Comportamento animal
- Fazendo Choice Chambers
- Antes de iniciar os experimentos, use um dos Sharpies da mesa de laboratório para traçar uma linha ao redor da circunferência do fundo de ambas as garrafas. Uma linha deve estar a 1 cm da base da garrafa e a outra deve estar a 1,5 cm da base da garrafa.
- Use uma lâmina de barbear para fazer um pequeno corte em cada frasco na marca.
- Em seguida, insira a tesoura e corte cuidadosamente ao longo da linha até que o fundo das garrafas seja removido completamente.
- Encaixe o fundo de uma garrafa no outro.
- Prenda as garrafas para fazer uma câmara segura.
- Use a lâmina de barbear e a tesoura para fazer um buraco no centro da câmara.
- Pegue um pedaço de fita adesiva e dobre a borda sobre si mesma para fazer uma aba e coloque a fita sobre o orifício. Nota: A aba ajuda na fácil remoção e recolocação da fita na câmara.
- Use o Sharpie para rotular um lado da câmara A e o outro lado B.
- Ao receber a colônia de Drosophila, faça uma contagem para garantir que haja 40 indivíduos vivos no frasco.
- Geotaxis ul class="lab-items">
- Para realizar um ensaio de geotaxia, primeiro coloque uma tampa de garrafa limpa e vazia em cada extremidade da câmara de escolha e vire o frasco para moscas de cabeça para baixo em sua tampa.
- Abra a aba da fita no centro da câmara de escolha.
- Insira o funil no orifício e bata todas as moscas na câmara. HIPÓTESES: A hipótese alternativa é que mais moscas estarão se movendo contra a gravidade, ou para cima, independentemente da orientação da câmara de escolha. Alternativamente, se as moscas são positivamente geotáticas, então mais moscas se moverão para baixo, ou com gravidade. A hipótese nula é que as moscas não terão preferência em relação à gravidade e se moverão aleatoriamente dentro da câmara.
- Assim que a Drosophila estiver na câmara, feche a aba da fita, gire a câmara para que ela fique verticalmente com o lado A na parte inferior e inicie o cronômetro.
- Imediatamente, conte o número de Drosophila que estão subindo e o número que está descendo. Registre esses dados para o ponto de tempo 0 na tabela.
- Após 30 segundos, gire a câmara para que o lado B fique na parte inferior e conte o número de Drosophila que estão se movendo para cima ou para baixo. Registre esses dados para o ponto de tempo 30 na tabela.
- Após 60 segundos, gire a câmara para que o lado A fique na parte inferior novamente e registre o número de moscas em movimento para o ponto de tempo 60. Clique aqui para baixar a Tabela 1
- Segure a câmara sobre o frasco para moscas e abra cuidadosamente a tampa para devolver toda a Drosophila de volta ao frasco vazio.
- Fototaxia
- Para realizar uma análise de fototaxia, primeiro cubra o lado A da câmara de escolha com papel alumínio, tomando cuidado para que o papel alumínio atinja o centro exato entre os dois lados.
- Certifique-se de que as tampas estejam presas em ambas as extremidades da câmara. HIPÓTESES: Neste exercício, a hipótese alternativa é que mais moscas serão encontradas no lado claro da câmara de escolha, se as chaminés forem atraídas pela luz, ou no lado escuro se forem repelidas pela luz. A hipótese nula é que a Drosophila não terá preferência em relação a nenhum dos estímulos. Portanto, um número igual de moscas será encontrado em ambos os lados da câmara de escolha.
- Abra a aba da fita no centro da câmara de escolha, insira o funil no orifício e bata todas as 40 moscas na câmara conforme descrito anteriormente.
- Defina o cronômetro para soar um alarme em 10 minutos.
- Quando o alarme soar, pare o cronômetro e conte o número de moscas no lado aberto B da câmara.
- Subtraia esse número do número total de moscas adicionadas à câmara de escolha para calcular o número de moscas no lado coberto A.
- Registre esses dados na tabela para o ponto de tempo 10. Clique aqui para baixar a Tabela 2
- Com cuidado, retorne todas as moscas de volta ao frasco vazio.
- Quimiotaxia
- HIPÓTESES: Neste exercício, a hipótese alternativa é que mais moscas serão encontradas na lateral da câmara com o vinagre de maçã se as moscas forem atraídas pelo odor. Ou, se as moscas forem repelidas pelo vinagre, mais delas serão encontradas no lado da câmara apresentando a água inodora. A hipótese nula é que a Drosophila não terá preferência em relação a nenhum dos estímulos e se moverá aleatoriamente na câmara. Use uma pipeta de plástico descartável individual para dispensar duas gotas de vinagre de maçã em uma bola de algodão para o lado A da câmara.
- Use uma pipeta de plástico descartável individual para dispensar duas gotas da água destilada em uma bola de algodão para o lado B da câmara.
- Dobre dois pedaços de fita sobre si mesmos para criar pedaços individuais de fita dupla-face e use a fita para prender cada bola de algodão no interior da tampa da garrafa única.
- Aparafuse as tampas das garrafas com as bolas de algodão nos lados correspondentes da câmara.
- Transfira todas as moscas para a câmara e ajuste o cronômetro para soar um alarme após 10 minutos.
- Quando o alarme soar, pare o cronômetro e registre o número de moscas em cada lado da câmara. Clique aqui para baixar a Tabela 3
- No final do experimento final, canalize as moscas para um tubo de necrotério contendo 70% de etanol.
- Desmonte as câmaras de escolha para reciclagem. NOTA: Como todos os produtos químicos usados nesses experimentos são seguros para laboratório, os líquidos podem ser descartados na pia, as câmaras enxaguadas e os sólidos podem ser jogados fora no lixo.
- Resultados
- Reúna todos os dados coletados para os experimentos de geotaxia, fototaxia e quimiotaxia.
- Plote esses valores como gráficos de barras para diferentes condições e diferentes pontos de tempo.
- Use esses dados para fazer inferências sobre o comportamento da drosophila melanogaster.