25 stycznia 2018
Ten artykuł przedstawia protokół badania społecznego przenoszenia preferencji żywieniowych u myszy. Podkreślono zalety i możliwe zastosowania tej procedury, na przykład w wykrywaniu wczesnych zmian w modelach myszy z chorobą Alzheimera. Na zakończenie omówiono interpretację wyników w świetle krytycznych szczegółów.
Ogólnym celem tej procedury jest ocena siły społecznego przekazywania preferencji żywieniowych w badaniu społecznie indukowanej pamięci węchowej i wykrywaniu choroby Alzheimera. Metody te mogą pomóc odpowiedzieć na kluczowe pytania w dziedzinie neuronauki behawioralnej, takie jak to, w jaki sposób gryzonie komunikują się z innymi lub przekazują sygnały węchowe. Technika ta ma potencjał do diagnozowania choroby Alzheimera jako dysfunkcji poznawczych węchu we wczesnych stadiach choroby, może być przydatna w wykrywaniu choroby Alzheimera.
Przed rozpoczęciem społecznego przekazywania preferencji żywieniowych lub procedury STFP, zakop ciasteczko z kawałkami czekolady w losowym kącie czystej klatki dla osobników około jednego centymetra pod powierzchnią ściółki i umieść mysz obserwatora w klatce. Zapisz opóźnienie, aby znaleźć plik cookie z 15-minutowym odcięciem, aby wykluczyć deficyty wykrywania węchu i zapobiec czasochłonnym, niepotrzebnym testom STFP. Następnie opuść ściany, aby oddzielić prawą i lewą komorę i umieść jeden pojemnik wypełniony zwykłymi granulkami spożywczymi w każdym z dwóch rogów trzykomorowego aparatu.
Delikatnie umieść mysz obserwatora w środkowej komorze i pozwól badanej myszy przyzwyczaić się do aparatury przez 10 minut. Następnie otwórz przesuwane drzwi i pozwól badanemu myszowi swobodnie eksplorować całe urządzenie przez kolejne 10 minut. Następnego dnia opuść ściany, aby ponownie oddzielić prawą i lewą komorę, i umieść mysz demonstracyjną w drucianym kubku zabezpieczającym.
Umieść kubek w środkowej komorze i napisz skrót żywności, za pomocą której demonstrator został oznaczony, na pokrywie drucianego kubka skierowanego w stronę zamontowanej kamery. Delikatnie umieść badaną mysz w środkowej komorze i pozwól badanej myszy swobodnie eksplorować mysz demonstracyjna przez 30 minut. Pod koniec okresu eksploracji zważ każdą mysz i oznacz każde zwierzę zaobserwowanym identyfikatorem i smakiem.
Następnie usuń przegrody ścienne i umieść jeden pojemnik na żywność z wskazówką w jednym rogu aparatu trzykomorowego, a jeden pojemnik na żywność z nową, niepodpowiedzianą żywnością w innym rogu aparatu. Delikatnie umieść badaną mysz w środkowej komorze i pozwól jej swobodnie eksplorować całą arenę przez 120 minut. Następnie zmierz preferencje żywieniowe, ważąc pozostałe jedzenie.
W reprezentatywnej analizie fazy eksploracji społecznej myszy typu dzikiego nie wykazały żadnych różnic w całkowitej odległości przebytej lub czasie spędzonym z myszą demonstratorową w porównaniu z transgenicznymi myszami z chorobą Alzheimera. Podczas fazy badania preferencji żywieniowych zwierzę typu dzikiego pamiętało swój poprzedni kontakt z zapachem i wolało jeść więcej oraz spędzać więcej czasu z pasującym aromatyzowanym pokarmem, co wskazuje na nienaruszoną, społecznie indukowaną pamięć o jedzeniu. Zmutowane zwierzęta nie wykazywały jednak preferencji dla pokarmu z podpowiedziami w stosunku do nowego, niepodpowiadanego jedzenia, co wskazuje na zmniejszoną, społecznie wywołaną pamięć o jedzeniu.
Po opanowaniu tej techniki można ją wykonać w ciągu trzech godzin na jedną mysz badaną przez trzy kolejne dni, jeśli zostanie wykonana prawidłowo. Przed i po próbie wykonania tej procedury ważne jest, aby pamiętać o dokładnym wyczyszczeniu sprzętu i wnętrza areny, aby zapobiec odchyleniom węchowym między myszami. Technika ta opiera się na zjawisku naiwnego gryzonia obserwatora wykazującego zwiększoną preferencję dla określonego pokarmu po interakcji z demonstrowanymi gryzoniami, które jadły ten sam pokarm.
Chociaż metody te mogą zapewnić wgląd w uczenie się węchu i pamięć w transgenicznych modelach myszy choroby Alzheimera, mogą być również stosowane w innych mysich modelach zaburzeń neuropsychiatrycznych charakteryzujących się kondycją węchową i deficytami pamięci. Po obejrzeniu tego filmu powinieneś dobrze zrozumieć, jak oceniać społeczne ulepszenia preferencji żywieniowych u myszy.
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych
Niniejsza praca przedstawia protokół badania społecznej transmisji preferencji pokarmowych u myszy, kładąc nacisk na potencjalne zastosowania w wykrywaniu wczesnych zmian w modelach choroby Alzheimera. W badaniu omówiono interpretację wyników w świetle kluczowych szczegółów.
Testy behawioralne oparte na węchu, takie jak społeczna transmisja preferencji pokarmowych (STFP), dostarczają translacyjnie istotnych wyników służących do wczesnego wykrywania zmian neurodegeneracyjnych w modelach przedklinicznych. Integracja STFP z przepływem pracy na etapie odkrywania umożliwia mechanistyczną redukcję ryzyka oraz walidację celów terapeutycznych w portfelach badawczych nad chorobą Alzheimera (AD). Podejście to zwiększa pewność prognostyczną w identyfikowaniu fenotypów istotnych dla choroby przed wystąpieniem wyraźnego pogorszenia funkcji poznawczych.
Test STFP wpisuje się w kontinuum od wczesnych etapów odkryć do walidacji przedklinicznej w badaniach nad chorobami neurodegeneracyjnymi, stanowiąc pomost między badaniami nad mechanizmami a rozwojem translacyjnych biomarkerów.