Nowy model łagodnego urazowego uszkodzenia mózgu u młodych szczurów

Ogólnym celem tej procedury jest wywołanie łagodnego urazowego uszkodzenia mózgu u młodych szczurów. Osiąga się to poprzez uprzednie przygotowanie platformy indukcyjnej urazu. Następnie znieczulonego szczura umieszcza się twarzą w dół na naciętej folii aluminiowej.

Po umieszczeniu na miejscu upuszcza się ciężar, aby wygenerować uderzenie w głowę. Zwierzę jest następnie umieszczane w pozycji leżącej na plecach i rejestrowany jest czas potrzebny na samopisanie. Wydajność następnego dnia jest mierzona na teście belki kroczącej.

Tak więc główną zaletą tej techniki w porównaniu z innymi jest to, że zwierzęta są znieczulane tylko na krótko. Jest to zamknięty uraz głowy, który pozwala nam powtórzyć uraz u tego samego zwierzęcia kilka razy, a uraz ma komponent rotacyjny, który jest bardziej istotny klinicznie. Implikacje tej techniki rozciągają się na terapię wstrząsu mózgu u dzieci i łagodnego urazowego uszkodzenia mózgu, ponieważ model indukuje klinicznie istotne objawy w niejednorodny sposób, pokazując, że procedura będzie Irene Ma, technik w naszym laboratorium i harlene haha.

Na studiach licencjackich w naszym laboratorium. Aby ustawić aparat do łagodnego urazowego uszkodzenia mózgu, skonstruuj stolik w kształcie litery U wykonany z przezroczystego tworzywa sztucznego. Umieść gąbkę na dole sceny, aby zebrać zwierzę po upadku.

Następnie naciąć kawałek folii aluminiowej ostrą żyletką. Upewnij się, że nacięta folia aluminiowa utrzymuje ciężar ciała szczura, ale nie będzie przeszkadzać w przyspieszaniu po uderzeniu. Przyklej naciętą folię aluminiową na górze stolika tak, aby była tau, i umieść ją we właściwej pozycji pod rurką prowadzącą.

Ustaw rurkę prowadzącą tak, aby znajdowała się 3,5 centymetra nad folią aluminiową. Następnie przymocuj żyłkę do górnej części ciężarka. Umieść obciążnik wewnątrz rurki prowadzącej i zamocuj żyłkę tak, aby ciężarek wisiał 2,5 centymetra nad folią.

Ta wysokość zapobiega bezpiecznemu otrzymywaniu wielu trafień przez szczura. Przymocuj żyłkę do clamp stojak. Przeciągnij ciężar przez plastikową rurkę prowadzącą z żyłką wędkarską i przytrzymaj go na miejscu za pomocą kołka z kluczem imbusowym umieszczonym na wysokości 0.5 metra.

Na początek potwierdź głębokość sedacji u znieczulonego szczura i szybko połóż klatkę piersiową szczura na folii z głową bezpośrednio na ścieżce spadającego ciężaru. Gdy będziesz gotowy do rozpoczęcia, pociągnij kołek klucza imbusowego, aby ciężar mógł opaść pionowo przez plastikową rurkę prowadzącą. Po uderzeniu szczur szybko obróci się o 180 stopni i wyląduje w pozycji leżącej.

Natychmiast wyjmij szczura z gąbki do pobierania i nałóż miejscową lidokainę na głowę szczura za pomocą aplikatora z bawełnianą końcówką. Następnie umieść szczura w pozycji leżącej na plecach w czystej, ogrzewanej klatce. Obserwuj zwierzę, dopóki nie obudzi się ze znieczulenia i nie przewróci się z pozycji leżącej na plecach do pozycji leżącej.

Zapisz to jako czas zapisu wartości dla pozorowanej grupy kontrolnej z obrażeniami. Znieczul zwierzę i umieść je na scenie, jak pokazano wcześniej. Następnie usuń szczura z folii aluminiowej bez ciągnięcia zawleczki imbusowej i nałóż miejscowo lidokainę na głowę.

Umieść szczura w pozycji leżącej na plecach w czystej, ogrzewanej klatce i zapisz czas zapisu wartości. Na koniec wróć szczura do jego domowej klatki po odzyskaniu normalnego zachowania i powtórz z następnym zwierzęciem kontrolnym. 24 godziny po indukcji uszkodzenia mózgu należy zwrócić zwierzęta do sali zabiegowej.

Przenieś szczury do czystej klatki i umieść klatkę domową szczura. Na węższym końcu zwężającej się powierzchni belki, otwarta część klatki w kierunku szerokiego końca belki. Zwężająca się belka ma środkową platformę z małymi półkami, które zapewniają bezpieczeństwo.

Umieść kamerę wideo na szerokim końcu wiązki i dostosuj ostrość, aż będzie widoczna cała długość. Kiedy będziesz gotowy, umieść szczura na szerokim końcu zwężającej się belki i zachęć go do przejścia przez belkę w kierunku klatki domowej. Gdy szczur przekroczy belkę i wejdzie do klatki domowej, pozwól mu odpocząć przez co najmniej 60 sekund.

Aby wzmocnić lokalizację docelową, jest to próba numer jeden i nie jest uwzględniona w analizie. Następnie włącz kamerę wideo i pozwól szczurowi wykonać zadanie chodzenia po belce przez dodatkowe czasy, zachowując 62. okresy wzmocnienia w klatce domowej. Gdy szczur zakończy wszystkie próby, zwróć go do klatki domowej i przetestuj następne zwierzę.

Jeśli zwierzę spadnie z belki podczas badania, natychmiast je podnieś i umieść z powrotem na belce w miejscu, z którego spadło. Aby ocenić dane. Po przeprowadzeniu badania należy zanotować liczbę poślizgnięć stopy tylnej nogi oraz całkowity czas przejścia przez belkę dla każdej pojedynczej próby.

Na podstawie tych danych można obliczyć średnie wartości dla każdego zwierzęcia i grupy badanej. Ten wykres porównuje średnie różnice w czasie zapisywania wyników między młodymi szczurami, które doświadczyły pojedynczego uszkodzenia mózgu, w porównaniu z pozorowanymi kontrolami. Ranne szczury wykazywały znaczne wydłużenie czasu potrzebnego na pisanie z pozycji leżącej.

Tutaj pokazano średnią liczbę poślizgnięć stopy tylnej nogi podczas zadania chodzenia po belce dla młodych szczurów, które doświadczyły pojedynczego urazu. W porównaniu z pozorowanymi rannymi szczurami, ranne zwierzęta wykazywały znacznie więcej poślizgnięć stóp w poprzek belki w porównaniu z grupą kontrolną Po tej procedurze. Inne nieinwazyjne interwencje, takie jak terapia zabawą, mogą być następnie zbadane w celu ustalenia, czy takie interwencje są rzeczywiście w stanie złagodzić niektóre z deficytów społecznych, których doświadczają dzieci. Wstrząs.

Po obejrzeniu tego filmu powinieneś dobrze zrozumieć, jak bezpiecznie wywołać i wykryć łagodne urazowe uszkodzenie mózgu u młodych gryzoni. Można to powtarzać w wielu punktach czasowych.