Dissecção das glândulas salivares e intestino médio de Ae. aegypti mosquitos

Meu nome é Judy Coleman e faço parte do James Lab. Aqui na UCI, estamos no Departamento de Biologia Molecular e Bioquímica. Hoje vou dissecar mosquitos Eptide e dissecar a glândula salivar no intestino médio.

Estamos interessados nesses tecidos específicos porque eles estão muito envolvidos na via do vírus e dos parasitas. Quando um mosquito ingere uma refeição de sangue, o vírus do parasita vai para a glândula salivar e, da glândula salivar, vai para o intestino médio. Ele passa pelo epiepitélio, intestino médio, e depois para a linfa do zumbido.

E isso viaja pela corrente sanguínea do mosquito, a hemolinfa e entra na glândula salivar. Lá ele reside até que esteja pronto para tomar outra refeição de sangue. Está bem.

O que vou fazer agora primeiro é dissecar o intestino médio dos anos oitenta do Egito. Primeiro de tudo, eu preciso colocar uma vez PBS. Este é um amortecedor, ou seja, são nossas boas condições fisiológicas.

Então nós o colocamos no escorregador e eu estou resfriado para evitar que o mosquito voe enquanto estamos dissecando, para que eu pegue o intestino médio para obter um intestino médio, eu tenho que apontar o mosquito. Eu coloco o meu, eu uso uma sonda que eu fiz e eu coloco a sonda através do tórax do mosquito. Depois de colocá-lo sob o microscópio, pego a pinça, pego a ponta da sucção do abdômen, puxo e deixo o intestino médio para trás.

Então, o anão, o anão está bem ali, e eu vou fazer isso. Aí está. Há o intestino médio isolado.

No momento, vamos dissecar as glândulas salivares dos anos oitenta do olho GT. E este procedimento eu uso duas sondas diferentes e o fórceps. Eu tenho uma sonda aqui que tem um pino reto, e eu uso isso para pegar o mosquito.

Eu uso uma sonda que tem um pino angular, e eu uso isso para empurrar a lente comido para fora do mosquito. O fórceps eu uso para puxar a cabeça do mosquito antes de tirar as glândulas salivares. Quando tiro o mosquito da placa de Petri, cutuco-o no tórax.

É mais fácil para mim puxar, tirar as glândulas se eu puder remover as pernas. Então eu só faço isso à mão. Eu então coloco o mosquito no tampão e, e puxo a cabeça dela, e empurro o tórax, e empurro a glândula salivar.

Aqui está uma boa olhada na glândula salivar, e há uma olhada em ambas as partes do par de glândulas salivantes. Acabamos de dissecar as glândulas salivantes em meio às entranhas dos anos oitenta, mosquito gyp eye. Olhamos para este material em um nível molecular para interferir no caminho do vírus ou do parasita dentro do mosquito.