Real-time Monitoring of Mitochondrial Respiration in Cytokine-differentiated Human Primary T Cells

Kasper M&#248;lgaard; Anne Rahbech; &#214;zcan Met; Inge Marie Svane; Per thor Straten; Claus Desler; Marlies J. W. Peeters

doi:10.3791/62984

사이토카인 분화된 인간 일차 T 세포에서 미토콘드리아 호흡의 실시간 모니터링

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Immunology and Infection

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Real-time Monitoring of Mitochondrial Respiration in Cytokine-differentiated Human Primary T Cells

사이토카인 분화된 인간 일차 T 세포에서 미토콘드리아 호흡의 실시간 모니터링

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October 19, 2021

DOI: 10.3791/62984-v

Kasper Mølgaard*¹, Anne Rahbech*¹, Özcan Met¹, Inge Marie Svane¹, Per thor Straten^1,3, Claus Desler², Marlies J. W. Peeters¹

¹National Center for Cancer Immune Therapy, Department of Oncology,University Hospital Herlev, ²Department of Cellular and Molecular Medicine, Center for Healthy Aging,University of Copenhagen, ³Department of Immunology and Microbiology, Inflammation and Cancer Group,University of Copenhagen

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

대사 적응은 분화, 지속성 및 세포 독성을 지시하기 때문에 T 세포의 기본입니다. 여기서, 생체외 사이토카인-분화된 인간 일차 T 세포에서 미토콘드리아 호흡을 모니터링하기 위한 최적화된 프로토콜이 제시된다.

미토콘드리아 대사는 T 세포 내구성과 기억의 필수 조절자입니다. 따라서 미토콘드리아 호흡을 측정하는 것은 T 세포의 특성에 대한 중요한 통찰력을 제공합니다. Seahorse 기계는 라벨링이 필요없이 살아있는 인간 일차 T 림프구에서 실시간으로 미토콘드리아 호흡의 다양한 요소를 측정 할 수 있습니다.

이 방법은 암 면역 요법 성공의 중요한 예측 인자 인 T 세포 적합성 및 기억 잠재력을 모니터링하는 데 매우 적합합니다. 시작하기 위해, 백만 세포 당 12.5 마이크로리터의 비드를 마이크로원심분리 튜브로 옮기고 튜브 내의 비드 12.5 마이크로리터 당 12.5 마이크로리터의 PBS를 첨가함으로써 CD3/CD28 비드를 세척한다. 이어서, 마이크로원심분리 튜브를 적합한 자석 상에 일분 동안 놓고, 완충제를 버리고, 비드를 원래 부피의 T 세포 배지에 재현탁시킨다.

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