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쥐 관절염 조직에서 Primary Synovial Macrophages and Fibroblasts의 분리 및 배양
쥐 관절염 조직에서 Primary Synovial Macrophages and Fibroblasts의 분리 및 배양
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JoVE Journal Biology
Isolation and Culture of Primary Synovial Macrophages and Fibroblasts from Murine Arthritis Tissue

쥐 관절염 조직에서 Primary Synovial Macrophages and Fibroblasts의 분리 및 배양

Full Text
10,650 Views
09:18 min
February 24, 2023

DOI: 10.3791/65196-v

Noritaka Saeki1,2, Yuuki Imai2,3

1Division of Medical Research Support, Advanced Research Support Center,Ehime University, 2Division of Integrative Pathophysiology, Proteo-Science Center,Ehime University, 3Department of Pathophysiology, Graduate School of Medicine,Ehime University

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study presents a modified protocol for the isolation of synovial macrophages and fibroblasts from murine inflammatory arthritis tissue, addressing the challenges of obtaining these specific cell types.

Key Study Components

Research Area

  • Inflammatory arthritis
  • Cell biology
  • Macrophage and fibroblast biology

Background

  • Cell-based assays are vital for clarifying molecular functions in arthritis studies.
  • Existing protocols tend to overlook specific macrophage responses in arthritis tissue.
  • Isolation methods for primary synovial cells require improvement for better experimental outcomes.

Methods Used

  • Isolation and expansion protocols for macrophages and fibroblasts.
  • Murine models of inflammatory arthritis.
  • Centrifugation and digestion techniques for cell isolation.

Main Results

  • A refined method allowed for the successful isolation and high purity of synovial macrophages and fibroblasts.
  • RTQ-PCR confirmed the purity of the isolated cell populations.
  • The improved protocol enhances the study of pathogenic mechanisms in rheumatoid arthritis.

Conclusions

  • The developed protocol will support future research into the cellular mechanisms underlying inflammatory arthritis.
  • This study is significant for advancing biological research on synovial tissue responses in arthritis.

Frequently Asked Questions

What types of cells are isolated using the new protocol?
The protocol isolates synovial macrophages and fibroblasts from inflammatory arthritis tissue.
Why is isolating these specific cell types important?
These cell types are crucial for understanding the molecular mechanisms involved in arthritis pathogenesis.
What techniques are used in the isolation process?
The process involves centrifugation and enzymatic digestion of tissue samples.
How was the purity of the isolated cells validated?
Purity was assessed using RTQ-PCR to analyze the expression of specific cell markers.
What advantages does this protocol offer?
The protocol is simple, reproducible, and results in high-purity isolated cells, facilitating co-culture experiments.
Who can benefit from this research?
Researchers studying rheumatoid arthritis and related inflammatory diseases will find this protocol beneficial.
Is the method applicable to other organisms?
The study primarily focuses on murine models, but further research could explore broader applications.

본 연구는 쥐의 염증성 관절염 조직으로부터 활막 대식세포 및 섬유아세포를 분리하기 위한 수정된 프로토콜을 제공한다.

분자 기능을 명확히 하기 위해서는 세포 기반 분석이 필요합니다. 관절염 연구에서 일차 세포를 분리하는 방법은 활막 섬유아세포에서는 잘 확립되어 있지만 활막 대식세포에서는 확립되어 있지 않습니다. 따라서 우리는 관절염 모델에서 활막 대식세포와 활막 섬유아세포를 모두 분리하고 확장하는 프로토콜을 개발했습니다.

쥐 관절염 조직의 일차 활막 섬유아세포는 관절염 발병기전에서 분자 메커니즘의 해명에 기여했습니다. 한편, 골수 유래 대식세포, 혈액 단핵구 유래 대식세포 및 대식세포 세포주는 관절염 연구를 위한 대식세포 자원으로 자주 사용되어 왔다. 대식세포는 미세 환경과 관련된 기능을 획득할 수 있기 때문에 대식세포의 일반적인 공급원은 관절염 조직에 특이적인 반응이 부족할 수 있습니다.

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