Test rozgałęzień glikogenu w celu zmierzenia stopnia rozgałęzienia glikogenu
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Techniki biologiczne
0 wyświetleń • 3:50 min. • July 8th, 2025
Rozgałęzione polisacharydy, takie jak glikogen, zawierają reszty glukozy połączone liniowo wiązaniami alfa-1,4-glikozydowymi i w gałęziach wiązaniami alfa-1,6-glikozydowymi.
Aby określić stopień rozgałęzienia polisacharydów, zacznij od wodnego odczynnika barwiącego zawierającego jodek potasu, jod i chlorek wapnia. W warunkach wodnych jodek potasu i jod dają jony jodkowe.
W oddzielnych probówkach do mikrowirówek wymieszać odczynnik z polisacharydami o znanych strukturach rozgałęzionych i próbką glikogenu o niescharakteryzowanej strukturze.
Polisacharydy przyjmują struktury spiralne poprzez swoje wiązania alfa-1,4-glikozydowe. Jony jodkowe wiążą się z tym spiralnym rdzeniem, tworząc liniowe łańcuchy polijodkowe. Powoduje to tworzenie się kompleksu charge-transfer między polisacharydami a łańcuchami polijodku, w wyniku czego powstają kolorowe kompleksy polisacharyd-jodek.
Nierozgałęzione polisacharydy z dłuższymi łańcuchami polijodkowymi rozwijają niebieski kolor, podczas gdy rozgałęzione polisacharydy z krótszymi łańcuchami polijodkowymi rozwijają kompleksy żółtawe do pomarańczowo-brązowych. Chlorek wapnia zawarty w odczynniku intensyfikuje złożony kolor.
Przenieś mieszaninę do jedno
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych