Budowanie gniazd jako wskaźnik zdrowia i dobrostanu myszy laboratoryjnych

Ogólnym celem poniższego eksperymentu jest obserwacja wpływu eksperymentalnego leczenia na zachowania związane z budowaniem gniazd u myszy. Osiąga się to poprzez zapewnienie myszom materiału do gniazdowania, aby zapewnić im podłoże do wykazywania zachowania. W drugim kroku zwierzęta mogą wchodzić w interakcje z materiałem, co może skutkować budową gniazda.

Następnie gniazdo jest oceniane w celu oceny jego jakości i złożoności. Uzyskuje się wyniki, które pokazują efekt różnych interwencji w oparciu o jakość i złożoność gniazda. Główną przewagą tej techniki nad istniejącymi metodami, takimi jak prosta obserwacja, jest to, że testy wykorzystują wysoce umotywowane naturalne zachowania u myszy, które można łatwo zaobserwować, po stronie klatki, gdy myszy są nieaktywne.

Chociaż ta metoda może zapewnić wgląd w podstawowe aspekty zachowania myszy. Może być potencjalnie stosowany w innych systemach, takich jak ocena dobrostanu myszy lub zaburzeń spowodowanych chorobą neurologiczną lub zakaźną. Ogólnie rzecz biorąc, osoby, które dopiero zaczynają korzystać z tej metody, będą miały trudności, ponieważ próba zdobycia gniazda bez szablonu przyniesie zmienne dane Na początek zważ od ośmiu do 10 gramów materiału do gniazdowania.

Papier marszczony jest zalecany w celu uzyskania najlepszych rezultatów budowy gniazda, ale można użyć innych materiałów. Następnie zidentyfikuj klatki, które mają zostać ocenione w dowolnym dogodnym momencie. W przypadku badacza lub personelu zajmującego się opieką nad zwierzętami umieść papierowy materiał zagnieżdżający w klatce.

Materiał można położyć na wierzchu lub wymieszać z pościelą, aby zbadać szerszy repertuar zachowań. Wróć następnego dnia, siedem do dziewięciu godzin po zapaleniu świateł, aby ocenić gniazda w czasie, gdy myszy będą mniej aktywne. Korzystając ze wskazówek dotyczących punktacji gniazda, oceń każde gniazdo w skali od zera do pięciu.

Najpierw ustal, czy materiał został zmanipulowany przez myszy. Obejmuje to przetwarzanie lub przemieszczanie po klatce. Jeśli materiał jest nietknięty, całe gniazdo otrzymuje wynik zerowy.

Następnie ustal, czy większość materiału gniazdowego została zebrana w centralnym miejscu gniazdowania. Jeśli nie ma wyraźnego miejsca na gniazdo, a materiał został zmanipulowany, klatka otrzymuje wynik jeden. Jeśli obecne jest scentralizowane miejsce gniazdowania, traktuj je tak, jakby było kwadratem.

Każdy z czterech boków kwadratu może otrzymać osobną ocenę od dwóch do pięciu. Cztery wyniki są następnie uśredniane dla wyniku gniazda w klatce. Gniazdo otrzymuje dwa punkty, gdy jest płaskie i nie ma płytkich ścian.

Jeśli gniazdo ma lekko miseczkowany kształt, w którym ściana jest mniejsza niż połowa wysokości kopuły, otrzymuje trójkę. Przyznawany jest wynik cztery. Gdy ściana jest o połowę mniejsza od wysokości kopuły, ściany są wyższe niż połowa wysokości kopuły, które mogą, ale nie muszą, w pełni zakryć gniazdo, otrzymuje się wynik pięć.

Alternatywnie, punktacja może nastąpić trzy do czterech dni po dostarczeniu nowego materiału. Gdy często osiągane są szczytowe wyniki na czas integracji z testem gniazda lub odcieniem, pokrój dwucalowy kwadrat bawełnianego materiału gniazdowego na ćwiartki. Aby uzyskać cztery jednocalowe kwadraty testowe.

Przetestuj zwierzęta w ciągu pierwszych trzech godzin cyklu świetlnego, aby wykorzystać zwiększone zachowania związane z budowaniem gniazd przed bezczynnością w ciągu dnia. Gdy będziesz gotowy, otwórz pokrywę klatki i umieść jeden kwadrat testowy po przeciwnej stronie klatki niż główne miejsce gniazda. Badany materiał powinien być umieszczany w tym samym miejscu za każdym razem, gdy przeprowadzane jest badanie.

Umieść kwadrat testowy w miejscu, w którym jest widoczny z zewnątrz klatki. Wróć do klatki po 10 minutach, aby dokonać obserwacji. Jeśli kwadrat testowy nie znajduje się w swoim pierwotnym położeniu, klatka jest cyna dodatnia.

Jeśli kwadrat testowy pozostanie w pierwotnym miejscu, może być konieczne przeprowadzenie dodatkowych obserwacji w klatce i dodatkowych obserwacji, aby ustalić, czy myszy wymagają pomocy weterynaryjnej. W tym przykładzie budowanie gniazd oceniano w klatkach trzymanych w trzech różnych temperaturach otoczenia, ponieważ temperatura zwiększała wynik gniazda, zmniejszony kształt gniazda może identyfikować grupy samców myszy o wysokim poziomie agresji, co może skutkować zranieniem. W ciągu pięciotygodniowego eksperymentu stwierdzono, że wynik gniazda ujemnie koreluje ze średnią liczbą rannych sześciu czarnych samców myszy C 57.

Dane te pokazują, że bolesny zabieg chirurgiczny może zmienić zachowanie związane z budowaniem gniazda. Liczba zwierząt z negatywnym odcieniem wzrosła o około 60% po bolesnej operacji, ale myszy wracają do dodatniego poziomu wyjściowego trzy dni po operacji Podczas próby tej procedury. Ważne jest, aby pamiętać, że chociaż wykazano, że metoda punktacji ma wysoką wiarygodność między oceniającymi i między oceniającymi, ta zmienność w punktacji może mieć wpływ na wyniki.

Dlatego upewnij się, że odpowiednio przeszkoliłeś i oceniłeś zmienność swoich wyników przed rozpoczęciem eksperymentu, postępując zgodnie z procedurą. Inne metody, takie jak bezpośrednia obserwacja lub testy behawioralne, mogą być wykonane w celu udzielenia odpowiedzi na dodatkowe pytania dotyczące zdrowia i dobrostanu lub deficytów behawioralnych myszy. Po obejrzeniu tego filmu powinieneś dobrze zrozumieć, jak podzielić gniazdo na ćwiartki, jak ocenić gniazdo i jak zarządzać czasem na integrację z testem zagnieżdżenia.