Produkcja transgenów C. elegans poprzez rekombinację z markerem wybieralnym galK

Ogólnym celem poniższego eksperymentu jest wygenerowanie transgenów przy użyciu genomowego DNA robaka przeniesionego w klonie biblioteki SMID. Zastosowanie genomowego DNA pozwala zachować wszystkie natywne elementy kontrolne, takie jak wzmacniacze, w trzech głównych regionach UTR. Osiąga się to poprzez przeniesienie smidu FO do szczepu SW 1 0 6 E coli w celu wykorzystania indukowalnej maszyny rekombinacji czerwieni lambda.

W drugim kroku gen GAL K jest wprowadzany w żądane miejsce w smid światłowodowym, które oznacza miejsce, w którym zostanie umieszczony znacznik GFP lub tap. Następnie gen Gade jest zastępowany przez GFP lub tap TAC poprzez rekombinację homologiczną, po której następuje selekcja negatywna przy użyciu deoksygalaktozy w celu wytworzenia zmodyfikowanego transgenu. Uzyskano wyniki, które pokazują, że te transgeny mogą być tworzone szybko i skutecznie w oparciu o weryfikację insercji T za pomocą PCR kolonii.