Transplante de células progenitoras neurais humanas no cérebro de camundongos

Prenda um mouse anestesiado em uma estrutura estereotáxica.

Aplique pomada para os olhos para evitar o ressecamento da córnea.

Depile o couro cabeludo e desinfete a pele.

Insira as barras auriculares para estabilizar o crânio.

Em seguida, faça uma incisão na linha média para expor o crânio.

Faça um furo no crânio na coordenada alvo.

Carregue uma seringa com células progenitoras neurais humanas geneticamente modificadas ou NPCs expressando luciferase e uma proteína fluorescente para visualização.

Alinhe a seringa com o local alvo e baixe a agulha até a profundidade desejada.

Aplique adesivo de tecido ao redor da agulha para evitar vazamento de células.

Injete as células lentamente para garantir uma distribuição uniforme.

Segure a agulha no lugar brevemente para evitar o refluxo da suspensão da célula.

Por fim, retire a agulha lentamente e feche a incisão.

O modelo de camundongo com NPCs transplantados agora está pronto para visualização.

Transportar o animal da câmara de indução para o quadro estereotáxico, mantendo a anestesia com máscara facial.

Aplique lubrificante oftálmico para evitar que os olhos sequem. Raspe o couro cabeludo do camundongo com um barbeador elétrico e desinfete a pele com solução de betadina a 5% usando cotonetes. Prenda a cabeça do mouse e insira as barras auriculares no meato externo.

Faça um furo com um diâmetro de dois a três milímetros no crânio com uma broca odontológica cirúrgica. Ressuspenda as células preparadas no tubo e coloque dois microlitros de suspensão celular em uma seringa. Coloque a seringa acima do local alvo e mova lentamente a agulha para a superfície da dura-máter e calcule as coordenadas de profundidade.