비외상성 뇌실내 출혈 설치류 모델의 두개내압 모니터링

이 프로토콜은 설치류에서 비외상성 뇌실내 출혈 후 두개내압, 평균 동맥압 및 뇌관류압을 측정하는 방법을 설명합니다. 두개내 및 평균 동맥압은 각각 쥐의 피질과 대퇴 동맥에 삽입된 광섬유 센서로 정확하고 안정적으로 측정할 수 있습니다. 여기에 설명 된 기술은 뇌실 내 출혈 환자가 침습적 두개 내압 모니터링이 필요한 경우 임상 환경으로 변환됩니다.

이 연구의 목표는 뇌실내 IVH 후 ICP, MAP 및 CCP를 객관적으로 모니터링하여 IVH 동물 모델을 확립하여 저자가 IVH에 의해 유도 된 ICP가 후속 기억 기능 장애에 미치는 영향에 초점을 맞춘 향후 실험에서이를 추가로 적용 할 수 있도록하는 것이 었습니다. 주요 어려움에는 광섬유 센서가 작기 때문에 정밀도가 포함될 수 있습니다. 대퇴 동맥 박리는 또한 일부, 특히 미세 수술 기술에 사용되지 않는 사람들에게 도전이 될 수 있습니다.

쥐를 마취 한 후 직장 온도계를 삽입하여 온도를 지속적으로 모니터링합니다. 머리와 대퇴골 부위의 머리카락을 자르고 수술 전에 Betadine과 70 % 알코올을 세 번 번갈아 가며 피부를 준비하십시오. 인공호흡기에서 쥐를 일시적으로 제거하고 50밀리리터 주사기에 연결된 PE-10 튜브로 분비물을 흡인하여 축적된 호흡기 분비물을 흡인합니다.

멸균 인공 눈물 눈 연고로 눈을 보호하십시오. 두피 절개 전에 국소 부피바카인을 피부와 피하 조직에 주사하십시오. 쥐를 정위 프레임과 이어 바의 경향이있는 위치에 놓습니다.

15 블레이드 메스로 정중선을 따라 1.5cm 두피 절개를하십시오. 지혈을 위해 거즈로 약한 압력을 가하십시오. 멸균면 팁 애플리케이터를 사용하여 브레그마 랜드 마크가 보일 때까지 골막과 두개골을 분리하십시오.

스테레오택시를 사용하여 브레그마를 찾아 표시하고 브레그마 뒤쪽 1.4밀리미터, 음의 0.9밀리미터에 두 개의 양측 버 구멍의 위치를 표시합니다. 휴대용 드릴을 사용하여 오른쪽과 왼쪽 반구에 두 개의 작은 두개골 버 구멍을 만듭니다. 여분의 뼈 조각을 멸균 젖산 링거 용액으로 관개하십시오.

우반구에서 버 구멍 높이에 22게이지 가이드 캐뉼러를 배치하여 캐뉼러를 통해 28게이지 바늘을 오른쪽 측심실 깊이에 삽입하여 뇌실내 출혈을 만듭니다. 광섬유 압력 센서를 판독 장치에 연결합니다. 판독 장치를 켜고 선택한 단위가 수은 밀리미터 단위인지 확인하십시오.

그런 다음 판독 장치가 0을 읽고 사용할 준비가 될 때까지 젖산 링거 용액이 담긴 작은 비커에 팁을 담그고 센서를 프라이밍합니다. 왼쪽 반구에서 ICP의 실시간 모니터링을 위해 압력 센서를 피질에 2-3mm 깊이로 부드럽게 삽입합니다. ICP 모니터를 삽입 한 후 왼쪽 허벅지와 사타구니 부위에 쉽게 접근 할 수 있도록 쥐의 아래쪽 몸통을 돌립니다.

