Przewlekły brak snu u młodych myszy poprzez delikatne obchodzenie się z nim

Ta metoda może pomóc odpowiedzieć na kluczowe pytania w dziedzinie snu, takie jak wpływ przewlekłego ograniczenia snu podczas rozwoju poporodowego. Główną zaletą tej techniki jest to, że jest mniej stresująca niż inne techniki pozbawiania snu i może być łatwo stosowana przez cały okres rozwoju i kontynuowana w wieku dorosłym. Zacznij od przypisania każdej klatki do grupy pozbawionej snu lub grupy kontrolnej.

Upewnij się, że myszy mają dostęp do jedzenia i wody ad libitum i usuń wszelkie jedzenie, ściółkę lub przedmioty wzbogacające, które mogą ograniczać widok myszy. W przypadku grupy kontrolnej należy wyjąć buhaja z klatki hodowlanej w piątym dniu po urodzeniu i pozostawić matkę ze szczeniętami do momentu odsadzenia. Następnie przenieś myszy przydzielone do grupy kontrolnej do pokoju deprywacji snu i delikatnie szturchaj myszy pędzlem przez 10 minut dziennie przez czas trwania eksperymentu.

Po 10 minutach zwróć myszy do pomieszczenia dla zwierząt i nie przeszkadzaj im. Zacznij od wyjęcia buhaja z klatki hodowlanej w piątym dniu po urodzeniu i pozostaw matkę z młodymi do momentu odsadzenia. Przenoś myszy przypisane do grupy deprywacji snu do pokoju deprywacji snu codziennie podczas cyklu światła, gdzie będą monitorowane.

W tym czasie delikatnie szturchaj mysz pędzlem, jeśli podejrzewasz, że śpi, aż zaobserwujesz reakcję. Alternatywnie, odwróć myszy i przewróć je na plecy, aby zakłócić sen. Rozważ, że mysz śpi, jeśli wystąpi którakolwiek z następujących sytuacji: drgawki, brak aktywności lub zamknięte oczy.

Weź pod uwagę, że myszy nie śpią, jeśli się poruszają, próbują przewrócić się po leżeniu na plecach lub pielęgnują się. Jeśli matka zakrywa młode podczas braku snu, delikatnie odepchnij ją od szczeniąt, aby widok szczeniąt był nieograniczony. Kontynuuj protokół deprywacji snu aż do punktu końcowego eksperymentu.

Po zakończeniu trzygodzinnego okresu pozbawienia snu włóż z powrotem pościel i wszelkie jedzenie, które mogły zostać usunięte, i załóż pokrywę z powrotem na klatkę. Na koniec należy zwrócić klatki do pomieszczenia dla zwierząt do następnego dnia pozbawienia snu. Po miesięcznym okresie rekonwalescencji wyniki wykazały, że w teście towarzyskości samice z ograniczeniami snu spędzały więcej czasu na wąchaniu obcej myszy niż samice z grupy kontrolnej, a samce z ograniczeniami snu miały tendencję do spędzania więcej czasu na wąchaniu obiektu w porównaniu z samcami z grupy kontrolnej.

Co więcej, w fazie testów nowości społecznej, samice myszy z ograniczonym snem spędzały większą ilość czasu na wąchaniu nowej myszy niż samice z grupy kontrolnej. Próbując tej procedury, ważne jest, aby pamiętać o zwróceniu uwagi i natychmiastowym reagowaniu na zachowania przed snem, szczególnie u nowonarodzonych myszy, u których zapotrzebowanie na sen jest wysokie. Po tej procedurze można przeprowadzić inne metody, takie jak otwarte pole, rotarod, elevated plus labirynt i testy zachowań społecznych, aby odpowiedzieć na dodatkowe pytania, takie jak długoterminowe skutki behawioralne przewlekłego ograniczenia snu podczas rozwoju.