Wzbogacanie w chemooporne komórki macierzyste raka jajnika z ludzkich linii komórkowych

Ogólnym celem tej procedury jest selekcja i wyizolowanie komórek macierzystych opornych na chemioterapię raka jajnika lub CSC. Osiąga się to poprzez najpierw fluorescencyjne znakowanie linii komórkowych raka jajnika białkiem czerwonej fluorescencji lub RFP i selekcję komórek dodatnich RFP za pomocą sortowania komórek aktywowanych fluorescencją lub faktów. Drugim etapem procedury jest leczenie linii komórkowych raka jajnika chemioterapeutykiem cisplatyną przez 72 godziny, a następnie hodowla pozostałych komórek w pożywce CSC.

Po dwóch dniach, sterydy nieprzylegające utworzą się. Następnie CSC są charakteryzowane za pomocą analizy ekspresji genów dla markerów komórek macierzystych, a CSC są analizowane pod kątem markerów powierzchniowych komórek za pomocą cytometrii przepływowej. Ostatecznie analizę CSC pod kątem odpowiedzi terapeutycznej uzyskuje się poprzez potraktowanie komórek cisplatyną lub paklitakselem i wykonanie testu MTT w celu zmierzenia żywotności.