Reakcja łańcuchowa polimerazy mikrosferycznej w celu amplifikacji jednoniciowego DNA

Uzyskaj około 25 mikrosfer poprzez zliczanie mikroskopowe za pomocą mikroskopu świetlnego o 40-krotnym powiększeniu. Następnie połącz wszystkie odczynniki zgodnie z opisem w protokole tekstowym. Umieść próbki w termocyklerze i rozpocznij asymetryczny PCR w odpowiednich warunkach.

Pobranie supernatantu po symetrycznym PCR jest jednym z najbardziej krytycznych etapów, ponieważ jest to główny proces generowania jednoniciowego DNA z mikrosferami.

Po amplifikacji dodaj osiem mikrolitrów bufora ładującego 6X do każdej próbki. Załaduj 15 mikrolitrów każdej próbki do 2% żelu agarozowego. Następnie wykonuj elektroforezę przy napięciu 100 woltów przez 35 minut w buforze 1X TAE.