멸균 준비 및 국소 부피 바카 인 투여 후 15 칼날 메스로 뒷다리 위에 1.5cm 피부 절개를하십시오. 지혈제로 왼쪽 대퇴 동맥을 표면적으로 해부 한 다음 현미경으로 미세한 팁이있는 집게를 사용하여 더 깊은 층을 해부합니다. 인접한 동맥을 찾는 데 도움이 되도록 깊고 푸른 대퇴 정맥을 식별합니다.

3-0 실크 봉합사를 사용하여 원위 대퇴 동맥을 묶고 대퇴 동맥의 근위 부분에 임시 금속 클립을 놓습니다. 판독 장치에 연결된 두 번째 광섬유 압력 센서가 이미 프라이밍되어 있습니다. 압력 센서를 PE-50 튜브에 삽입하면 Tuohy Borst에 삽입된 다음 닫힙니다.

Tuohy Borst를 한쪽 끝의 1mm 주사기에 연결된 3방향 스톱콕과 다른 쪽 끝에 PE-22 튜브가 있는 50게이지 바늘에 연결합니다. 현미경으로 마이크로 가위로 2mm 대퇴 동맥 절개술을 만들고 나머지 설정에 연결된 PE-50 튜브로 캐뉼러링합니다. 1mm 주사기를 사용하여 500 마이크로 리터의 혈액을 흡입하고 3 방향 스톱 콕을 돌려 압력 센서가 MAP을 읽도록합니다.

PE-28 튜브에 연결된 50게이지 뇌실내 바늘을 IVH 동물의 흡인 혈액과 차량 제어 동물의 수유 링거로 프라이밍합니다. 그런 다음이 바늘을 오른쪽 측심실 깊이까지 가이드 캐뉼러에 삽입하십시오. 분당 100 마이크로리터의 속도를 사용하여, 엄지손가락으로 1 밀리미터 주사기를 펌핑하여 혈액, 또는 200 마이크로리터의 멸균 젖 링거 용액을 우측 측심실에 주입한다.

ICP, 동맥 혈압 및 직장 온도를 모니터링하고 기록합니다. 주입 후 ICP 및 MAP 값을 모니터링하고 기록합니다. 뇌실내 주사를 마친 후 대퇴 동맥에 삽입 된 압력 센서가 들어있는 PE-50 튜브를 빼내고 임시 클립을 대퇴 동맥에 적용하여 출혈을 방지합니다.

3-0 실크 봉합사를 사용하여 대퇴 동맥의 근위 부분을 묶고 3-0 실크를 사용하여 중단 된 방식으로 대퇴골 절개를 닫습니다. ICP 모니터에서 뇌실 내 바늘로 가이드 캐뉼러를 제거합니다. 버 구멍을 뼈 왁스로 밀봉하십시오.

그리고 3-0 실크 봉합사로 두개골 절개를 중단하십시오. 국소 부피바카인을 절개 부위에 바르고 카프로펜 킬로그램당 0.5밀리그램을 주사합니다. 흉골 누운 자세를 유지하기에 충분한 의식을 회복 할 때까지 동물을 방치하지 마십시오.

쥐가 감독하에 수술 후 완전히 회복 할 수 있도록하고 회복 후 음식과 물을 자유롭게 이용할 수있는 집 케이지로 되돌립니다. 가짜 그룹을 제외하고, ICP는 IVH 및 비히클 대조군에서 뇌실내 주사 동안 유의하게 증가했다. ICP는 차량 대조군에 비해 IVH 그룹에서 더 높았습니다.

그런 다음 ICP는 해당 동물 그룹에서 뇌실 내 주사 후 5 분 이내에 빠르게 감소하고 정상화되었습니다. MAP는 시술 전반에 걸쳐 유사하게 유지되는 반면 CPP는 혈액 또는 젖산 링거 용액을 뇌실 내 주사하는 동안 감소하는 것으로 관찰되었습니다. 수술의 중요한 단계에는 버 구멍의 정확한 위치와 드릴링 및 대퇴 동맥 절개술이 포함됩니다.

위에서 언급한 단계를 면밀히 수행하여 센서가 압력 변화를 정확하게 판독하는 작업을 수행할 수 있도록 해야 합니다.