RESEARCH
Peer reviewed scientific video journal
Video encyclopedia of advanced research methods
Visualizing science through experiment videos
EDUCATION
Video textbooks for undergraduate courses
Visual demonstrations of key scientific experiments
BUSINESS
Video textbooks for business education
OTHERS
Interactive video based quizzes for formative assessments
Products
RESEARCH
JoVE Journal
Peer reviewed scientific video journal
JoVE Encyclopedia of Experiments
Video encyclopedia of advanced research methods
EDUCATION
JoVE Core
Video textbooks for undergraduates
JoVE Science Education
Visual demonstrations of key scientific experiments
JoVE Lab Manual
Videos of experiments for undergraduate lab courses
BUSINESS
JoVE Business
Video textbooks for business education
Solutions
Language
pl_PL
Menu
Menu
Menu
Menu
DOI: 10.3791/65386-v
Eridan Rocha-Ferreira1, Syam Nair1, Owen Herrock1, Erik Axel Andersson2, Carl Joakim Ek2, Carina Mallard2, Henrik Hagberg1
1Centre of Perinatal Medicine and Health, Institute of Clinical Sciences, Department of Obstetrics and Gynecology, Sahlgrenska Academy,University of Gothenburg, 2Centre of Perinatal Medicine and Health, Institute of Neuroscience and Physiology, Sahlgrenska Academy,University of Gothenburg
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This protocol highlights a reproducible retro-orbital injection method for intravenous drug administration in neonatal rats and mice. The technique facilitates compound delivery into the venous circulation, which is particularly crucial for preclinical studies mimicking neonatal care unit conditions.
Ten protokół ma na celu zademonstrowanie powtarzalnej drogi podawania dożylnego, która może być stosowana u szczurów i myszy przez cały okres noworodkowy. Procedura ta jest ważna dla przedklinicznych badań na gryzoniach, które mają na celu odzwierciedlenie podawania leków na oddziałach opieki neonatologicznej, głównie przy użyciu podawania dożylnego.
Iniekcja zaoczodołowa jest specjalistyczną metodą iniekcji stosowaną do podawania związków do krążenia żylnego. Badania na zwierzętach są ważnym krokiem w kierunku pracy klinicznej. W ramach badań na zwierzętach istnieje potrzeba podawania różnych rodzajów związków różnymi drogami.
Niektóre z tych dróg obejmują podskórne, dootrzewnowe i dożylne. Wstrzyknięcie dożylne jest najczęściej stosowaną drogą u noworodków przebywających na oddziale intensywnej terapii noworodków. Jednak w badaniach na gryzoniach, szczególnie u dorosłych gryzoni, rutynowo wykonuje się zastrzyki dożylne na żyłę ogonową.
U noworodków niezwykle trudno jest wykonać skuteczne i powtarzalne wstrzyknięcie do żyły ogonowej. Dlatego trasa retroorbitalna może być używana jako łatwiejsza alternatywa. Najpierw pokażemy, jak używać barwnika, błękitu trypanowego, tak aby widz mógł wyraźnie zobaczyć, jak barwnik wchodzi do krążenia żylnego.
Nowonarodzony szczur umieszcza się w pełnej narkozie, z głową leżącą na boku, spoczywającą nad źródłem światła, dzięki czemu oko i boczne unaczynienie są odsłonięte i widoczne. Igła jest wprowadzana z przodu oczodołu, co jest odpowiednikiem kantu przyśrodkowego. Wstrzykiwać roztwór delikatnym, płynnym i płynnym ruchem.
Aby lepiej odtworzyć tę procedurę, ważne jest zrozumienie anatomii żyły oczodołu. U szczura znajduje się sieć kilku żył tuż pod okiem, które umożliwiają łatwy i bezpośredni dostęp do splotu żylnego. U nowonarodzonych szczurów albinosów widoczne są również zarówno żyły skroniowe, jak i twarzowe.
Ta procedura może być wykonana w dokładnie ten sam sposób. U nowonarodzonych myszy. Użyj igły o rozmiarze od 29 do 31 około 0,30 milimetra.
W celu uzyskania dokładnych objętości należy pobrać roztwór do wstrzyknięcia z odpipetowanej objętości. Umieść zwierzęta na płaskiej powierzchni w pozycji bocznej. Wywołaj znieczulenie izofluranem całego ciała.
5% indukcji, 3% konserwacji. Sprawdź głębokość znieczulenia za pomocą metody odruchu wycofania ciągnięcia. Z głową skierowaną w prawo, podać wstrzyknięcie do prawej zatoki zaoczodołowej.
Wbić igłę pod kątem w dół z przodu oczodołu, odpowiednika środkowego kąta, pod kątem około 40 stopni. Kąt ten pozwala na skierowanie igły do tylnej części oczodołu. Wstrzyknąć delikatnym, płynnym i płynnym ruchem.
Odczekać chwilę przed wycofaniem igły, powoli, aby uniknąć przepływu wstecznego. Dla każdego zwierzęcia należy użyć nowej sterylnej strzykawki, aby uniknąć zakażenia. Umieść szczeniaka w pudełku regeneracyjnym, spoczywającego na chronionym urządzeniu grzewczym, w temperaturze około 35 do 37 stopni Celsjusza.
Poczekaj na powrót do zdrowia i sprawdź, czy nie ma oznak niepokoju, zanim zwrócisz szczenię do tamy. Technika ta została wykorzystana do podania znacznika biotyny-dekstranu do układu naczyniowego mózgu zwierząt, które przeszły krwotok z macierzy rozrodczej. Zwierzęta, które otrzymały zastrzyk z soli fizjologicznej jako kontrolę, nie wykazują widocznego zabarwienia naczyń krwionośnych w mózgu.
Udane wstrzyknięcie znacznika biotyny-dekstranu za orbitę pozwoliło na ocenę jego obecności w układzie naczyniowym mózgu w ciągu 10 minut po podaniu zaorbitalnym. Technika ta została następnie wykorzystana do wykrycia nieszczelności naczyniowej znacznika na poziomie poszczególnych naczyń krwionośnych u zwierząt z obrażeniami GMH. Wynik ten pozwala na przykład na ilościowe określenie urazu poprzez ilościowe określenie ilości naczyń krwionośnych, które przeciekają po uszkodzeniu mózgu GMH.
Ponadto procedura ta może być również wykonywana bez źródła światła, co czyni ją prostą, nieskomplikowaną i powtarzalną techniką, która umożliwia podawanie związku bezpośrednio do krążenia żylnego noworodków szczurów i myszy. Przy prawidłowym wykonaniu zabieg ten nie powinien powodować żadnych działań niepożądanych. Ten korzeń podania umożliwia wstrzykiwanie przeciwciał, komórek i innych związków bezpośrednio do krążenia sprzedawczego noworodków.
Ta droga ma większe znaczenie kliniczne w porównaniu z innymi drogami, takimi jak wstrzyknięcia dootrzewnowe lub podskórne.
Related Videos
04:50
Related Videos
26.1K Views
03:18
Related Videos
11.4K Views
05:58
Related Videos
21.5K Views
10:15
Related Videos
63.9K Views
05:17
Related Videos
61.9K Views
07:34
Related Videos
10.3K Views
06:49
Related Videos
9.5K Views
06:19
Related Videos
1.8K Views
02:39
Related Videos
2.9K Views
02:33
Related Videos
972 Views