Zapis in vitro oscylacji theta w hipokampie myszy

Zacznij od odizolowanego hipokampa myszy w konfiguracji nagrywania.

Obniż potencjał pola lokalnego lub elektrodę LFP do powierzchni hipokampa. Elektroda ta może wykrywać zmiany napięcia zewnątrzkomórkowego wskazujące na aktywność sieci neuronalnej.

Włóż elektrodę i obserwuj zmiany napięcia.

Włóż dalej do dolnej warstwy i obserwuj rytmiczną aktywność sieci neuronalnej, znaną jako oscylacje theta.

Umieść drugą elektrodę w pewnej odległości od pierwszej w tej samej warstwie, aby zarejestrować oscylacje theta w szerszym obszarze.

Monitoruj synchronizację oscylacji theta na znaczne odległości. To pokazuje łączność sieci neuronalnej.

Aby zarejestrować oscylacje theta w różnych warstwach hipokampa, zacznij od umieszczenia drugiej elektrody w górnej warstwie.

Stopniowo obniżaj elektrodę przez różne warstwy.

Rejestruj i obserwuj odwrócenie wzorca oscylacji, który odzwierciedla unikalny skład neuronalny i funkcję każdej warstwy hipokampa.

W tej procedurze opuść elektrodę LFP na powierzchnię hipokampa. Przeprowadź elektrodę LFP przez warstwę piramidalną i obserwuj wzrost zewnątrzkomórkowej aktywności impulsowej. Wykrywane jest pojedyncze wyładowanie z pojedynczych neuronów.

Obniż elektrodę jeszcze bardziej i zwróć uwagę, że wybicie zaczyna ponownie zanikać, gdy końcówka przechodzi w promienie. Zauważ, że wyraźnie widoczna oscylacja sieci w zakresie częstotliwości theta staje się widoczna i osiąga maksymalną amplitudę, gdy miejsce nagrywania jest obniżane przez promienie.

Aby przetestować właściwości przestrzenne spontanicznych oscylacji theta w regionie CA1, umieść drugą elektrodę LFP w miejscu CA1 i obserwuj, że oscylacje CA1 theta synchronizują się na duże odległości.

Aby przetestować właściwości oscylacji theta w warstwach hipokampa, pozostaw elektrodę referencyjną w miejscu promieniowania CA1. Zaczynając tuż nad warstwą oriens, opuść drugą elektrodę do piramidalnej warstwy komórki i przez radiatum. Obserwuj stopniowe odwrócenie sygnału LFP w poprzek warstwy piramidalnej.