F&#246;rster Resonance Energy Transfer Measurements in Living Plant Cells

Sonja Mich&#232;le Schmidtpott; Thorsten Seidel

doi:10.3791/62758

JoVE Journal
Biochemistry

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Förster Resonance Energy Transfer Measurements in Living Plant Cells

살아있는 식물 세포에서 Förster 공명 에너지 전송 측정

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06:53 min

June 28, 2021

DOI: 10.3791/62758-v

Sonja Michèle Schmidtpott¹, Thorsten Seidel¹

¹Dynamic Cell Imaging, Biochemistry and Physiology of Plants, Faculty of Biology,Bielefeld University

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

생체 내 Förster 공명 에너지 전송 측정을 위한 표준 공초점 레이저 스캐닝 현미경을 설정하고 데이터 평가를 위한 프로토콜이 제공됩니다.

이 프로토콜은 민감하게 반응된 배출에 의한 FRET 실험을 보다 재현가능하고 비교할 수 있도록 하는 간단한 절차를 제공합니다. FRET의 주요 장점은 동적 프로세스를 해결할 수 있도록 실시간으로 측정됩니다. 전송 광증을 사용하여 레이저 조정을 위해, 현미경 의 밑에 전염된 프톱서를 포함하는 8웰 슬라이드를 놓습니다.

빈 우물을 선택한 후 라인 스캐닝 모드와 히스토그램 뷰를 선택하고 레이저 강도를 최소화하고 검출기 게인을 감지 가능한 배경 잡음으로 조정합니다. 다음으로, 해당 신호를 기록하는 동안 0.5 %의 단계에서 레이저 강도를 증가시다. 반사 모드를 사용하여 레이저 조정을 위해 빈 우물을 선택한 다음 반사 필터를 적용합니다.

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