Rozwarstwienie jelita środkowego i gruczołów ślinowych od Ae. Komary aegypti

Sekcja tkanek jelita środkowego i gruczołów ślinowych komarów wymaga wcześniejszego przygotowania roztworu 1X Fosforanu Buforowanego Solą Fizjologiczną (1X PBS) i znieczulenia komarów poprzez poddanie ich działaniu temperatury 4°C, aż do unieruchomienia. Komary pozostają znieczulone poprzez umieszczenie na szalce Petriego, która jest utrzymywana w chłodzie na lodzie. Inne wymagane materiały to: mikroskop świetlny wyposażony w obiektyw 10x, pipetor, kleszczyki z cienką końcówką, szkiełko podstawowe, sondy z końcówką igły.

Rozwarstwienie jelita środkowego

1. Umieść kroplę 1X PBS na szklanym szkiełku podstawowym zamontowanym pod mikroskopem świetlnym.
2. Przenieś komara na przygotowane szkiełko, nakłuwając klatkę piersiową komara sondą z końcówką igły.
3. Przytrzymując komara sondą, użyj kleszczy, aby chwycić przedostatni segment brzucha i delikatnie oderwij brzuch komara jednym ruchem. Jelito środkowe powinno pozostać przyczepione do unieruchomionej klatki piersiowej.
4. Wyrzuć brzuch. Użyj kleszczy, aby odłączyć jelito środkowe od klatki piersiowej.

Rozwarstwienie gruczołów ślinowych

1. Umieść kroplę 1X PBS na szklanym szkiełku podstawowym zamontowanym pod mikroskopem świetlnym.
2. Podnieś komara, dźgając klatkę piersiową sondą z końcówką igły.
3. Oderwij nogi komara palcami.
4. Przenieś komara na zjeżdżalnię.
5. Usuń głowę komara za pomocą kleszczy.
6. Przytrzymując klatkę piersiową komara za pomocą sondy, użyj innej sondy, aby delikatnie docisnąć klatkę piersiową.
7. Gruczoły ślinowe znajdują się w przedniej części klatki piersiowej i można je odizolować za pomocą sondy z końcówką igły i odciąć przyczepy łączące gruczoł z klatką piersiową. Nienaruszone gruczoły ślinowe składają się z trzech płatów: dwóch płatów bocznych i płata przyśrodkowego.