가하여 허혈성 사지 재퍼퓨전의 추가 모니터링을 위해 첨가될 수 있다.

치료 저항의이 통합으로, 우리의 모델은 말초 동맥 질환에 대한 새로운 치료의 평가를 진행, 병들 상태에서 허혈을 더 정확하게 모방.

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약 문제 148 뒷 다리 허 혈 말 초 동맥 질환 말 초 혈관 질환 토끼 당뇨병 고 지 혈 증 혈관 조 영 술

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